核（苷）酸的熒光增強效應及其分析應用.pdf

1、山東大學碩士學位論文核（苷）酸的熒光增強效應及其分析應用姓名：李蕾申請學位級別：碩士專業(yè)：分析化學指導教師：楊景和20030506堡壘塹二——————些壅塑鏊鯊鱉墾———————≤墼顯增強。同時提出了在絡合物中ATP和phen間存在堆積效應，ATP吸收的能量通過堆積效應轉移給phen，然后再轉移到Tb“上的可能的能量轉移通道。在論文的第四部分中，主要研究了十六烷基溴化吡啶(CPB)與TbGdDNA體系的相互作用。結果表明，CPB的加入能

2、夠使已有體系的共發(fā)光現(xiàn)象得到明顯的增強，且該體系的熒光強度與核酸的濃度在一定范圍內成線性關系。將該體系用于DNA和RNA的檢測中，線性范圍分別為1x101lxlO‘gtml和910一一IxlO—g／ml，檢出限分別為41xlO。g／ml和32x1019／m1。另外，我們對實際樣品進行了測定，實驗結果令人滿意。我們對該效應產生的機理進行了較為深入的研究，認為CPB和核酸通過靜電引力和氨鍵作用力使核酸在CPB上發(fā)生聚集而生成了陽離子表面活性

3、劑一核酸離子絡合物。而Gd”和Tb”能夠分別與核酸上的磷酸根鍵合，分別形成Tb核酸CPB和Gd核酸CPB絡合物。吸收能量后，通過分子間能量轉移將能量傳遞到Tb3上，從而增強鋱離子的特征熒光。另外，體系中釓絡合物的濃度遠大于鋱絡合物的濃度，因而每一個鋱絡合物周圍均被許多釓絡合物包圍，形成了一個“能量絕緣殼”，減少了能量損失，提高了熒光量子產率。本論文的主要特點：1首次發(fā)現(xiàn)并研究了核營酸體系中的稀土共發(fā)光效應并將其應用于核苷酸的測定中。這對

4、于核菅酸的研究是一個重要進展。本方法為稀土共發(fā)光效應的應用開辟了一個新的領域，同時也為核苷酸的檢測提供了一個新的熒光探針，該效應使GMP和ATP的檢出限降低卜2個數(shù)量級。與核苷酸的其它熒光光度法相比，本方法具有操作簡便、快速、線性范圍寬、靈敏度高等優(yōu)點。2提出了核苷酸體系中稀土共發(fā)光效應的作用機理。在Tb—GdGMP體系中，認為它們之間可能通過氧橋連接成網狀絡合物，同時通過氧橋實現(xiàn)了能量在絡合物之間的傳遞。在Tb—Gd—phen—ATP

5、體系中，認為稀土離子與ATP、phen之間能夠形成Tb—ATPphen和Gd—ATP—phen絡合物，兩絡合物能夠聚合在一起形成一大的聚集體。同時配體ATP與phen之間還存在著芳環(huán)堆積效應。這種堆積效應不僅增強了絡合物的穩(wěn)定性，同時也使得ATP上的能量能夠phen轉移給Tb”。3實驗發(fā)現(xiàn)，通過表面活性劑引入，使得核酸體系的共發(fā)光現(xiàn)象得到明顯的增強。實驗結果表明，CPB和核酸通過靜電引力和氫鍵作用力使核酸在CPB上發(fā)生聚集而生成了陽離予