WNT4基因突變與中國(guó)女性苗勒氏管發(fā)育異常的發(fā)病無(wú)明顯相關(guān)性.pdf

1、研究背景:
　　 苗勒氏管發(fā)育異常(MDAs)系指在胚胎時(shí)期女性生殖道在發(fā)育過(guò)程中，由于副中腎管(即苗勒氏管Müllerianduct)發(fā)育停滯、發(fā)育不良或融合不全而導(dǎo)致的一系列女性生殖器官畸形，包括先天性無(wú)陰道無(wú)子宮(MRKHs)、始基子宮、幼稚子宮、雙子宮、雙角子宮、單角子宮、縱隔子宮、宮頸發(fā)育異常、陰道發(fā)育異常（陰道縱隔、陰道橫隔、陰道斜隔）等。前兩類(lèi)患者懷孕機(jī)會(huì)極低，而后幾種類(lèi)型的MDAs可導(dǎo)致患者不孕、流產(chǎn)、早產(chǎn)、分娩

2、異常、圍生期高死亡率等，給患者帶了巨大的身心痛苦。薈萃分析表明，不孕婦女中MDAs的發(fā)生率高達(dá)5％，而復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者子宮輸卵管造影檢查發(fā)現(xiàn)這一概率更高達(dá)25％。臨床中MDAs患者常合并其他器官的異常，如腎臟畸形、聽(tīng)力異常、脊椎發(fā)育異常及心臟發(fā)育異常等，以腎臟畸形最常見(jiàn)。MDAs發(fā)病機(jī)制尚不明確，除外少數(shù)已知宮內(nèi)局部環(huán)境因素異常（如懷孕早期應(yīng)用乙烯雌酚、接觸放射性物質(zhì)、致癌物質(zhì)等），遺傳因素被認(rèn)為是主要致病原因。目前研究發(fā)現(xiàn)與女性生殖道發(fā)

3、育相關(guān)的基因包括WNT基因家族、HOXA基因家族、LHX1、PBX1、PAX2、SHOX、EMX2等。其中WNT4基因?yàn)閃NT（無(wú)翼型MMTV整合位點(diǎn)家族）中的一員，位于1q35，含有5個(gè)外顯子。WNT4基因產(chǎn)物為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，該信號(hào)蛋白通過(guò)經(jīng)典的WNT/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在胚胎早期性別決定、腎臟發(fā)生、女性生殖道發(fā)育、卵泡數(shù)目維持過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。1999年有學(xué)者研究基因敲除小鼠模型發(fā)現(xiàn)，WNT4單個(gè)等位基因敲除雌性小

4、鼠表現(xiàn)為內(nèi)生殖器官雄性化、高雄激素血癥、卵巢卵泡儲(chǔ)備不足，并伴有腎缺失、腎上腺功能異常等。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)4例MRKHs伴異常高雄激素水平患者中發(fā)現(xiàn)不同的WNT4突變。為探討WNT4基因突變與苗勒氏管發(fā)育異常發(fā)病的相關(guān)性，本課題首次在大規(guī)模苗勒氏管發(fā)育異常人群中進(jìn)行WNT4基因突變的篩查。
　　 研究目的:
　　 探討中國(guó)漢族婦女不明原因苗勒氏管發(fā)育異常與WNT4基因編碼區(qū)變異的相關(guān)性。
　　 研究方法:
　　

5、 將189名苗勒氏管發(fā)育異?；颊咦鲎鳛閷?shí)驗(yàn)組，198名因輸卵管因素導(dǎo)致不孕要求ART治療的患者作為對(duì)照組。其中實(shí)驗(yàn)組包括10例MRKHs、5例先天性無(wú)子宮、37例雙子宮、40例子宮縱隔、43例雙角子宮以及54例單角子宮。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組均具有正常的女性第二性征以及正常的46，XX核型，并均行經(jīng)陰道B型超聲以及子宮輸卵管造影術(shù)(HSG)檢查以明確診斷。實(shí)驗(yàn)組中有1例患者出現(xiàn)腎臟異位，3例出現(xiàn)單腎畸形。由外周血淋巴細(xì)胞中提取全基因組DNA;對(duì)

6、WNT4基因的5個(gè)外顯子通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)進(jìn)行擴(kuò)增并直接測(cè)序。采用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并與Hapmap中的數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比。
　　 研究結(jié)果:
　　 發(fā)現(xiàn)WNT4第2外顯子已知SNP(rs16826648)，其基因型頻率與對(duì)照組無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。第5外顯子發(fā)現(xiàn)1新發(fā)同義突變c.1091G＞A，對(duì)照組中未發(fā)現(xiàn)。
　　 結(jié)論:
　　 WNT4基因編碼區(qū)突變不是中國(guó)苗勒氏管發(fā)育異?；颊叩某Ｒ?jiàn)病因