燒傷膿毒癥大鼠血清誘導的巨噬細胞中Nrf2的表達.pdf

1、目的：將內毒素及細菌感染燒傷大鼠后，制備出不同組別的血清，研究由各組血清誘導巨噬細胞中Nrf2的表達。本文的主要目標是研究當某些細菌或內毒素及燒傷等因素損害巨噬細胞后，Nrf2如何表達。 方法：此項研究中，實驗分為兩組進行：(1)動物模型；(2)細胞模型。在動物模型中，將Wistar大鼠作為實驗鼠分：1.標準組；2.LPS組；3.單純燒傷組；4.銅綠假單胞菌組；5.金黃色葡萄球菌組。將除對照組外的其余四組均放置于90度開水中18

2、秒制備成40％面積的深二度燒傷創(chuàng)面。在以上四組中，分別將金黃色葡萄球菌0.8ml(濃度為8×109cuf/ml)、綠膿桿菌0.5ml(含菌量為1×108cuf/ml)，注入大鼠腹腔，將6mgkg-1LPS靜脈注射到大鼠體內。8小時后通過心臟穿刺收集血液并經過離心制成血清。細胞模型實驗中，巨噬細胞264.7作為靶細胞，取上述血清干擾后，通過RT-PCR和WESTERN BLOT技術，研究Nrf2在靶細胞和上清中的表達。 結果：所有

3、的5組血清干擾細胞中，在RT-PCR和Western Blot兩種實驗中的Nrf2均有顯著表達。在RT-PCR結果中Nrf2 mRNA表達水平較高體現(xiàn)在單純燒傷組(81.190±3.833)，其次分別為LPS組(71.883±2.243)、綠膿桿菌組(65.708±2.975)、金葡球菌組(60.525±3.512)，而正常對照組Nrf2 mRNA表達相對較低(40.985±3.0921)；在Western-Blot實驗中，Nrf2蛋白