星形膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的ENT1及ADK在顳葉癲癇大鼠海馬中的動(dòng)態(tài)表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、目的:觀(guān)察星形膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的平衡核苷轉(zhuǎn)運(yùn)體1(equilibrativenucleoside transporters1，ENT1)及腺苷激酶(adenosine kinase，ADK)在顳葉癲癇大鼠模型不同時(shí)期海馬中的動(dòng)態(tài)表達(dá)及其相關(guān)性，探討其在癲癇發(fā)病過(guò)程中作用。
　　 方法:按照隨機(jī)的原理將6-8周齡健康雄性SD大鼠84只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=60)、對(duì)照組(NS組）(n=12)及正常組(n=12)。實(shí)驗(yàn)組予以腹腔注射氯化

2、鋰-匹羅卡品建立顳葉癲癇模型;NS組予以腹腔注射等劑量無(wú)菌生理鹽水;正常組未予特殊處理。實(shí)驗(yàn)組又根據(jù)癲癇急性期、潛伏期、慢性期按觀(guān)察時(shí)間點(diǎn)分為5個(gè)亞組，即癲癇持續(xù)狀態(tài)(statusepilepticus，SE)后2小時(shí)(2h)、1天(1d)、7天(7d)、15天(15d)及30天(30d)，每亞組各12只。以上各小組再隨機(jī)分為2個(gè)小組，每小組6只大鼠，分別進(jìn)行:1.Western blot方法檢測(cè)ENT1及ADK在海馬中的表達(dá);2.免疫

3、組織化學(xué)檢測(cè)各組大鼠海馬不同區(qū)域（CA1區(qū)、CA3區(qū)、DG區(qū)）ENT1及ADK的表達(dá)及免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的海馬ENT1及ADK的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:
　　 1.實(shí)驗(yàn)組大鼠SE誘發(fā)成功率86.7％，死亡率為18.3％，模型成功率為68.3％。
　　 2.實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬ENT1蛋白表達(dá):ENT1蛋白的表達(dá)在SE后2小時(shí)顯著下調(diào)(p＜0.01)，1天后有所恢復(fù)，但仍低于正常水平(p＜0.01)，后繼

4、續(xù)上調(diào)，至SE后7天恢復(fù)至正常水平(p＞0.05)，15天明顯上調(diào)(p＜0.01)，30天達(dá)到高峰(p＜0.01)。
　　 3.實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬ADK蛋白表達(dá):ADK蛋白的表達(dá)在SE后2小時(shí)表達(dá)下調(diào)(p＜0.01)，1天后恢復(fù)至正常水平(p＞0.05)后進(jìn)行性上升，30天達(dá)到高峰(p＜0.01)。
　　 4.各組大鼠海馬不同區(qū)域均可檢測(cè)到ENT1及ADK的表達(dá)，且其表達(dá)量隨SE后不同時(shí)期發(fā)生改變:在SE后2h下調(diào)(p＜0.

5、01)，后隨著時(shí)間推移，ENT1及ADK表達(dá)上調(diào)。
　　 5.各組大鼠海馬CA1區(qū)均可檢測(cè)到星形膠質(zhì)細(xì)胞與ENT1及ADK共表達(dá)，且在SE后2h下調(diào)(p＜0.01)，后隨著時(shí)間推移，星形膠質(zhì)細(xì)胞增生，ENT1及ADK表達(dá)上調(diào)。
　　 結(jié)論:
　　 1.在顳葉癲癇大鼠海馬組織中:急性期，ENT1及ADK表達(dá)下調(diào);慢性期，ENT1及ADK表達(dá)上調(diào)，兩者呈正相關(guān)。
　　 2.星形膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)ENT1及ADK的表