LRP與Vault結構的初步研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩30頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文LRP與Vault結構的初步研究姓名：鄭春雷申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：李振2001.4.1然于膠系統(tǒng)。實驗方法一、蛋白的表達與制備:融合蛋白ProteinC一LRP和GST一vPARP一C由本實驗室通過將LRPcDNA和vPARPC末端cDNA分別載人pXB和pGEX4T一1載體內，轉化大腸桿菌DH5a篩選而來。將表達融合蛋白ProteinC一LRP和GST一vPARP一C的DH5。分別置于150m

2、lLB中并加人0.2mMIPTG22℃過夜培養(yǎng)。次日4℃收集菌體沉淀，加人MES進行超聲粉碎后離心，收集上清，一80℃保存。二、Pul一do，實驗:GSH一Sepheros。一4B與GST一，PARP一C混合，4℃反應2小時，離心所得沉淀即為GST一vPARP一Sepherose一4B取ProteinC一LRP分別加人到GST一vPARP一Sepherose一4B和GSHSepherose4B中，4℃反應2小時，離心去上清，在該沉淀及P

3、roteinC一LRP粗蛋白中加人5xSDS上樣緩沖液，100℃加熱5分鐘，行7.5%變性聚丙烯酞胺凝膠(SDS一PAGE)電泳及WesternBlot(同方法五，一抗為抗LRP抗體)。三、GST一vPARP一C同ProteinC一LRP的結合實驗:在ProteinC一LRPGST一vPARP一C及二者的混合液中各加人1%Aprotinin及少許APMSF粉末。4℃充分反應2小時后，各取0.5ml進行二次不連續(xù)蔗糖密度梯度離心。四、不連

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論