基于PepT1-ER靶向的納米膠束給藥系統(tǒng)：設(shè)計(jì)、合成及生物活性研究.pdf

1、肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(PepT1)和雌激素受體(ER)在部分腫瘤組織高度表達(dá)，其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系，本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)PepT1對(duì)L-纈氨酸-L-纈氨酸(L-Val-L-Val)二肽前藥能夠特異性識(shí)別、吸收;而雷洛昔芬對(duì)ER具有高親和力且具有拮抗活性?；诖耍菊撐膰L試在兩親性聚合物的親水端分別引入L-Val-L-Val二肽片段和雷洛昔芬結(jié)構(gòu)片段，然后通過(guò)大分子伯胺化合物引發(fā)氨基酸（丙氨酸或組氨酸）的N-羧基-α-氨基酸-環(huán)內(nèi)酸

2、酐(NCA)的開(kāi)環(huán)聚合反應(yīng)，設(shè)計(jì)合成了分別基于PepT1和ER靶向的聚乙二醇-聚氨基酸兩個(gè)系列的嵌段聚合物，并經(jīng)IR和1H NMR表征確定其結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步利用透析法制備成膠束，再負(fù)載上腫瘤藥阿霉素(DOX)，得到PepT1和ER靶向的納米膠束給藥系統(tǒng)，并對(duì)其理化、外觀形態(tài)及生物活性進(jìn)行了研究。
　　本文設(shè)計(jì)合成了4個(gè)基于PepT1受體靶向的聚合物，通過(guò)DLS檢測(cè)其粒徑均在200nm以內(nèi)，透射電子顯微鏡(TEM)觀察其均為圓球狀。應(yīng)用

3、紫外測(cè)定了載藥膠束的載藥量和包封率，4個(gè)聚合物膠束均可以有效地負(fù)載阿霉素(DOX)。其中聚合物L(fēng)-Val-L-Val-PEG-PHis的載藥率高達(dá)8.5％，包封率為89.5％。且由于疏水端引入了酸敏感的聚組氨酸嵌段，在pH5.5的條件下，24h后DOX的釋放量能達(dá)到85％，明顯高于正常生理?xiàng)l件下的40％，表現(xiàn)出對(duì)酸性環(huán)境敏感的特性。在體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)中，4個(gè)載藥膠束對(duì)人肝癌細(xì)胞株(HepG2)、人胃癌細(xì)胞株(SGC7901)、人乳腺癌細(xì)胞

4、(MCF-7)均表現(xiàn)出與游離DOX相當(dāng)?shù)幕钚?。本文進(jìn)一步研究了聚合物膠束對(duì)靶細(xì)胞人克隆結(jié)腸腺癌細(xì)胞(Caco-2)細(xì)胞的細(xì)胞毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，聚合物膠束本身對(duì)細(xì)胞基本無(wú)毒性，負(fù)載上DOX之后表現(xiàn)出和游離DOX相當(dāng)?shù)亩拘?。體外細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，聚合物膠束的細(xì)胞攝取量明顯高于游離的DOX，且靶藥L-Val-L-Val-PEG-PAla-DOX和L-Val-L-Val-PEG-PHis-DOX的細(xì)胞攝取量也明顯高于非靶藥Ac-PEG-PAl

5、a-DOX和Ac-PEG-PHis-DOX，競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了PepT1的靶向作用。
　　本文還設(shè)計(jì)合成了4個(gè)基于ER受體靶向的聚合物，同樣分別利用DLS和TEM證實(shí)了其納米結(jié)構(gòu)，并檢測(cè)其粒徑分布(＜200nm)和形態(tài)（圓球狀）。紫外測(cè)試發(fā)現(xiàn)，4個(gè)聚合物均能有效的對(duì)DOX進(jìn)行負(fù)載，其中聚合物Rlx-PEG4000-PHis的載藥率高達(dá)9.07％，包封率高達(dá)91.43％，負(fù)載效果十分良好。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明，聚合物材料對(duì)SGC