一株海洋放線菌抗生物質的分離和結構初步分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、對廈門周邊海域采集的樣品采用稀釋涂平板法分離、純化、保藏各種海洋微生物，對篩選出的一株具有廣譜抗菌活性的海洋放線菌進行研究，經過形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特征及16S rDNA鑒定為達松維爾擬諾卡菌。
　　 為了提高抗菌物質的產量，采用響應面法對DY2242菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化。
　　 首先利用單因素實驗考查了不同介質、碳源、氮源對菌株DY2242的影響，在此基礎上運用PlackettBurman試驗設計方法篩選出

2、影響產抗菌物質的三個主要因素：NaCl、麥芽糖和NaNO3濃度。用最陡爬坡實驗逼近最大響應區(qū)域，再利用BoxBehnken試驗設計及響應面分析方法確定主要因素的最優(yōu)濃度：氯化鈉濃度為2.08％，麥芽糖濃度為3.08％，NaNO3濃度為0.875％。在培養(yǎng)基的優(yōu)化條件下，抗菌物質的抑菌圈直徑由最初的25.5mm上升到31mm，增加約24％。此后，再對發(fā)酵條件進行優(yōu)化，表明起始最佳pH7.0，最佳接種菌齡72h，最佳接種量5％，最佳裝液量為

3、70ml（250ml三角瓶），最佳培養(yǎng)溫度為28℃，最佳培養(yǎng)時間5天，在此培養(yǎng)條件下進行發(fā)酵，抗菌物質的抑菌圈直徑由最初的25.5mm上升到33.5mm，增加約31.4％。
　　 通過菌株DY2242 抗菌物質穩(wěn)定性的實驗，表明其對UV、pH 均具有較好的穩(wěn)定性，抗菌物質在高于100℃時部分失活。通過Sephadex LH20柱色譜分離后，經抗菌活性檢測發(fā)現一個較強的活性峰。將此峰的洗脫液各組分進行薄層色譜分析，選取斑點清晰且單

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