CoCl-,2-所致化學缺氧促進脂肪組織缺血缺氧耐受相關基因表達的研究.pdf

1、【目的】 探討COCl<,2>所致化學缺氧能否促進脂肪組織缺血缺氧耐受相關基因表達。按量效關系和時效關系分組，篩選最佳的缺氧的模型。為脂肪游離移植進一步研究奠定基礎，為缺氧預處理在整形美容外科領域的應用提供理論和實驗依據(jù)。 【方法】 選用3月齡SD大鼠72只，隨機分成9組，每組8只。按量效關系分組，分別分為0 mg/kg組、5 mg/kg組、10 mg/kg組、20 mg/kg組、40 mg/kg組；按時效關系分

2、組，分別為 1h組、3h組、6h組、12h組、24h組。取相應濃度COCl<,2>行大鼠腹股溝皮下注射后按預定時間切取該區(qū)皮下脂肪，分別行免疫組織化學法和 RT-PCR 法觀察 HIF-1a 蛋白和 HIF-1a mRNA 的表達情況。 【結果】 1.HIF-1a蛋白濃度組：0mg/kg 組：脂肪組織中未見HIF-1a 陽性表達細胞。5 mg/kg組：偶見HIF-1a陽性表達細胞。10mg/kg、20mg/kg、40mg

3、/kg組HIF-1a陽性表達細胞逐漸增多，其中10 mg/kg組與0 mg/kg組比較陽性表達細胞細胞無顯著性差異(P>0.05)，20 mg/kg、40 mg/kg組與0 mg/kg組比較陽性表達細胞細胞有顯著性差異(P<0.05)，20 mg/kg與40 mg/kg組組間比較陽性表達細胞細胞無顯著性差異(P>0.05)。陽性表達位于脂肪細胞細胞核和部分包膜上。 2.HIF-1a蛋白時間組：20 mg/kg 濃度 COCl<,

4、2>化學缺氧后1h、3h、6h、12h、24h 均有 HIF-1a 陽性細胞表達。3h 組表達達高峰，12h、24h 組逐漸下降。3h、6h組和1h組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，12h、24h組和1h組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 3.HIF-1a mRNA 濃度組：濃度組分別為0 mg/kg組可檢測到少量HIF-1amRNA 表達，5 mg/kg、10 mg/kg組 HIF-1a mRNA 表達出現(xiàn)或升高，20 m

5、g/kg、40 mg/kg組表達升高顯著，5 mg/kg、10 mg/kg組與0 mg/kg 組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，20 mg/kg、40 mg/kg組與0 mg/kg組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。20 mg/kg組與40 mg/kg組組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 4.HIF-1a mRNA時間組：20 mg/kg 濃度CoCl<,2>行化學缺氧后1h、3h、6h、12h、24h均有 HIF-1a