sebia血清免疫固定sop_第1頁
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文檔簡介

1、Sebia血清蛋白免疫固定標(biāo)準(zhǔn)操作流程血清蛋白免疫固定標(biāo)準(zhǔn)操作流程一、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備耗材:小炮彈管或生化小杯子、加樣槍2把(550ul和20200ul)、蒸餾水或去離子水500ml、二、操作流程:1、打開機(jī)器,選擇電泳程序“IF”,選擇染色程序“”,檢查1、血清稀釋并混勻泳道泳道血清血清(ul)稀釋液稀釋液(ul)IgG免疫固定泳道20100ELP參考泳道和其它免疫固定泳道30601、加樣梳點(diǎn)樣(以4人份為例)其中1、8、15泳道不加樣。

2、3、10泳道加各自的LgG。剩下其余各泳道加樣10μL。加完樣的加樣梳放置保濕盒內(nèi),最后一個樣品加完后放至保濕盒內(nèi)(齒朝上,擴(kuò)散5分鐘)。2、海綿條放置將海綿條掛在電極絲兩端的金屬釘上,海綿較凸起部分面向操作人員。4、膠片處理(免疫固定專用膠片、薄濾紙)電泳模塊的溫控板下方三分之一處用加樣槍加200μL蒸餾水;從黑色底框邊開始放置膠片,使水層與溫控板充分貼合,沒有氣泡;用薄濾紙迅速吸取膠片上多余的水分;放下黑色的運(yùn)送器,將加樣梳插至第6

3、齒上,合上機(jī)蓋。5、電泳,選擇免疫固定電泳程序,開始。6、加抗血清(抗血清、基準(zhǔn)色卡、抗體杯架、推動安裝架)扔掉使用過的加樣梳和海綿條,移除運(yùn)送器。將不銹鋼固定架置于溫控板底端;將抗體杯架裝在推動安裝架上,再放到膠片和固定架上;照基準(zhǔn)色卡對應(yīng)的孔加相應(yīng)的抗血清(10μL)。均勻地將抗血清推到各通道上。7、孵育(按開始鍵繼續(xù))8、用厚濾紙(光滑面朝下)充分吸去多余的凝膠后,扔掉厚濾紙,繼續(xù)至自動烘干。9、染色、褪色、清洗、烘干取出膠片,用

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