高中生物選修知識點_第1頁
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文檔簡介

1、1生物選修三易考知識點背誦專題 專題 1 基因工程 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進行嚴格 的設計,通過體外 體外 DNA DNA 重組和轉基因技術 重組和轉基因技術,賦予生物以新的遺傳特性 新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需 更符合人們需要的新的生物類型和生物產品 要的新的生物類型和生物產品。基因工程是在 DNA DNA 分子水平 分子水平上進行設計和施工的,又叫做 DN DNA 重組技術 重組技術。(一)基因工

2、程的基本工具1.“分子手術刀”——限制性核酸內切酶(限 限制性核酸內切酶(限制酶) 制酶) (1)來源:主要是從原核生物 原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識別雙鏈 DNA 分子的某種特定 特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定 特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一 專一性。 (3)結果:經限制酶切割產生的 DNA 片段末端通常有 兩種形式:黏性末端 黏性末端和平末端 平末端。2.“分子縫合針”——

3、DNA DNA 連接酶 連接酶(1)兩種 DNA 連接酶(E·coliDNA 連接酶和 T4- DNA 連接酶)的比較: ①相同點:都縫合磷酸二酯 磷酸二酯鍵。②區(qū)別:E·coliDNA 連接酶來源于大腸桿菌,只能 將雙鏈 DNA 片段互補的黏性末端 黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而 T4DNA 連接酶能縫合兩種末 兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低 較低。(2)與 DNA 聚合酶作用的異同:DNA 聚合酶只

4、能將單個核苷酸 單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA 連接酶是連接兩個 兩個 DNA DNA 片段 片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運輸車”——載體 載體(1)載體具備的條件: ①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存 能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點,供外源 具有一至多個限制酶切點,供外源 DNA DNA 片段 片段插入 插入。 ③具有標記基因,供重組 具有標記基因,供重組 DNA DNA 的

5、鑒定和選擇 的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質粒 質粒,它是一種裸露 裸露的、結構簡單的、獨立于細菌染色體之外,并 的、結構簡單的、獨立于細菌染色體之外,并 具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀 具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀 DNA DNA 分子 分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動植物病 噬菌體的衍生物、動植物病毒。 毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的 目的基因的獲取1.目的基因是指: 編碼蛋白質的結構基因 編碼蛋白質的結構

6、基因 。2.原核基因采取直接分離 直接分離獲得,真核基因是人工合成 工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法 轉錄法_和化學合成法 化學合成法_。3.PCR 技術擴增目的基因(1)原理:DNA DNA 雙鏈復制 雙鏈復制(2)過程:第一步:加熱至 90~95℃DNA DNA 解鏈 解鏈;第二步:冷卻到 55~60℃,引物結合到互補 引物結合到互補 DNA NA 鏈;第三步:加熱至 70~75℃,熱穩(wěn)定 熱穩(wěn)定 DNA DNA 聚合酶

7、 聚合酶從引物起始互補鏈的合成 從引物起始互補鏈的合成。第二步:基因表達 基因表達載體的構建 體的構建1.目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在 穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代 遺傳至下一代,使目的基因能夠表達 表達和發(fā)揮作用 和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因 目的基因+啟動子 啟動子+終止子 終止子+標記基 標記基因(1)啟動子:是一段有特殊結構的 DNA DNA 片段,位于基因的首端 首端,是 RNA RNA 聚合酶 聚合酶識別和結合的

8、部位,能驅動基因轉錄出 轉錄出 mRNA mRNA,最終獲得所需的蛋白質 蛋白質。31.理論基礎(原理): 細胞全能性 細胞全能性全能性表達的難易 程度:受精卵>生殖細 受精卵>生殖細胞>干細胞>體細胞 胞>干細胞>體細胞; 植物細胞>動物細胞 植物細胞>動物細胞2.植物組織培養(yǎng)技術 (1)過程:離體 離體的植物器官、組織或細胞―→愈傷組 愈傷組織―→試管苗―→植物 體 (2)用途:微型繁殖、作物脫 微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單

9、 毒、制造人工種子、單 倍體育種、細胞產物的 倍體育種、細胞產物的 工廠化生產 工廠化生產。 (3)地位:是培育轉基因植 轉基因植物、植物體細胞雜交 植物體細胞雜交培育植物新品種的最后一 道工序。3.植物體細胞雜交技術(1)過程:(2)誘導融合的方法:物理法包括離心、振 離心、振動、電刺激 動、電刺激等?;瘜W法一般是用聚乙二醇( 聚乙二醇(PE PEG)作為誘導劑。(3)意義:克服了遠緣雜交不親和的障礙。 克服了遠緣雜交不親和的障礙。(

10、二)動物細胞工程1. 動物細胞培養(yǎng) (1)概念:動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關 的組織 組織,將它分散成單個細胞 單個細胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和繁殖 生長和繁殖。(2)動物細胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼 動物胚胎或幼齡動物的器官或組織 齡動物的器官或組織)→剪碎→用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶 胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成 單個細胞 單個細胞→制成細胞懸液 細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代 原代培

11、養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶 處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代 傳代培養(yǎng)。 (3)細胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上 貼附在瓶壁上,稱為細胞貼壁 細胞貼壁。細胞數目不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制 相互抑制時,細胞就會停止 停止分裂增殖 分裂增殖,這種現象稱為細胞的接觸抑制 細胞的接觸抑制。(4)動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件: ①無菌、無毒的環(huán)境 無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應進行無菌 無菌處理。通常

12、還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素 抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產 代謝產物積累對細胞自身造成危害 物積累對細胞自身造成危害。 ②營養(yǎng) 營養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長因 子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、 血清、血漿 血漿等天然成分。 ③溫度 溫度:適宜溫度:哺乳動物多是 36.5 36.5℃+ ℃+0. 0.5℃;pH:7.2 7.2~7.4 7.4。④氣體環(huán)境 氣體環(huán)境:95%空氣+5

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