分子印跡固相萃取-高效液相色譜法在食品危害殘留物分析的應用研究.pdf

1、食品安全是一個日趨重要的公共衛(wèi)生議題，食品中化學污染是近幾年來國際社會開始研究的公共衛(wèi)生問題之一。食品中化學污染物殘留的特點是樣品中殘留物水平很低，樣品基質復雜，干擾物質多，不易從樣品中分離、純化殘留物。分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymer,MIP)由于具有高度交聯(lián)的結構，穩(wěn)定性好，能夠在高溫、高壓、有機溶劑、酸、堿等苛刻環(huán)境中使用，造價低廉，是分子識別領域的理想敏感材料。分子印跡固相萃取(mole

2、cularly imprinted solidphase extraction，MISPE)不僅適用于復雜基體樣品的凈化，還適用于需要大量富集的樣品前處理。本課題基于分子印跡技術的樣品快速前處理方法，開展了水產品中的孔雀石綠(MG)、結晶紫(GV)及其代謝產物和辣椒制品中水溶性、脂溶性合成色素分子印跡固相萃取-高效液相色譜分析方法的研究，主要研究內容如下：
　　 1.概述了MISPE技術的特點，綜述了MISPE原理、制備技術的研

3、究進展。介紹了分子印跡技術的原理，簡介了MIP的制備條件和制備方法，綜述了分子印跡技術在食品樣品前處理的應用進展。
　　 2.建立了柱后衍生-高效液相色譜法測定水產品中的孔雀石綠(MG)及其代謝產物的分析方法。對水產品樣品的提取和凈化條件進行了改進，建立了一種新的衍生反應方法，采用了環(huán)保且易獲得的碘溶液為衍生劑，隱性孔雀石綠的在線衍生實驗效率取決于碘衍生劑條件。通過實驗，對碘衍生劑的濃度、pH值及溫度條件進行了優(yōu)化，尋找信號/噪

4、音比(S/N)最大值。方法評價按照歐盟2002/657/EC號文件的規(guī)定對回收率、準確度、精密度、實驗室重現(xiàn)性、穩(wěn)定耐用性進行實驗驗證，實現(xiàn)了草魚、蝦和貝殼類不同種水產品中孔雀石綠和隱性孔雀石綠及其代謝產物多殘留的篩選。
　　 3.建立了柱后衍生-高效液相色譜法測定水產品中的孔雀石綠和隱性孔雀石綠的分析方法。利用分子印跡固相萃取柱，離線處理樣品，采用高效液相色譜法測定了水產品中的孔雀石綠結晶紫及其代謝物。通過沉淀聚合法，以甲基丙

5、烯酸(MAA)為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)為交聯(lián)劑，合成了一種新型的印跡材料，并用于固相萃取柱填料。利用洗脫實驗評價印跡固相萃取柱的效果和選擇性。結果表明：印跡固相萃取柱對孔雀石綠和結晶紫及其代謝物具有很高的萃取選擇性。用溶劑標準曲線計算孔雀石綠結晶紫及其代謝物在草魚中的平均回收率為89.89％～99.1％，在蝦中的平均回收率為90.6％～101.2％，貝殼中的平均回收率為91.3％～96.3％。這三種水產品中的檢測限(

6、CCα))為0.11μg k-1～0.14μg kg-1，檢測能力(CCβ)為0.19μg kg-1～0.24μg kg-1。
　　 4.建立了辣椒制品中的水溶性和脂溶性合成色素高效液相分析方法。利用沉淀聚合法合成了分子印跡聚合物，用4-乙基吡啶(4-VP)用為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)為交聯(lián)劑，甲酸-甲醇為洗脫劑研究了洗脫效果。由于分子印跡聚合物與水溶性、脂溶性合成色素之間存在疏水作用和離子交換作用，因此具有很

7、高的萃取選擇性。利用上述材料對于辣椒制品中的3種水溶性和6種脂溶性色素進行樣品凈化處理，高效液相色譜法對辣椒制品中的9種合成色素進行了測定。結果表明，平均加收率為：辣椒醬72.1％～95.6％，辣椒粉72.1％～92.3％，樣品中的檢測限(CCα)為1.2μg kg-1～1.6μg kg-1，檢測能力(CCβ)為1.9μg kg-1～2.4μg kg1。
　　 5.建立了對位紅、蘇丹紅G、蘇丹Ⅰ、蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ等六種脂溶

8、性蘇丹紅染料的檢測方法。利用甲酸提取樣品中的脂溶性蘇丹紅染料，用氯仿萃取凈化，建立了高效液相色譜測定六種脂溶性蘇丹紅染料的方法，并將所建立的方法應用于辣椒制品中合成色素的測定，辣椒粉在日內和日間平均回收分別為94.9％～101.2％和94.9％～100.3％，精密度為2.9％～4.0％和3.7％～4.9％；辣椒醬在日內和日間平均回收分別為94.1％～99.2％和94.2％～98.6％，精密度為2.8％～3.8％和3.3％～4.2％。方法