裙帶菜配子體人工無菌培育技術的研究.pdf

1、本課題以裙帶菜配子體為研究對象，通過試驗幾種常用消毒劑對裙帶菜種帶進行無菌處理，以人工無菌手段制備出無菌裙帶配子體，以此得到對裙帶菜種帶的最佳消毒方法；利用制備出的無菌裙帶配子體進行保種培養(yǎng)，得到無菌配子體的最佳保種條件，并對其無菌擴大培養(yǎng)條件進行研究，本研究所用方法和主要取得的研究成果如下：
　　1、裙帶菜配子體的無菌制備：
　　為了尋找裙帶菜配子體無菌培育試驗中對帶有成熟孢子囊的裙帶菜種帶的最佳消毒方法，使用了雙抗海水（

2、含120mg/L青霉素+100mg/L鏈霉素）、1.5％碘化鉀，這2種消毒劑及其不同的時間組合，試驗對裙帶菜種帶塊的消毒效果及胚孢子的萌發(fā)率。根據本實驗結果，最有效的消毒方案為：常規(guī)擦洗后，無菌海水沖洗一次，再用雙抗海水浸泡20min，然后用1.5%濃度的碘化鉀海水溶液浸泡10min，最后用無菌海水浸泡10min，這種消毒效果最佳，且不影響胚孢子的萌發(fā)率。
　　2、裙帶菜配子體的無菌保種：
　　根據實驗結果，將上述手段處理后

3、制備出的無菌裙帶配子體在10℃的光照培養(yǎng)箱內,24小時光照，保持40d的更換培養(yǎng)液周期，試管使用消毒棉塞封口，為配子體的最佳保種條件。
　　3、裙帶菜配子體的無菌擴大培養(yǎng)：
　　利用上述手段獲得的無菌裙帶配子體，慢慢擴培至100ml錐形瓶內，當生長量至可供實驗所需時，進行無菌擴大培養(yǎng)實驗。15℃的光照培養(yǎng)箱內,3000lux的光照強度，保持30d的更換培養(yǎng)液周期，500ml錐形瓶使用濾紙膜封口，充氣時空氣通過微孔濾器過濾，可