伴大豆球蛋白抗菌肽的制備及其對(duì)鴨免疫功能的影響.pdf

1、大豆蛋白主要包括大豆球蛋白和伴大豆球蛋白，研究發(fā)現(xiàn)其主要組分之一的伴大豆球蛋白含有更豐富的功能結(jié)構(gòu)區(qū)。本研究通過(guò)幾種常用酶對(duì)從大豆蛋白分離純化的伴大豆球蛋白進(jìn)行酶解，選出對(duì)其水解度最高的酶；通過(guò)體外抑菌試驗(yàn)鑒定對(duì)有害細(xì)菌有抑菌作用的伴大豆球蛋白酶解肽；通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)探討酶解肽對(duì)動(dòng)物抑制有害大腸桿菌感染的作用，以及對(duì)動(dòng)物胃腸道免疫功能的影響。
　　 1.伴大豆球蛋白的酶解研究
　　 采用幾種不同來(lái)源、不同性質(zhì)的蛋白酶酶解

2、伴大豆球蛋白，以水解度為指標(biāo)篩選最適水解伴大豆球蛋白的蛋白酶。結(jié)果表明：復(fù)合風(fēng)味蛋白酶為最佳工具酶。通過(guò)單因素分析、正交實(shí)驗(yàn)確定復(fù)合風(fēng)味蛋白酶酶解伴大豆球蛋白的最佳水解條件：PH值為7，水解溫度為50℃，底物質(zhì)量濃度為14％，酶與底物比濃度為6％，水解時(shí)間為8h。
　　 2.伴大豆球蛋白抗菌肽抗菌活性研究
　　 研究采用復(fù)合風(fēng)味蛋白酶在不同時(shí)間條件下水解伴大豆球蛋白，測(cè)定不同時(shí)間的酶解液對(duì)有害大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑

3、菌活性。結(jié)果表明：2 h水解產(chǎn)生的酶解肽具有抑菌活性，其對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小殺菌濃度分別是2.6mg/ml和3.2mg/ml。2h水解液經(jīng)Sephadex-G15分離純化，采用平板計(jì)數(shù)法鑒定各組分，結(jié)果證明第2組分有抑菌活性。
　　 3.伴大豆球蛋白抗菌肽對(duì)鴨胃腸道免疫功能的影響
　　 選用80只鴨，預(yù)飼一周后正式開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。按照配對(duì)試驗(yàn)的方法分為8個(gè)處理組，即健康對(duì)照組(Ⅰ組)、感染對(duì)照組(Ⅱ組)、灌服CAB

4、P低劑量組(Ⅲ組)、灌服CABP中劑量組(Ⅳ組)灌服CABP高劑量組(Ⅴ組)，飲水給藥低劑量組(Ⅵ組)，飲水給藥中劑量組(Ⅶ組)，飲水給藥高劑量組(Ⅷ組)，從第3周開(kāi)始連續(xù)灌服和飲水給藥3周，每周3次，每組10只鴨，而后于第6周胸肌注射人工感染大腸桿菌O78(劑量4×108)。測(cè)定脾臟IL-2、TNF-α和sIgA水平。結(jié)果顯示：本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明伴大豆球蛋白復(fù)合風(fēng)味蛋白酶酶解肽能提高動(dòng)物機(jī)體免疫機(jī)能，抵御外源性大腸桿菌的侵襲感染，預(yù)防胃腸