廣譜拮抗菌WB3的激光誘變篩選與復合菌肥的生物防治應用.pdf

1、目的：鑒定細菌WB3的種屬并確認其拮抗范圍；通過激光對拮抗菌WB3進行誘變篩選，以篩選出拮抗能力得到有效提高并可穩(wěn)定遺傳的突變菌株；使其與另一株具有廣譜拮抗性的枯草芽孢桿菌QM3進行混合培養(yǎng)發(fā)酵，將發(fā)酵菌液與生化黃腐酸菌肥配制成可應用于田間病害防治的復合生物菌肥。 方法：通過形態(tài)學觀察、生理生化實驗檢測以及16SrRNA序列分析對已分離得到的WB3進行菌種鑒定；做WB3針對12株常見植物病害的平板拮抗實驗來初步確認其拮抗范圍；采

2、用He—Ne激光照射具有拮抗能力的枯草芽孢桿菌WB3，同時以番茄早疫病菌作為指示菌，以期獲得誘變效果最佳且能穩(wěn)定遺傳的正向突變菌株；嘗試將QM3與WB3進行混合培養(yǎng)，包括平板交叉劃線、液體搖瓶培養(yǎng)等方法，觀察混合培養(yǎng)下的細菌總數以及拮抗能力的變化；通過改進玉米粉液體培養(yǎng)基來摸索適合二者混合培養(yǎng)的工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基；將混合拮抗菌液與生化黃腐酸菌肥進行復配獲得復合生物防治菌肥，并進行田間應用試驗來檢驗其防治效果。 結果：WB3經鑒定是一

3、株枯草芽孢桿菌，且對12株植物致病真菌均具有拮抗效應，是一株廣譜拮抗細菌；30min He—Ne激光輻照對WB3有明顯的誘變作用，所篩選出的最佳突變株WB3’對指示菌的拮抗能力有顯著的提高并能穩(wěn)定遺傳：QM3與WB3’可以較好地共同生長，且混合拮抗菌發(fā)酵液在拮抗能力方面出現了互補提高的現象；復合生物菌肥相較于化學農藥，在番茄等植物大田試驗的防病、治病以及促生等效應方面具有全面優(yōu)勢。 結論：運用He—Ne激光誘變方法可以提高WB3