簡介：碩士學(xué)位論文論文題目重組腺病毒AD5MIR34A的抗肝癌作用研究研究生姓名汪畢指導(dǎo)教師姓名錢其軍專業(yè)名稱細(xì)胞生物學(xué)研究方向基因病毒治療論文提交日期2013年4月

簡介：目的運(yùn)用疾病認(rèn)知問卷，研究慢性HBV感染者的疾病認(rèn)知，使用因素分析法探討其疾病認(rèn)知的歸因；研究乙肝后肝硬化患者在視空間感知、記憶、注意等神經(jīng)心理學(xué)方面的特征性表現(xiàn)，為診斷亞臨床肝性腦病提供早期診斷依據(jù)和行為學(xué)檢測手段。方法87例慢性HBV感染者完成修訂的簡體中文版疾病認(rèn)知問卷CIPQR；26例肝炎后肝硬化LC患者和75例健康者運(yùn)用神經(jīng)心理學(xué)成套測驗(yàn)量表HKUAHMUBATTERYL進(jìn)行測試。測試內(nèi)容包括注意、記憶、視覺空間組織功能和額葉流暢性等12個(gè)項(xiàng)目，其中注意功能有數(shù)字廣度測驗(yàn)、氣球叉掉測驗(yàn)、數(shù)字警覺測驗(yàn)、數(shù)字符號測驗(yàn)、數(shù)字顏色連線測驗(yàn)和STROOP測驗(yàn)；記憶功能包括中文聽覺詞匯學(xué)習(xí)測驗(yàn)和RUFF路線學(xué)習(xí)測驗(yàn)；視覺空間組織功能包括HOOPER視覺組織測驗(yàn)和線段方向判定測驗(yàn)；額葉流暢性功能包括詞匯流暢性測驗(yàn)和圖形流暢性測驗(yàn)。每位研究對象的測試均一次完成，每次測試時(shí)間約15～2小時(shí)。全部測驗(yàn)都是由同一主試完成。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理運(yùn)用SPSS100統(tǒng)計(jì)軟件。結(jié)果疾病認(rèn)知因子對整體量表的效度以及各認(rèn)知因子內(nèi)部的信度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。性別、受教育程度對慢性HBV感染者認(rèn)知因素的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。18項(xiàng)致病因素可歸納為心理應(yīng)激、行為和生物學(xué)因素，其中心理應(yīng)激與疾病周期性，生物學(xué)因素與疾病相關(guān)性、治療控制性有相關(guān)；行為因素與個(gè)人控制性、治療控制性、疾病周期性、疾病相關(guān)性和情緒陳述有相關(guān)性。與糖尿病患者比較，慢性HBV感染者的疾病認(rèn)知因子分值明顯偏高P005。線段方向判定測驗(yàn)、STROOP點(diǎn)和STROOP字測驗(yàn)與受教育程度有相關(guān)性P005。結(jié)論慢性HBV感染者尤其是CHB患者有過度的負(fù)性疾病認(rèn)知；慢性HBV感染者和其它慢性疾病有相似的疾病歸因；性別和受教育程度對慢性HBV感染者的疾病認(rèn)知無影響，婚姻狀況可改變個(gè)人控制性。肝硬化患者視空間覺組織功能、注意以及記憶等高級神經(jīng)功能顯著受損；神經(jīng)心理學(xué)實(shí)驗(yàn)可以作為亞臨床肝性腦病的輔助診斷工具。

簡介：目的探討不同濃度的銀杏葉提取物EGB761對乙型肝炎病毒分泌抗原的作用，進(jìn)一步研究中藥在抗乙型肝炎病毒感染過程中的價(jià)值。方法第一部分1用MTT法檢測銀杏葉提取物對HEPG2215細(xì)胞的毒性作用。2用不同濃度的銀杏葉提取物作用于HEPG2215細(xì)胞，期間分不同的時(shí)間段4D和6D收集細(xì)胞培養(yǎng)上清，用時(shí)間分辨免疫熒光分析TRFIA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中乙肝病毒表面抗原HBSAG及乙肝病毒E抗原HBEAG的表達(dá)情況。用SPSS160軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，分析EGB761對HEPG2215細(xì)胞分泌抗原的作用。第二部分用人乙型肝炎病毒HBV陽性血清和銀杏葉提取物作用于HL7702細(xì)胞株和樹鼩原代肝細(xì)胞，在不同的時(shí)間點(diǎn)（4D和6D）收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液和細(xì)胞DNA，用TRFIA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的HBSAG用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR方法檢測細(xì)胞內(nèi)的HBVDNA。結(jié)果第一部分1MTT實(shí)驗(yàn)顯示分別在細(xì)胞培養(yǎng)的第4天和第6天進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn)，檢測實(shí)驗(yàn)組吸光度值A(chǔ)OD與對照組吸光度值A(chǔ)OD，經(jīng)單因素方差分析沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。2HEPG2215細(xì)胞經(jīng)不同濃度的EGB761干預(yù)后，第4天和第6天的細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBSAG吸光度A值及HBEAG吸光度A值，明顯少于未加藥作用過的陽性對照組細(xì)胞培養(yǎng)上清中的乙肝病毒抗原吸光度A值，經(jīng)單因素方差分析，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜005。3HEPG2215細(xì)胞經(jīng)不同濃度的EGB761干預(yù)后，EGB761的濃度在55ΜGML～1750ΜGML的劑量范圍內(nèi)，4D時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)上清中的HBSAG吸光度A值小于6D時(shí)對應(yīng)藥物濃度的細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBSAG吸光度A值，4D時(shí)EGB761對HEPG2215細(xì)胞分泌HBSAG的抑制率大于6D時(shí)對應(yīng)藥物濃度對HEPG2215細(xì)胞分泌HBSAG的抑制率而EGB761的濃度在219ΜGML～1750ΜGML的劑量范圍內(nèi)，雖然4D時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)上清中的HBEAG吸光度A值大于6D時(shí)對應(yīng)藥物濃度的細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBEAG吸光度A值，但是4D時(shí)EGB761對HEPG2215細(xì)胞分泌HBEAG的抑制率有大于6D時(shí)對應(yīng)藥物濃度對HEPG2215細(xì)胞分泌HBEAG的抑制率。4HEPG2215細(xì)胞經(jīng)不同濃度的EGB761作用4D和6D后，27ΜGML及以上的濃度范圍時(shí)測得的細(xì)胞培養(yǎng)上清中的HBSAG吸光度A值與陽性對照組的吸光度A值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜005219ΜGML及以上的濃度范圍時(shí)測得的細(xì)胞培養(yǎng)上清中的HBEAG吸光度A值與陽性對照組的吸光度A值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜005。第二部分銀杏葉提取物干預(yù)過的感染了人HBV的HL7702細(xì)胞株和樹鼩原代肝細(xì)胞培養(yǎng)上清中的HBSAG呈陽性，HL7702細(xì)胞株培養(yǎng)上清中的HBSAG的吸光度A值在一倍稀釋濃度4D時(shí)與相應(yīng)的陽性對照組A值比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜005細(xì)胞內(nèi)的HBVDNA經(jīng)PCR后灰度值沒有呈現(xiàn)明顯的規(guī)律變化趨勢。結(jié)論1本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用EGB761的劑量在14ΜGML～1750ΜGML對HEPG2215細(xì)胞的生長沒有明顯的毒性作用2經(jīng)EGB761干預(yù)過4D和6D的HEPG2215細(xì)胞，EGB761的劑量濃度范圍在27ΜGML～1750ΜGML時(shí)對細(xì)胞分泌到培養(yǎng)上清中的HBSAG的抑制作用呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)而在219ΜGML～1750ΜGML的劑量范圍內(nèi)時(shí)對細(xì)胞分泌到培養(yǎng)上清中的HBEAG的抑制作用呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)3HEPG2215細(xì)胞經(jīng)不同濃度的EGB761作用4D和6D后，EGB761在較低的濃度范圍內(nèi)就可以抑制HEPG2215細(xì)胞向培養(yǎng)上清中分泌HBSAG而抑制細(xì)胞分泌HBEAG到培養(yǎng)上清中卻需要較高的藥物濃度，并且EGB761對HBSAG的抑制率有強(qiáng)于對HBEAG的抑制率的趨勢。4經(jīng)EGB761干預(yù)過的HEPG2215細(xì)胞，4D時(shí)對乙肝抗原的抑制率有強(qiáng)于6D時(shí)抑制率的趨勢。5EGB761的濃度在27ΜGML時(shí)可能是抑制HBSAG分泌的最低有效劑量濃度，同樣EGB761的濃度在219ΜGML時(shí)可能是抑制HBEAG分泌的最低有效劑量濃度。6HL7702細(xì)胞株可能能夠被人HBV陽性感染血清所感染，但是不能用其作為研究自然狀態(tài)下感染HBV的細(xì)胞模型。7再次證實(shí)樹鼩原代肝細(xì)胞可以感染人HBV病毒。

簡介：博士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)的FOXA2和HNF4A組成性表達(dá)對胚胎干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的影響劉濤指導(dǎo)教師王英杰教授第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院感染科，400038申請學(xué)位級別博士科學(xué)學(xué)位專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)傳染病論文提交日期2009年11月論文答辯日期2009年11月學(xué)位授予單位和B期第三軍醫(yī)大學(xué)2009年L＼月答辯委員會(huì)主席玉莖魚評閱二OO九年十一月秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男ｏL(fēng)和科研作風(fēng)，本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名

簡介：目的無論在動(dòng)物模型還是人類個(gè)體中，Β腎上腺素能受體刺激均參與了病毒性心肌炎的病理生理過程。循環(huán)中大量兒茶酚胺過度刺激Β腎上腺能受體通過CAMP信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路使環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白CREB磷酸化而激活，進(jìn)而發(fā)揮其本身的調(diào)控作用。CREB作為一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄因子可以調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)水平，不僅參與心血管的重構(gòu)也在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用。然而CREB在病毒性心肌炎中的作用仍不得而知，而且卡維地洛如何影響病毒性心肌炎小鼠心肌的CREB也從未被研究。因此，本研究將重點(diǎn)探討CREB在病毒性心肌炎中的作用以及卡維地洛對CREB的影響。方法將80只4周齡雄性BALBC小鼠隨機(jī)分為3組對照組N20心肌炎組N30卡維地洛治療組N30。心肌炎組及卡維地洛組予腹腔注射柯薩奇B3病毒，對照組腹腔注射相同劑量的生理鹽水。24小時(shí)后治療組每日灌胃給予10MGKG卡維地洛，對照組和心肌炎組給予同樣劑量的生理鹽水，第7天、14天時(shí)從各組隨機(jī)抽取存活小鼠處死后取心臟。對小鼠心肌組織進(jìn)行病理切片HE染色觀察心肌炎癥及壞死改變，PCR及ELISA法檢測心肌炎癥因子以及WB檢測CREB和PCREB蛋白的表達(dá)。結(jié)果心肌炎組小鼠心肌CREB及PCREB的表達(dá)顯著下降，而卡維地洛干預(yù)7天和14天后可以恢復(fù)CREB和PCREB的量，并降低促炎細(xì)胞因子TNFΑ、IL6的表達(dá)，但對MCP1則無顯著影響。進(jìn)一步相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，CREB及PCREB的表達(dá)水平與炎癥因子TNFΑ、IL6的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，即CREB及PCREB表達(dá)量越高，炎癥因子TNFΑ、IL6的表達(dá)越低。結(jié)論結(jié)果顯示CREB可能參與了CVB3介導(dǎo)的病毒性心肌炎的病理生理過程，卡維地洛可能通過增加心肌炎小鼠心肌中CREB和PCREB調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)而發(fā)揮心臟保護(hù)性作用。

簡介：河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)的CTLA4IG基因?qū)餐瑢?dǎo)入的LACZ基因在致敏大鼠脊髓表達(dá)的影響姓名張斌申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師韓久卉20080301中文摘要腺病毒介導(dǎo)的CTLA4IG基因?qū)餐瑢?dǎo)入的LACZ基因在致敏大鼠脊髓表達(dá)的影響摘要目的周圍神經(jīng)損傷是臨床上常見疾病，周圍神經(jīng)損傷的顯微外科修復(fù)技術(shù)已經(jīng)十分精湛，卻長期以來難以獲得滿意結(jié)果。隨著分子生物學(xué)和基因轉(zhuǎn)移技術(shù)不斷進(jìn)步，神經(jīng)損傷的基因治療研究正在興起。應(yīng)用復(fù)制缺陷型重組腺病毒ADENOVIRUS，ADV為載體將各種神經(jīng)營養(yǎng)因子基因轉(zhuǎn)入脊髓以保護(hù)受損的神經(jīng)元和促進(jìn)周圍神經(jīng)再生的研究，已成為神經(jīng)修復(fù)研究領(lǐng)域的前沿課題。基因治療的效果依賴于將目的基因特異、高效和安全的轉(zhuǎn)染受損神經(jīng)元及神經(jīng)并高效表達(dá)，但由于宿主對病毒載體的免疫反應(yīng)，使導(dǎo)入的基因不能在體內(nèi)長時(shí)間高水平表達(dá)，從而限制了導(dǎo)入基因的治療作用的發(fā)揮。此技術(shù)最終應(yīng)用于人類，而人類大部分在一生開始的幾年中被野生型的腺病毒感染。因此，在相當(dāng)多的應(yīng)用腺病毒載體的基因治療的臨床應(yīng)用中，為了分析和控制對載體得免疫反應(yīng)用病毒預(yù)先致敏動(dòng)物是非常重要的。本實(shí)驗(yàn)為了提高腺病毒介導(dǎo)的基因表達(dá)，將攜帶LACZ基因的ADVADLACZ與不帶外源基因的ADO或與攜帶有細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4免疫球蛋白CYTOTOXICTLYMPHOCYTEASSOCIATEDANTIGEN4IMMUNOGLOBULIN，CTLA4IG基因的ADVADCTLA4IG兩種腺病毒混懸液通過微量注射導(dǎo)入己被腺病毒致敏的大鼠腰膨大脊髓實(shí)質(zhì)內(nèi)，比較共同轉(zhuǎn)染ADCTLA4IG后13GAL在脊髓表達(dá)水平變化；并通過對大鼠血清抗病毒抗

簡介：復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文針對原發(fā)性肝癌的新型重組腺病毒基因治療姓名梁旻申請學(xué)位級別博士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師葉勝龍20040501件調(diào)控溶瘤性腺病毒載體，在靶向組織中特異性復(fù)制病毒與表達(dá)插入的外源基因，為腫瘤基因治療探索一種新的手段。關(guān)鍵詞溶瘤性腺病毒甲胎蛋白啟動(dòng)子HS4隔離子TRAIL原發(fā)性肝癌

簡介：點(diǎn)擊查看更多血漿中病毒滅活的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：2型糖尿病患病率正逐年升高，嚴(yán)重威脅人類身心健康，而在眾多患者中90％左右伴有不同程度的超重或肥胖，雖然已知肥胖和2型糖尿病的共同病理特征是胰島素抵抗INSULINRESISTANCE，IR，但肥胖如何導(dǎo)致IR，從而引起2型糖尿病的發(fā)生還不十分清楚。近年研究表明，脂肪組織不僅是儲(chǔ)存和釋放能量的場所，也是功能活躍的內(nèi)分泌器官。其分泌的多種脂肪因子參與了肥胖相關(guān)的IR形成，抵抗素RESISTIN便是其中之一。RESISTIN是2001年發(fā)現(xiàn)的存在于血漿中富含半胱氨酸的分泌性蛋白質(zhì)，在小鼠，RESISTIN基因主要在白色脂肪組織中表達(dá)。噻唑烷二酮類降糖藥物可降低小鼠血RESISTIN水平，改善IR，給予野生型小鼠重組RESISTIN蛋白，可導(dǎo)致空腹血糖升高以及胰島素敏感性降低，給予中和性抗體后，飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠血糖水平降低，胰島素抵抗得到明顯改善。在RESISTIN高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因鼠中，雖然體重正常，但已出現(xiàn)空腹血糖明顯升高，糖耐量受損。另有學(xué)者通過將載有RESISTIN基因的腺病毒感染SD大鼠，或是將高表達(dá)RESISTIN的3T3L1細(xì)胞皮下種植于小鼠建立慢性高RESISTIN血癥的動(dòng)物模型，也同樣發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的糖耐量降低和胰島素敏感性下降。而在RESISTIN基因敲除及基因沉默的動(dòng)物模型中，均觀察到高脂飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗得以改善。體外實(shí)驗(yàn)中也證實(shí)RESISTIN可使肌細(xì)胞、脂肪細(xì)胞胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取減少。這些結(jié)果均提示FESISTIN與IR的形成、發(fā)展相關(guān)。在對RESISTIN作用機(jī)制探討過程中，研究者發(fā)現(xiàn)高RESISTIN血癥可造成機(jī)體胰島素的主要靶器官，包括肝臟、肌肉、脂肪的胰島素敏感性下降，表現(xiàn)為餐后高血糖、高胰島素血癥和游離脂肪酸水平增高。而肝臟胰島素抵抗、肝糖代謝的異常可能是RESISTIN作用最為重要的靶點(diǎn)之一。SATOH等認(rèn)為RESISTIN可降低AMP激活蛋白激酶AMPACTIVATEDPROTEINKINASE，AMPK的磷酸化水平，增加肝臟中葡萄糖6磷酸酶G6PASE和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK表達(dá)，從而引起糖異生增多，肝糖輸出HEPATICGLUCOSEOUTPUT，HGO增多，在體外培養(yǎng)的肝細(xì)胞的研究中亦得出相近結(jié)果。這些研究結(jié)果曾一度使人們認(rèn)為可以解開“肥胖與糖尿病關(guān)系”之謎，然而，隨著對RESISTIN研究工作的深入，人們發(fā)現(xiàn)RESISTIN與IR的關(guān)系遠(yuǎn)比預(yù)期的復(fù)雜，從基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)至臨床研究，正、反關(guān)系的結(jié)果均有報(bào)道。WAY等學(xué)者發(fā)現(xiàn)在一些嚙齒類實(shí)驗(yàn)性肥胖鼠RESISTIN表達(dá)嚴(yán)重缺陷。對這些動(dòng)物給予PPARY激動(dòng)劑后，白色脂肪組織中RCSISTIN表達(dá)上升。MACBUCHI等研究發(fā)現(xiàn)正常飲食的小鼠皮下組織RCSISTIN表達(dá)水平最高，高脂喂養(yǎng)的次之，遺傳性肥胖的最低。血清抵抗素水平也顯示出與脂肪組織相似的模式，進(jìn)而得出了不支持RESISTIN導(dǎo)致IR的結(jié)論。人類RESISTIN的作用與嚙齒類動(dòng)物存在較大差異。人類RESISTIN蛋白質(zhì)氨基酸序列與鼠的僅有53％的同源性，且在脂肪細(xì)胞中的表達(dá)極低，在外周血單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中表達(dá)最為豐富，其表達(dá)水平與肥胖、糖尿病、脂代謝紊亂的相關(guān)性研究也未得出一致結(jié)論。NAGACV等研究發(fā)現(xiàn)不同程度的肥胖患者包括胰島素敏感性正常者、有胰島素抵抗或2型糖尿病患者3組之間血清RESISTIN水平?jīng)]有顯著差異。KOCBNICK等則發(fā)現(xiàn)超重者在進(jìn)行減重過程中血漿RESISTIN水平升高，未能觀察到RCSISTIN與HOMAIR改變的相關(guān)性。認(rèn)為RESISTIN不能作為影響糖代謝的一個(gè)獨(dú)立因素。但也有報(bào)道支持RESISTIN導(dǎo)致IR，如DCGAWA等報(bào)道在肥胖者，血漿RCSISTIN水平明顯升高，且與體重指數(shù)BMI明顯正相關(guān)。AZUMA等也報(bào)道隨肥胖程度的增加，其血漿中RESISTIN水平呈上升趨勢，血清RESISTIN水平的變化均與胰島素對口服葡萄糖反應(yīng)的總量MIRI的變化正相關(guān)等等。國內(nèi)也有部分研究表明肥胖者血漿RESISTIN水平升高。提示RESISTIN與炎癥、肥胖有關(guān)，并可能間接參與IR的形成。目前對于RESISTIN在IR發(fā)生中的作用尚有許多疑問與爭議，關(guān)于RESISTIN高表達(dá)的動(dòng)物模型的研究在國外還只是少量文獻(xiàn)報(bào)道，國內(nèi)尚無報(bào)道，因此，本課題擬通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證及探討RESISTIN對肝臟IR的影響及其作用機(jī)制。研究內(nèi)容主要包括1、以載有RESISTIN基因的重組腺病毒感染小鼠，建立高RESISTIN血癥動(dòng)物模型；2、觀察RESISTIN對小鼠糖代謝的影響；3、通過腹腔糖耐量實(shí)驗(yàn)IPGTT和腹腔胰島素耐量實(shí)驗(yàn)IPITT檢測胰島素敏感性。4、觀察RESISTIN對肝臟AMPK磷酸化水平及糖異生關(guān)鍵酶G6PASE和PEPCKRNRNA表達(dá)水平的調(diào)節(jié)作用。通過上述研究內(nèi)容，希望達(dá)到本課題的研究目的

簡介：目的采用血清藥理實(shí)驗(yàn)方法，研究荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清體外對甲型流感病毒鼠肺適應(yīng)株APR834（H1N1）增殖的影響，并探討其抗病毒效應(yīng)的TLRIFN信號機(jī)制，為解表藥“辛散解表”性效與應(yīng)用提供科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法（1）含藥血清體外抗甲型流感病毒作用研究①細(xì)胞病變法（CPE）檢測荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對狗腎傳代細(xì)胞（MDCK）的最大無毒濃度TC0。②血凝實(shí)驗(yàn)測定甲型流感病毒對MDCK細(xì)胞的感染性。③制備不同取血時(shí)間點(diǎn)的荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清，通過CPE法和血凝實(shí)驗(yàn)對不同取血時(shí)間點(diǎn)的含藥血清進(jìn)行藥效學(xué)比較，篩選獲得制備含藥血清的最佳取血時(shí)間點(diǎn)。④血凝實(shí)驗(yàn)和四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）比色法觀察荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對甲型流感病毒細(xì)胞內(nèi)增殖的抑制作用及對甲型流感病毒的直接殺滅作用，同時(shí)探討含藥血清對病毒增殖影響的最佳給藥時(shí)間。（2）含藥血清抗甲型流感病毒作用機(jī)制研究①ELISA法測定流感病毒感染細(xì)胞IFNΒ的分泌水平。②采用RTPCR法測定荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對流感病毒感染細(xì)胞TLR7、IFNΒ、TRAF6、MYD88MRNA表達(dá)量的影響。③WESTERNBLOT法觀察含藥血清對流感病毒感染細(xì)胞TRAF6蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果①荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對MDCK細(xì)胞的TC0均為5％，即在相應(yīng)培養(yǎng)基中含藥血清含量為5。②甲型流感病毒鼠肺適應(yīng)株APR834H1N1對MDCK細(xì)胞的病毒半數(shù)組織感染量（TCID50）為103501ML。③對不同取血時(shí)間點(diǎn)制備的含藥血清進(jìn)行藥效學(xué)比較，確定制備荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清的時(shí)間點(diǎn)為連續(xù)灌胃給藥5D（每日1次），末次給藥后1H進(jìn)行。④荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清5、35、25濃度對10TCID50甲型流感病毒的增殖均有顯著抑制作用，且5、35濃度的荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對甲型流感病毒具有直接殺滅作用。⑤與病毒對照組比較，荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清在5濃度時(shí)顯著升高流感病毒感染MDCK細(xì)胞上清液中IFNΒ含量（P結(jié)論荊芥、桂枝揮發(fā)油含藥血清對甲型流感病毒在MDCK細(xì)胞中的增殖具有明顯抑制作用，并具有一定直接殺滅作用，結(jié)果與兩種揮發(fā)油的體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，進(jìn)一步明確證實(shí)了兩者的抗流感病毒效應(yīng)。其抗甲型流感病毒機(jī)制可能與激活TLR7通路，提高IFNΒ的分泌量，促進(jìn)流感病毒感染細(xì)胞IFNΒ、TLR7MRNA表達(dá)、抑制TRAF6、MYD88MRNA表達(dá)相關(guān)。

簡介：復(fù)旦大學(xué)博士論文指導(dǎo)小組成員名單姜春暉教授樂琦驊副研究員復(fù)旦大學(xué)博士論文致謝1183

簡介：Y897{20碩士學(xué)位論文中文題目攜帶P53基因雙重調(diào)控增殖型腺病毒CNHK600P53治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究英文題目EXPERIMENTAISTUDIES仰TREATMENTOFLIVERCANCERWITHDOUBIEREGULATEDREPLICATIVEADENOVIRUSCNHK600CARRYINGHUMANP53GENE研究生姓名學(xué)科和專業(yè)研究方向指導(dǎo)教師論文提交日期學(xué)位授予日期段紀(jì)成外科學(xué)肝膽外科專業(yè)肝癌基因治療楊家和副教授吳孟超院士錢其軍研究員二00六年五月二OO六年七月第二軍醫(yī)大學(xué)東方肝膽外科醫(yī)院上海市第二軍醫(yī)大學(xué)中英文摘要碩士論文攜帶P53基因雙重調(diào)控增殖型腺病毒CNHK600P53治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究目的構(gòu)建攜帶P53基因增殖型腺病毒CNHK600P53，研究其是否增加肝癌細(xì)胞株對化療藥物的敏感性。方法采用四甲基偶氦唑鹽法METLLYLNLIAZ01YLTE仃AZ01I啪船SAY，M丌，觀察化療藥物5一氟尿嘧啶、絲裂霉素和表阿霉素與攜帶P53基因增殖型腺病毒CNHK600P53聯(lián)合上述化療藥物對肝癌細(xì)胞株的殺傷效應(yīng)。結(jié)果成功構(gòu)建了攜帶P53基因的增殖型腺病毒CNHK600．P53，CNHK600．P53腺病毒和化療藥有較好的協(xié)同作用，化療藥物聯(lián)合CNHK600P53腺病毒后腫瘤細(xì)胞抑制率明顯增高。結(jié)論化療藥物聯(lián)合CNHK600一P53可增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性，可能為肝癌等實(shí)體瘤治療提供了一種新的方法。關(guān)鍵詞基因治療；病毒治療；肝癌；選擇增殖型腺病毒；口53基因EXPERIMENTALSTUDIESONTREATMENTOFLIVERCANCERWITHDOUBLEREGULATEDREPLICA“VEADENOVIRUSCNHK600CARL了INGHUMANP53GENE0BJECTIVETOCONS仃UCTAREPLIC旋ON．SELECTIVEADENOVIMSCNHK600P53WLLICHCARRYINGME觚廿MMORGENEP53ANDINVESTIGATEWHETLLERITCANENHALLCECHEOMODMGSSENSITIVI夠TO也EHEPATOMACELLLINESORNOT．METHODSNLEH印ATOMACEULINESARETREATED、VITHFLUOROURACIL，MITOMYCINANDEPIRUBICINA舭RINFECTINGW汕ADENOVINLSCNHK600P53ORA10NE塒血MESES鋤ECHEMODMGSORADENOVIMSCNHK600．P53，THENINVESTIGATEC”O(jiān)LYSIS謝T11ME廿1YLTLLIAZOLYLTE仃AZOLI啪ASSAYMTLMEMOD．RESULTSWESUCCESS如LLYC伽鼬1LCTALLE伍CIENTR印LICATIONSELECTIVEADENOVIMSCNHK600P53，ANDFINDMATCNHK600．P53AILDCHEMOTHEMPYHAVESYNERGISM．CHEMO恤ERAPYCOMBINATING、，ITLLCNHK600P53HAVEBETTERTHERAPEUTICE髓CT．COⅡCLUSIONCNHK600P53CO在1BINATING誠T11CHEMO也ERAPYCANENHALLCE1IVERTULLLORCELLSCHEMOSENSITIVI壩ANDMAYBEPR0VIDEANEWTHERAPYFORLIVERTⅦMOLLEYWOIMSGENET11唧Y；VIROTHERPY；LIVERCANCER；CONDITIONALLYREPLICATIVEADEⅡOVILLLS；P53

簡介：目的本研究旨在探索靶向增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白CPC表達(dá)對糖尿病腎病伴動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的保護(hù)作用。通過以重組腺病毒為載體，將帶有綠色報(bào)告基因及內(nèi)皮細(xì)胞特異性的重組腺病毒ADFLT1PC，以尾靜脈注射的方式導(dǎo)入糖尿病腎病動(dòng)脈粥樣硬化大鼠體內(nèi)，觀察目的基因PC在血管壁的分布、表達(dá)以及活化為APC的情況。從細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激的角度，深入研究APC對糖尿病腎病動(dòng)脈粥樣硬化的作用及機(jī)制，為糖尿病腎病伴動(dòng)脈粥樣硬化的干預(yù)措施提供一定的理論依據(jù)。方法1構(gòu)建糖尿病腎病DN動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型SD大鼠，雄性，體重180200G，隨機(jī)分成正常對照組和模型組。模型組高脂飲食1月后，腹腔注射STZ40MGKG，正常組正常飲食1月后，注射同等量的PBS。以7天血糖≥167MMOLL為糖尿病成模標(biāo)準(zhǔn)。成模大鼠繼續(xù)喂養(yǎng)高糖高脂飲食至16周。動(dòng)態(tài)監(jiān)測血糖、血脂、尿蛋白、血肌酐、血尿素氮、血漿APC的變化以及腎臟與血管的病理改變。2研究重組腺病毒ADFLT1PC對DN動(dòng)脈粥樣硬化的作用將成模大鼠隨機(jī)分成三組ADFLT1PC組23只、ADGFP組23只及NS組（22只），并以正常SD大鼠作為對照23只。分別在轉(zhuǎn)染后1天、3天、7天及14天，每組隨機(jī)取56只大鼠處死，快速冰凍切片觀察血管壁熒光分布，分別用RTPCR、免疫組織化學(xué)IHC方法檢測PCMRNA及PC蛋白在血管壁上的表達(dá)情況，ELISA檢測血漿中蛋白C的活化水平IHC檢測血管壁TNFA、ICAM1蛋白的表達(dá)量TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡WST法及TBA法分別檢測血漿SOD、MDA含量。結(jié)果1實(shí)驗(yàn)大鼠基本情況實(shí)驗(yàn)過程共有11只大鼠死亡，未成模有8只，68只大鼠造模成功。成模大鼠血糖增高明顯，出現(xiàn)明顯的“多飲、多食、多尿及體重減輕”等癥狀。且隨著造模時(shí)間的延長，血脂、尿蛋白、血肌酐及血尿素氮等指標(biāo)較正常組出現(xiàn)明顯異常。造模第8周，腎臟從輕度系膜增生到后期的基底膜增厚，毛細(xì)血管腔狹窄造模第12周，血管壁開始出現(xiàn)AS病變，至16周末，血管內(nèi)膜明顯增厚，平滑肌細(xì)胞增生明顯，排列紊亂，甚至出現(xiàn)管腔狹窄的表現(xiàn)。2通過尾靜脈注射重組腺病毒ADFLT1PC后，3天可觀察到綠色熒光在血管內(nèi)皮層表達(dá)，且熒光至少能持續(xù)表達(dá)至14天轉(zhuǎn)染后1天到14天，RTPCR可檢測ADFLT1PC組血管壁均有不同程度的PCMRNA的表達(dá)，余三組未見其表達(dá)。IHC顯示轉(zhuǎn)染ADFLT1PC重組腺病毒3天后，可見血管內(nèi)皮層PC表達(dá)量增加，均明顯高于ADGFP組與NS組水平P＜005轉(zhuǎn)染1天、3天、7天及14天4個(gè)觀察點(diǎn)，ADFLT1PC組血漿APC水平均比ADGFP組與NS組升高（P＜005）。3血管壁TNFA、ICAM1的檢測轉(zhuǎn)染7天后，IHC顯示ADFLT1PC組血管壁的TNFA、ICAM1顯著低于ADGFP組與NS組P＜005GFP組與NS組之間各時(shí)間點(diǎn)均無差異（P＞005）。4血管壁細(xì)胞凋亡的檢測在各時(shí)間點(diǎn)，正常組幾乎未見細(xì)胞凋亡的發(fā)生，而ADFLT1PC組、GFP組及NS組均可在血管壁上觀察到細(xì)胞凋亡的發(fā)生，且各時(shí)間點(diǎn)凋亡發(fā)生率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞005）。5轉(zhuǎn)染14天后，ADFLT1PC組血漿SOD的量較ADGFP組及NS組增高P＜005，而血漿MDA的量較其2組含量減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。結(jié)論1STZ腹腔注射聯(lián)合高糖高脂飲食喂養(yǎng)大鼠，可成功構(gòu)建糖尿病腎病動(dòng)脈粥樣硬化模型。2ADFLT1PC經(jīng)尾靜脈注射糖尿病腎病動(dòng)脈粥樣硬化大鼠，PC可在血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)并有效激活，使體內(nèi)血漿APC表達(dá)量增加。3血漿APC表達(dá)量增加可能通過下調(diào)炎癥介質(zhì)、粘附因子表達(dá)以及抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)發(fā)揮保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的作用，為DN動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生機(jī)制提供新思路。

簡介：浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文造血干細(xì)胞移植后人皰疹病毒6型感染的初步研究姓名廖維維申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師葉琇錦20070501浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)現(xiàn)刪V一6感染或激活一般出現(xiàn)在移植后早期，發(fā)生率在45％～75％之間，并發(fā)現(xiàn)哪一6的感染與移植后造血重建延遲、急性移植物抗宿主反應(yīng)密切相關(guān)，可導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染。但國內(nèi)有關(guān)HSCT患者HHV一6感染的報(bào)道甚少。本實(shí)驗(yàn)對在本移植中心接受HSCT患者HIV一6的感染率進(jìn)行了研究，同時(shí)建立一種方便、快速、適合臨床檢驗(yàn)刪V一6的方法。本研究采用巢式PCR定性檢測19例HSCT后患者外周血單個(gè)核細(xì)胞PERIPHERALBLOODMONONUCLEARCELLS，PBMCS和40例HSCT后患者外周血漿刪V咱的感染，并結(jié)合限制性核酸內(nèi)切酶酶切分型對HHV一6A型和B型進(jìn)行了分析。研究同時(shí)設(shè)正常對照組50例正常志愿者標(biāo)本和疾病對照組15例血液系統(tǒng)惡性腫瘤患者化療前標(biāo)本。結(jié)果顯示本組正常人群HHV一6的檢出率為66％，均為嘲Ⅳ一6B型感染，主要為PB眥S的潛伏感染；血漿中病毒檢出率較低，只有6％。疾病對照組結(jié)果顯示15例患者PBMCS的刪V一6檢出率為60％，血漿中沒有檢測到HHV一6DNA。HSCT前19例患者PB眥S叫V一6的檢出率為58％，HSCT后患者PBMCSHHV一6檢出率為68％。HSCT前40例患者血漿HHV_6檢出率為25％，HSCT后患者血漿HIIV一6的檢出率為425％，較移植前明顯提高，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO013。HSCT后血漿HLV一6的感染率同正常對照和疾病對照血漿，HHV一6的檢出率相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO05。在定性檢測的基礎(chǔ)上，研究建立了實(shí)時(shí)定量PCR檢測唧V一6DNA的方法，對正常對照、疾病對照及40例HSCT患者血漿中HHV一6的病毒拷貝數(shù)進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示50例正常對照組HHV一6的檢出率為6％，平均病毒拷貝數(shù)為828_3175COPES／ML。15例疾病對照組沒有檢出瑚V一6DNA。40例患者HSCT前只有一例檢出血漿HHV6DNA，拷貝數(shù)為420COPES／M1。40例患者HSCR后有18例45％檢出HH、，一6DNA，病毒平均拷貝數(shù)為48844___3744COPES／ML，明顯高于正常對照組的病毒拷貝數(shù)，檢出刪V一6的中位時(shí)問為移植后145天0～23天。40例HSCT患者中有14例35％發(fā)生I～Ⅳ度AGVHD，中位時(shí)間為第208～40天。唧一6檢出的中位時(shí)間明顯早于AGVHD發(fā)生的時(shí)間P005。14例I～Ⅳ度AGVHD患者中有LL例78％檢出了HHV一6，3例214％沒有檢出HHV6，I～Ⅳ度AGVHD患者HHV一6檢出率明顯高于無GVHD患者P005。綜上所述2

簡介：點(diǎn)擊查看更多提高土撥鼠肝炎病毒復(fù)制能力的研究.pdf精彩內(nèi)容。