miR-145對前列腺癌PC-3細胞增殖和凋亡及其調(diào)控基因表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究miR-145對前列腺癌PC-3細胞系增殖和凋亡及其調(diào)控基因表達的影響。
　　方法:常規(guī)培養(yǎng)前列腺癌PC-3細胞株,實驗分為3組:不做任何處理的PC-3細胞為空白對照組,僅轉(zhuǎn)染不表達miR-145的空白病毒載體為陰性對照組,轉(zhuǎn)染有表達miR-145的慢病毒載體為mir-145轉(zhuǎn)染組。感染后72h,熒光顯微鏡下觀察細胞,判斷細胞的感染效率,熒光定量PCR檢測miRNA-145的表達情況,用MTT法檢測前列腺癌PC-3細胞的

2、增殖能力,應用流式細胞儀檢測細胞凋亡,RT-PCR檢測預測的miR-145調(diào)控基因(C-MYC, IRS1,IGF1R,CDKN1A,CCNA2)的表達變化。
　　結(jié)果:72小時后熒光顯微鏡下觀察細胞轉(zhuǎn)染效率達80％。熒光定量PCR結(jié)果顯示:miR-145轉(zhuǎn)染組的miR-145表達水平較陰性對照組、空白對照組明顯上調(diào)(p<0.05)。MTT結(jié)果顯示,miR-145轉(zhuǎn)染組的細胞增殖活性明顯低于空載體組和空白對照組。流式細胞儀檢測顯示

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