60%~70%最大攝氧量跑臺運動對大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組差異表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本研究探討4周60%~70%最大攝氧量跑臺運動對大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組差異表達的影響,篩選出對運動應(yīng)激敏感的目標蛋白質(zhì)點,并對部分目標蛋白質(zhì)的mRNA表達水平進行檢測,為科學(xué)指導(dǎo)運動健身及慢性心血管疾病的運動康復(fù)研究提供新的思路及理論依據(jù)。
   方法:將20只SD雄性大鼠隨機分為對照組和實驗組,以跑臺運動的方式,復(fù)制遞增運動負荷至24m·min—1的4周60%~70%最大攝氧量運動實驗動物模型;提取右心室肌組織的全蛋白進行

2、雙向凝膠電泳分離,運用ImageMaster2D Platinum圖像分析軟件對2—DE膠進行分析,選擇差異表達上調(diào)5倍以上及下調(diào)至1/5以下的12個蛋白質(zhì)點作為備選目標蛋白質(zhì)點,用串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜蛋白質(zhì)儀(ULGRAFL—FLEX—TOF/TOF)進行質(zhì)譜鑒定,以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)對部分目標蛋白質(zhì)的mRNA表達水平進行檢測。
   結(jié)果:①大鼠經(jīng)4周60%~70%最大攝氧量運動后,與對照組相比,心臟重量增加的百

3、分率為0.62%,而心臟重量指數(shù)增加13.7%。心臟重量指數(shù)的增高有顯著性差異(P<0.05)。②2—DE圖譜上,對照組檢測蛋白質(zhì)點437±17個,實驗組檢測448±19個;運動后47個蛋白質(zhì)點發(fā)生了較明顯的變化。③通過對差異表達上調(diào)5倍以上及下調(diào)至1/5以下的12個點進行質(zhì)譜鑒定,共鑒定出了11個蛋白,這些蛋白分別是:線粒體琥珀酸脫氫酶輔酶黃素蛋白亞基、線粒體—吡咯啉—5—羥酸酯脫氫酶、線粒體ATP合酶α亞基、Josephin—1、谷

4、胱甘肽S—轉(zhuǎn)移酶Mu2、線粒體細胞色素b—cl聯(lián)合體亞基、心肌肌動蛋白α、核苷二磷酸激酶B、微管動力調(diào)控蛋白、泛素融合降解1、腺苷酸激酶同工酶1。④逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈實驗結(jié)果顯示:運動組大鼠心肌肌動蛋白α1、腺苷酸激酶同工酶1、谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶Mu2、核苷二磷酸激酶B、線粒體ATP合酶亞基a等的mRNA相對凈光密度值低于對照組(p>0.05),表達水平下降;Josephin域蛋白1的mRNA相對凈光密度值高于對照組(p>0.05),表達水平

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