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文檔簡介
1、目的：通過實驗進一步探討體外條件下分離、純化兔骨髓間充質干細胞的有效方法，對所獲細胞進行培養(yǎng)，觀察細胞的生物學特性。以及觀察Ⅰ型膠原蛋白對兔骨髓間充質干細胞成骨分化的作用。 方法：實驗于青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院骨科研究所進行。首先采用密度梯度離心法分離兔骨髓間充質干細胞，用貼壁培養(yǎng)法對所獲細胞進行培養(yǎng)、傳代、純化和擴增，觀察細胞的生物學特性，倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態(tài)學特征，透射電鏡觀察細胞的超微結構，流式細胞術鑒定細胞表面標志
2、物；將分離純化的兔骨髓間充質干細胞培養(yǎng)于Ⅰ型膠原蛋白上面，對細胞的堿性磷酸酶表達、細胞礦化形成鈣化結節(jié)的能力進行測定。 結果：分離的細胞1天后完全貼壁，貼壁的細胞平均10d后形成細胞克隆，所獲細胞形態(tài)均一，呈成纖維細胞樣生長，細胞穩(wěn)定表達骨髓間充質干細胞表面標志物。在Ⅰ型膠原蛋白上面培養(yǎng)后，細胞堿性磷酸酶顯著表達，Von. Kossa染色可見礦化結節(jié)形成。 結論：密度梯度離心法分離，貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)所得細胞，可以有效分離、
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