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文檔簡介
1、目的:本研究通過觀察中藥薏苡仁提取物康萊特(KLT)對中波紫外線(ultravioletB,UVB)照射的體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞的基質(zhì)金屬蛋白酶1、3(MatrixMetallo Proteinases,MMP1、MMP3)mRNA及蛋白表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討康萊特(KLT)是否抗光老化的藥理作用。
方法:采用酶消化法和組織塊法培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞;MTT法檢測康萊特對人皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響;用不同輻照劑量UVB照射細(xì)胞
2、后用實時熒光定量技術(shù)(RT-PCR)檢測MMP1,MMP3 mRNA表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測MMP1,MMP3蛋白水平;30 mJ/cm2 UVB照射細(xì)胞后分組分別加入1、2.5、5μL/mL康萊特基質(zhì)及康萊特,用同上方法檢測MMP1,MMP3 mRNA及蛋白水平。
結(jié)果:人皮膚成纖維細(xì)胞倍增時間較短,0-1d為潛伏期,1-3 d為細(xì)胞增殖期,3-5 d為對數(shù)生長期而5-7 d為平臺期。第6代之后細(xì)胞逐漸失去
3、活力,生長緩慢,形態(tài)不規(guī)則。經(jīng)MTT法檢測加入不同濃度的康萊特細(xì)胞組結(jié)果顯示與未加康萊特組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射細(xì)胞組的MMP1,MMP3 mRNA及蛋白表達(dá)水平與無UVB照射組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射細(xì)胞組加入不同濃度基質(zhì)及康萊特MMP1,MMP3 mRNA及蛋白表達(dá)水平與對照組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
結(jié)論:人成纖維細(xì)胞可
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