簡介：流行性感冒簡稱流感，是由流感病毒（INFLUENZAVIRUS）引起的急性呼吸系統(tǒng)疾病，具有傳播迅速，可反復感染的特點。預防流感大流行爆發(fā)的最有效手段是接種流感疫苗。傳統(tǒng)流感病毒疫苗目前還存在很多需要改進的地方，使用佐劑是改進方法之一。在流感疫苗中使用佐劑能夠增強其免疫原性，并且能夠減少單劑流感疫苗的用量，對于開發(fā)能夠預防潛在的大流行流感的疫苗以及在大流行流感爆發(fā)時候迅速生產(chǎn)足夠劑量的疫苗等均具有現(xiàn)實意義。第一部分納米乳劑作為H3N2滅活流感病毒疫苗佐劑的研究乳劑作為流感疫苗佐劑已經(jīng)具有一定的應用，納米乳劑是粒徑小于100NM的乳劑。本實驗首先尋找具有安全性的，能夠形成納米乳劑的表面活性劑、助表面活性劑、油相和水相，之后通過三元相圖法對各相的成分及比例進行研究，確定EL和SPAN80質(zhì)量比為11的混合物作為表面活性劑，配方為ELSPAN801，2丙二醇注射用大豆油。將得到的優(yōu)化納米乳劑包裹H3N2滅活流感病毒疫苗接種昆明種小鼠。納米乳劑組小鼠的血凝抑制效價在42D時達到1920，中和抗體滴度達到447，均超過鋁佐劑組及疫苗組4倍以上，并且該組小鼠體重增長正常，證明納米乳劑作為流感疫苗佐劑同時具有安全性及有效性，是較好的流感疫苗佐劑候選。第二部分中草藥提取物作為H3N2滅活流感病毒疫苗佐劑的研究我國具有中草藥提取和應用的傳統(tǒng)優(yōu)勢。一些中草藥在應對禽流感以及甲型H1N1流感的過程中扮演了重要角色，某些中草藥提取物能夠增強免疫反應也是研究人員的共識。本實驗采用40種中草藥提取物作為流感疫苗的佐劑候選，在動物體內(nèi)進行試驗，從中篩選有效的佐劑，并研究佐劑與疫苗的劑量的最佳配比。首先將40種中草藥提取物分別與H3N2滅活流感病毒疫苗混合，接種小鼠，初免后每隔7D尾部動脈采血，21D時加免一劑，采血后分離血清，測定各中草藥提取物佐劑組及對照組對H3N2病毒的血凝抑制效價并進行對比，初步篩選出鎖陽、天冬及鱉甲三種能夠明顯提高血凝抑制抗體的佐劑候選。之后對初步篩選中效果最好的鎖陽提取物設(shè)計流感疫苗及鎖陽劑量的二次旋轉(zhuǎn)回歸正交試驗，證明25ΜG血凝素含量和08MG鎖陽含量是最優(yōu)化比例，數(shù)據(jù)擬合為1778，與實驗數(shù)據(jù)1824基本相符，證明該方法合理，數(shù)據(jù)可靠。鎖陽血凝抑制效價可達1824，中和抗體滴度達562，均高于鋁佐劑組及疫苗組4倍以上。并且各組小鼠體重增長超過空白對照組，證明鎖陽作為佐劑具有安全性及有效性。

簡介：分類號R739，63；R730，23單位代碼10422密級公開學號200820787博士學位論文論文題目慢病毒介導的CAVEOLIN1小干擾RNA對下咽癌FADU細胞株生長作用的體內(nèi)外實驗研究RNAINTERFERENCEOFCAVEOLINLVIALENTIVIRALVECTORINHIBITSGROWTHOFHYPOPHARYNGEALSQUAMOUSCELLCARCJNOMAFADUCELLS，～W豫DAND，ⅣP，YD作者姓學院名專業(yè)名指導教合作導名整雪控稱醫(yī)芏睦稱戛曼墮噬鞋掌師鋈靳屋夔授師2012年4月16日原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文R，已經(jīng)灃明引川的內(nèi)容外，本淪文小包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。論文作者簽名世砰日蚶】塑生Ⅱ關(guān)于學位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解“F東大學有關(guān)保留、使用學位論文的艦定，同意學校保留或向國家有關(guān)部R或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許淪文被查閱和借閱；本人授權(quán)山東大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定論文作者簽名L蘭塑至導師簽名日期絲竺旦

簡介：點擊查看更多AnkG對小鼠精神行為和認知功能的影響及機制探討.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：鼻咽癌中EB病毒潛伏感染與免疫細胞因子IL17／IL17R信號軸的關(guān)系THERELATIONSHIPBETWEENLATENTINFECTIONOFEBVANDIMMUNECELLFACTORSIL17／IL一17RSIGNALAXISINNASOPHARYNGEALCARCINOMA學科門類學科、醫(yī)學專業(yè)病理學與病理生理學研究方向腫瘤病理學年級二。一O級研究生姓名導師姓名起止日期20109～20135廣東醫(yī)學院病理學教研室二O一三年五月目錄中文摘要。1英文摘要。41前言711研究背景712研究目的913研究內(nèi)容92臨床病理部分1021研究目的1022材料與方法。1O23結(jié)果1424討侖183實驗病理部分2631研究目的2632材料與方法2633結(jié)果3334討論384小結(jié)40參考文獻41文獻綜述。46綜述參考文獻56致謝64附錄一縮寫詞中英文對照65附錄二在讀碩士期間的科研情況66

簡介：分類號密級UDC編號學位論文S100Β和SPECT在非癡呆型血管性認知功能障礙患者應用價值研究S100ΒANDSPECTINVASCULARCOGNITIVEIMPAIRMENTNODEMENTIAINPATIENTSWITHAPPLICATIONVALUE劉亮指導教師姓名王文靜教授安醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院申請學位級別碩士專業(yè)名稱神經(jīng)病學提交論文日期2014318論文答辯日期20145學位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學20146答辯委員會主席胡紀源教授評閱人孫中武教授段瑞生教授2014年5月學位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確說明并表示謝意。學位論文作者簽名日期學位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定學校有權(quán)保留學位論文并向國家主管部門或其指定機構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)允許論文進入學校圖書館被查閱，有權(quán)將學位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，有權(quán)將學位論文的標題和摘要匯編出版。愿意將本人的學位論文提交中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫、中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并可以以電子、網(wǎng)絡及其他數(shù)字媒體形式公開出版，并同意編入CNKI中國知識資源總庫，在中國博碩士學位論文評價數(shù)據(jù)庫中使用和在互聯(lián)網(wǎng)上傳播。保密的學位論文在解密后適用本規(guī)定。學位論文作者簽名導師簽名日期日期

簡介：目的ALIARDS是一種較為常見的嚴重急性進行性缺氧性呼吸衰竭，盡管在過去的20年對其防治進行了深入研究，由于其發(fā)病機制尚未完全明確，臨床上缺乏特效治療方法，仍以器官功能和全身支持治療為主，尤其是呼吸支持治療，故其病死率雖有所下降，但仍高達40％。因此，研究新的治療策略仍是近年來所關(guān)注的熱點問題。細胞凋亡在ALIARDS發(fā)病中起著重要作用。肺泡上皮細胞（AEC）、肺血管內(nèi)皮細胞（PVEC）凋亡會引起呼吸膜通透性增高，導致滲透性肺水腫、微小肺不張和肺血管阻力增高等改變，是ALIARDS發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。故抑制AEC、PVEC凋亡可能是防治ALI的重要途徑和手段。脂多糖（LPS）和TNFΑ等可通過激活CASPASE8誘導AEC、PVEC凋亡，而FAS相關(guān)死亡域樣白介素1Β轉(zhuǎn)換酶抑制蛋白（FLIP）是一種與CASPASE8有顯著同源性的抗凋亡蛋白，它可以與CASPASE8競爭性結(jié)合FADD，阻斷DISC的組裝，從而抑制細胞凋亡。本課題組前期體外研究已證實FLIP重組體腺病毒（ADFLIP）可明顯抑制經(jīng)FAS誘導的AEC、PVEC細胞凋亡。為進一步驗證ADFLIP在動物實驗中的抗凋亡保護作用，我們利用ADFLIP溶液滴鼻吸入感染大鼠，檢測其對肺組織FLIP表達水平的影響并評價對大鼠ALIARDS的防治效果；觀察其對Ⅱ型AEC、PVEC細胞凋亡的抑制作用并探討可能的機制。這將為ALIARDS的基因治療提供重要的實驗依據(jù)。方法1ADFLIP最佳表達時間確定按滴鼻后處死動物的時間將24只SD大鼠隨機分為4組每組6只。1％戊巴比妥鈉50MGKG腹腔注射麻醉后，予ADEGFP腺病毒500ULKG滴鼻吸入以感染各組SD大鼠，分別于吸入后24H、48H、72H和96H處死各組大鼠，熒光顯微鏡下觀察各組大鼠的肺熒光蛋白EGFP表達。2ADFLIP在體研究動物分組48只SD大鼠隨機分為4組，每組12只。①FLIP治療組先經(jīng)腹腔注射脂多糖（LPS）5MGKG4－6H成功制備出內(nèi)毒素型大鼠ALI模型，之后以1％的戊巴比妥鈉50MGKG充分麻醉，予FLIP腺病毒溶液（231011VPML）500ULKG滴鼻以感染ALI大鼠；②對照治療組建立ALI模型（腹腔注射LPS5MGKG4－6H）后，以ADEGFP（341011VPML）腺病毒溶液500ULKG滴鼻作為對照。③FLIP預防組先予FLIP腺病毒500ULKG滴鼻預處理感染SD大鼠，48H后制備大鼠ALI模型；④對照預防組先予以ADEGFP腺病毒吸入作為預防對照，48后制備大鼠ALI模型。3觀察ADFLIP對肺組織FLIP表達的影響及ALIARDS的防治作用采用RTPCR和免疫組織化學染色方法檢測各組大鼠的肺組織FLIPMRNA及蛋白表達；觀察各組大鼠的一般情況、肺大體標本、肺組織病理學改變，測定各組大鼠的肺呼吸膜的通透性以及肺損傷評分。4觀察各組大鼠的肺組織凋亡狀況透射電鏡下觀察各組大鼠Ⅱ型AEC、PVEC的凋亡狀況；提取肺組織DNA，瓊脂糖凝膠電泳觀察DNALADDER的形成；WESTERNBLOT和免疫組織化學染色法分別檢測各組大鼠的肺組織凋亡相關(guān)蛋白BAX和BCL2表達。結(jié)果1熒光顯微鏡下觀察結(jié)果提示ADEGFP腺病毒滴鼻吸入能明顯提升大鼠的肺組織EGFP黃綠色熒光的表達，其中48H表達最強。2FLIP治療組和FLIP預防組大鼠的肺組織FLIPMRNA和蛋白表達水平顯著高于其各自對照組（P3FLIP治療組和FLIP預防組大鼠的肺Ⅱ型AEC、PVEC凋亡的細胞數(shù)量明顯減少，且無明顯的DNALADDER現(xiàn)象。肺組織凋亡相關(guān)蛋白BAX水平表達降低，而BCL2的表達上調(diào)（P結(jié)論通過滴鼻吸入的方法能夠使大鼠成功地感染ADFLIP，并提升其肺組織抗凋亡蛋白FLIP的表達水平；ADFLIP無論在制模前或制模后給予均能減輕LPS致大鼠ALI引起的肺水腫和肺血管通透性增高，提示對ALI起到防、治雙重作用，其機制可能是通過調(diào)節(jié)BAXBCL2比值，抑制Ⅱ型AEC、PVEC凋亡來實現(xiàn)的。本研究為ALIARDS的基因治療提供了新的思路。

簡介：中國醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學位論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。論文作者簽名叢垂盤魚日期型￡中國醫(yī)科大學研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國醫(yī)科大學有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學，且導師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學。學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導教師簽名中文論著摘要酵母雙雜交篩選與人巨細胞病毒ULL28兩種不同結(jié)構(gòu)相互作用蛋白目的人巨細胞病毒HUMANCYTOMEGALOVIRUS，HCMV是一種普遍存在的皰疹病毒，在人群中感染率為50％80％。正常人感染HCMV后表現(xiàn)為無癥狀的隱性或潛伏感染。而一旦人體的免疫機能發(fā)生重大變化時如妊娠、腫瘤、HIV感染、器官移植和新生兒等，HCMV即從潛伏感染活化為繼發(fā)性的增殖感染，引起嚴重的臨床癥狀甚至致死。同時HCMV感染還可引起間質(zhì)性肺炎、肝炎、腦炎、視網(wǎng)膜、腎、神經(jīng)系統(tǒng)、腸胃系統(tǒng)的疾病。隨著免疫低下人群患者的增多，HCIVIV感染及其引發(fā)的嚴重疾病致盲、致死日益受到關(guān)注。HCMV廣泛的致病性是由其病毒感染多種類型細胞的能力決定的。在免疫功能低下人群中HCMV感染的首要目標為內(nèi)皮細胞和上皮細胞。研究證明HCMVULL31A128編碼蛋白是病毒在內(nèi)皮細胞中的復制及白細胞的播散過程中的重要決定因子。而我們在研究中發(fā)現(xiàn)ULL28ORFOPENINGREADINGFLAME具有兩個大小不同的片段，分別為519BP和642BP，我們將其命名為HCMVULL28519BP和HCMVULL28642BP，為了觀察兩個ORF片段所編碼蛋白的功能是否相同及其是否在HCMVULL31A128編碼蛋白感染內(nèi)皮及上皮細胞過程中發(fā)揮著各自不同的作用，故而利用酵母雙雜交系統(tǒng)從人胎腦CDNA文庫中篩選與HCMVULL28519BP和HCMVULL28642BP編碼蛋白相互作用的蛋白，這將為研究HCMVULL28基因在內(nèi)皮細胞感染嗜性中所發(fā)揮的作用及揭示HCMV先天感染致病機理、解決人巨細胞病毒先天感染的防治、減少先天畸形兒出生等醫(yī)學問題奠定基礎(chǔ)。

簡介：目的①翻譯修訂版控制態(tài)度量表，使其適合中國文化背景下使用。②測評冠心病住院患者的感知控制水平，并探討影響冠心病住院患者感知控制的相關(guān)因素。③探討冠心病患者感知控制與焦慮、抑郁的相關(guān)性。④評價認知行為干預對冠心病住院患者感知控制、焦慮及抑郁的影響。方法①翻譯英文版修訂版控制態(tài)度量表CASR，采用相關(guān)分析進行項目篩選，采用因子分析、內(nèi)容效度指數(shù)進行效度檢驗以及CRONBACHSΑ系數(shù)、重測信度、分半信度進行信度檢驗，完善評價工具。②選取中南大學湘雅二醫(yī)院符合入排標準的106例患者為研究對象，隨機分為對照組及干預組各53例。兩組均接受常規(guī)護理如觀察病情、心理護理、用藥護理、專科護理、健康教育等。干預組另給予以認知重構(gòu)、問題解決為主要技術(shù)的認知行為干預共5次，每次20～40MIN。③應用中文版CASR、焦慮自評量表SAS及抑郁自評量表SDS，于干預前、干預后及干預后3月測評冠心病患者感知控制、焦慮及抑郁水平。④采用SPSS130進行T檢驗，非參數(shù)檢驗MANNWHITNEYU檢驗，WILCOXON符號秩檢驗和KRUSKALWALLISH檢驗，多元線性回歸分析，構(gòu)成比、率間比較的X2檢驗，SPEARMAN相關(guān)分析及重復測量資料方差分析。結(jié)果①CASR項目分析各條目得分與量表總分PEARSON相關(guān)系數(shù)在0539～0769之間CASR效度評價驗證性因子分析顯示保留1個維度較適宜，CVI為0875CASR信度評價CRONBACHSΑ系數(shù)為0806，重測信度為0813，分半信度為0781。②冠心病住院患者CASR得分為2717±478分，合并癥數(shù)、NYHA分級、心肌梗死及性別是影響患者CASR得分的主要因素。③CASR得分與SAS、SDS得分呈負相關(guān)P＜001。④干預對CASR得分的影響對照組干預前后CASR得分差異無統(tǒng)計學意義P＞005，而干預組干預后CASR得分高于干預前，差異有統(tǒng)計學意義P＜005干預組干預后CASR得分增加的幅度大于對照組，差異有統(tǒng)計學意義P＜005CASR干預主效應、時間主效應及交互效應均有統(tǒng)計學意義P＜005。④干預對SAS得分及焦慮發(fā)生率的影響對照組及干預組干預后SAS得分均低于干預前，差異均有統(tǒng)計學意義P＜005干預組干預后SAS得分下降的幅度大于對照組，差異有統(tǒng)計學意義P＜005SAS得分干預主效應、時間主效應及交互效應均有統(tǒng)計學意義P＜005干預組干預后焦慮發(fā)生率低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜005）。⑤干預對SDS得分及抑郁發(fā)生率的影響對照組與干預組干預后SDS得分低于干預前，差異有統(tǒng)計學意義P＜005干預組干預后SDS得分下降的幅度大于對照組，差異有統(tǒng)計學意義P＜005SDS得分干預主效應、時間主效應及交互效應均有統(tǒng)計學意義P＜005干預后干預組抑郁發(fā)生率低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜005）。結(jié)論①本研究翻譯的中文版修訂版控制態(tài)度量表CASR具有較好的信效度，適合在中國文化背景下使用，達到了心理測量學的要求。②冠心病住院患者感知控制水平較低，其與患者合并癥數(shù)、NYHA分級、心肌梗死及性別有關(guān)。③冠心病感知控制與焦慮、抑郁呈負性相關(guān)。④認知行為干預可有效提升冠心病住院患者感知控制水平，這種效果在干預后3個月仍存在。認知行為干預在一定程度上降低了冠心病住院患者焦慮、抑郁水平。

簡介：呼吸道合胞病毒RESPIRATYSYNCYTIALVIRUSRSV感染可引起嬰幼兒發(fā)生嚴重的毛細支氣管炎、肺炎甚至死亡也是誘發(fā)兒童哮喘的重要危險因素12。然而目前治療RSV感染尚無特異性抗病毒藥物3探尋一種既安全又有效可用于預防和或治療RSV感染的抗病毒藥物仍舊迫切需要。重組人干擾素Α1BRECOMBINANTHUMANINTERFERONΑ1BRHIFNΑ1B是一類由我國自主研制成功獲得我國生產(chǎn)批文的基因工程類正規(guī)藥品4目前主要應用于慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及某些惡性腫瘤的治療56具有明顯的抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)功能。然而關(guān)于RHIFNΑ1B治療兒童RSV感染僅限國內(nèi)報道缺乏正規(guī)統(tǒng)一的規(guī)范化治療指南且國內(nèi)多位專家共識7認為“Α干擾素作為抗病毒治療常用藥物已有臨床使用經(jīng)驗但尚無兒童霧化吸入推薦劑量其有效性也需進一步證實”。本科RSV系列實驗前期研究了RHIFNΑ1B霧化吸入對RSV感染小鼠的作用8以及小兒病毒性肺炎患兒肌內(nèi)注射RHIFNΑ1B的安全性和耐受性4。前者研究發(fā)現(xiàn)霧化吸入RHIFNΑ1B12ΜG對RSV感染小鼠治療有效8后者研究發(fā)現(xiàn)在0320ΜGKG范圍內(nèi)肌內(nèi)注射RHIFNΑ1B對于小兒病毒性肺炎恢復期患兒耐受性良好無明顯毒副作用4。因此本實驗研究RHIFNΑ1B多劑量、大劑量霧化吸入對RSV感染小鼠的作用試圖進一步探討RHIFNΑ1B對RSV感染小鼠的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用。目的本實驗旨在采用RHIFNΑ1B不同劑量霧化吸入和RHIFNΑ1B腹腔注射兩種方式對RSV感染小鼠進行干預通過光鏡和透射電鏡觀察肺組織病變熒光定量RTPCR檢測肺組織RSV病毒載量流式細胞術(shù)檢測外周血T淋巴細胞亞群和ELISA方法檢測血清細胞因子水平的方法探討RHIFNΑ1B對RSV感染小鼠的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用為RHIFNΑ1B治療兒童呼吸道RSV感染的臨床用藥提供一定的實驗依據(jù)。方法1培養(yǎng)HEP2細胞增殖RSV收集病毒液。2提取病毒液RNA熒光定量RTPCR進行鑒定。3鑒定其為RSV后測定病毒滴度TCID50。4將BALBC小鼠隨機分為10組每組10只分別為空白對照組1組、陰性對照組1組、RSV感染模型組1組、RHIFNΑ1B3125ΜG、125ΜG、25ΜG、50ΜG霧化吸入組4組、利巴韋林霧化吸入組1組、RHIFNΑ1B腹腔注射組1組、利巴韋林腹腔注射組1組。5RSV病毒液滴鼻成功建立RSV感染小鼠模型后按照分組連續(xù)給予各組小鼠霧化吸入或腹腔注射干預治療5天空白對照組除外。6于次日采集小鼠全血流式細胞術(shù)檢測CD3CD4與CD3CD8水平計算兩者比值。7分離小鼠血清ELISA檢測IFNΓ、IL4、IL17水平。8剖取小鼠肺組織制作HE染色切片光鏡下觀察小鼠肺組織病理學改變計算組織病理學評分。9制作電鏡超薄切片透射電鏡下觀察小鼠肺組織超微結(jié)構(gòu)改變。10熒光定量RTPCR檢測小鼠肺組織RSV病毒載量。11統(tǒng)計學分析。結(jié)果1HEP2細胞培養(yǎng)及RSV增殖過程順利。2熒光定量RTPCR建立標準曲線斜率262Y軸截距395相關(guān)系數(shù)0990基線范圍615閾值016即得到標準曲線方程式Y(jié)262X395。病毒液核酸檢測結(jié)果陽性鑒定其為RSV可用于后續(xù)實驗。3根據(jù)REEDMUENCH公式計算得出RSV病毒液TCID501046。4RSV感染小鼠表現(xiàn)為不同程度的精神萎靡運動遲緩飲食減少呼吸急促毛發(fā)豎立無光澤部分表現(xiàn)有咳嗽及打噴嚏癥狀提示RSV感染小鼠模型建立成功。5光鏡下可見RSV感染模型組小鼠肺組織支氣管與細支氣管周大量淋巴細胞浸潤管腔內(nèi)大量分泌物滲出肺泡隔顯著增寬肺泡腔狹窄或消失肺泡腔內(nèi)可見紅細胞及淡紅色透明水腫液。RSV感染模型組小鼠肺組織病理學評分24600分±1342分與陰性對照組1600分±2191分和空白對照組0800分±1789分比較顯著升高差異有統(tǒng)計學意義P6透射電鏡下可見RSV感染模型組小鼠肺泡隔顯著增厚充血、出血、水腫明顯部分有肺實變表現(xiàn)肺泡腔縮小或消失腔內(nèi)可見紅細胞與壞死、脫落的細胞碎片等Ⅰ型肺泡上皮細胞為早期凋亡表現(xiàn)胞核異形改變核染色質(zhì)邊集凝聚胞質(zhì)內(nèi)吞飲小泡數(shù)量明顯降低次級溶酶體數(shù)量增多線粒體數(shù)量減少細胞表面微絨毛變性壞死雜亂分布膠原成分形成細胞連接疏松部分已經(jīng)完全脫落Ⅱ型肺泡上皮細胞少有早期凋亡表現(xiàn)胞核變化不大胞質(zhì)內(nèi)線粒體數(shù)量增多嗜鋨性板層小體數(shù)量增多分泌、胞吐現(xiàn)象活躍。RHIFNΑ1B不同劑量霧化吸入組可見小鼠肺組織炎性損傷程度明顯減輕。利巴韋林霧化吸入組可見程度不一的高電子密度致密物沉積現(xiàn)象連接成線狀或帶狀均勻分布于肺泡隔基底膜區(qū)域而RHIFNΑ1B霧化吸入組與2個腹腔注射組均未觀察到此類現(xiàn)象。7熒光定量RTPCR檢測結(jié)果顯示陰性對照組與空白對照組小鼠肺組織未檢出RSVRSV感染模型組小鼠肺組織RSV病毒載量最高153706±18982COPIESMG與其余各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義P005。8流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示RSV感染模型組小鼠外周血CD3CD4水平78820％±0973最高CD3CD8水平18020±1628最低兩者比值4404±0415顯著升高與陰性對照組和空白對照組比較差異有統(tǒng)計學意義P005。9ELISA檢測結(jié)果顯示RSV感染模型組小鼠血清IFNΓ水平最低39386PGML±11942PGMLIL4131241PGML±15388PGML與IL17132080PGML±17659PGML水平最高與陰性對照組和空白對照組比較差異有統(tǒng)計學意義P005。結(jié)論1RHIFNΑ1B霧化吸入對RSV感染小鼠肺組織病毒載量具有良好的抑制作用。2RHIFNΑ1B霧化吸入對RSV感染小鼠外周血T淋巴細胞亞群失衡具有良好的調(diào)節(jié)作用。3RHIFNΑ1B霧化吸入對RSV感染小鼠血清IFNΓ、IL4和IL17水平具有良好的調(diào)節(jié)作用。4RHIFNΑ1B不同劑量霧化吸入對RSV感染小鼠的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用存在一定的劑量效應關(guān)系。5RHIFNΑ1B50ΜG霧化吸入對RSV感染小鼠的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用最佳強于利巴韋林霧化吸入與RHIFNΑ1B腹腔注射。6RHIFNΑ1B腹腔注射與利巴韋林腹腔注射對RSV感染小鼠的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用未見明顯差異。7首次研究RHIFNΑ1B多劑量、大劑量霧化吸入對RSV感染小鼠的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用并與RHIFNΑ1B腹腔注射進行療效對比為RHIFNΑ1B治療RSV感染的進一步臨床應用研究奠定了實驗基礎(chǔ)。

簡介：乙型腦炎病毒又稱日本腦炎病毒JAPANESEENCEPHALITISVIRUS，JEV，簡稱乙腦病毒，隸屬于黃病毒科（FLAVIVIRIDAE）黃病毒屬FLAVIVIRUS。按照病毒全基因組或部分基因組序列可以將乙腦病毒分為5個基因型（基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）。JEVGZ56毒株是我國于2006年首次從病毒性腦炎患者標本中分離得到屬基因Ⅰ型的乙腦病毒。JEVXZ0934毒株是我國于2009年從西藏采集到的蚊子中獲得的屬基因Ⅴ型乙腦毒株，該毒株是繼馬來西亞于1952年從人患中分離獲得的屬基因Ⅴ型乙腦毒株MUAR后由我國第一次分離獲得的屬基因Ⅴ型乙腦病毒。本研究分別從兩只分別因感染JEVGZ56及XZ0934而致死的乳鼠腦部中分別獲得JEVGZ56及XZ0934毒株，并分別對其進行空斑純化以期獲得純化的JEVGZ56及XZ0934毒株，進而將這兩株純化的病毒設(shè)計為16個片段擴增獲得它們的全基因組序列，從而通過現(xiàn)代分子生物學理論與技術(shù)測定和分析了這兩株病毒的全基因組序列特征，以了解它們的致病性分子基礎(chǔ)。本研究進而將JEVXZ0934毒株的基因組全長通過RTPCR法分段擴增為兩兩疊搭的4個大片段，并分段克隆至具有多個限制性酶切位點的改造載體PACYCMCS上，以期利用反向遺傳學技術(shù)闡明該病毒的致病分子機理、研制重組病毒疫苗及開發(fā)基因工程載體。研究結(jié)果顯示JEVGZ56毒株的基因組全長為10965NT，編碼3432個氨基酸。病毒全基因組分子進化分析顯示JEVGZ56毒株的全基因組與國際上第一株從蚊蟲分離的基因Ⅰ型乙腦病毒（M28株）處于同一進化分支。GZ56株與其它基因Ⅰ型乙腦病毒核苷酸和氨基酸序列同源性分別為962％～986％和982％～997％。病毒E基因與乙腦病毒滅活疫苗株P(guān)3相比存在11個氨基酸差異位點，而與乙腦病毒減毒活疫苗株SA14142相比，在E蛋白上存在14個氨基酸差異位點。JEVXZ0934毒株的基因組全長為10983NT，編碼3432個氨基酸。病毒全基因組分子進化分析顯示JEVXZ0934毒株的全基因組與國際上第一株從死患中分離的基因Ⅴ型乙腦病毒（MUAR株）處于同一進化分支。XZ0934株與GENBANK中選擇的23株乙腦毒株全基因組序列比較發(fā)現(xiàn)，其核苷酸和氨基酸總體同源性分別為788％～907％和900％～983％其中，XZ0934株與MUAR株的核苷酸和氨基酸同源性分別為907％和983％與GZ56株的核苷酸和氨基酸同源性分別為794％和912％。病毒E基因與乙腦病毒滅活疫苗株P(guān)3相比存在47個氨基酸差異位點，而與乙腦病毒減毒活疫苗株SA14142相比，在E蛋白上存在52個氨基酸差異位點。改造載體PACYCMCS構(gòu)建成功，其全長為2467BP，具氨芐抗性且在多克隆位點MCS處具23個限制性內(nèi)切酶經(jīng)RTPCR擴增所得的JEVXZ0934毒株的4個大片段的長度分別為2418BP、3002BP、2607BP、2983BP且測序結(jié)果表明，該病毒的基因組全長已連接至改造載體PACYCMCS上，所得PACYCMCSXZ0934的基因組全長為13450BP。

簡介：背景乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV感染是世界范圍內(nèi)導致病毒相關(guān)性慢性肝臟疾病最常見的因為之一。據(jù)估計全世界約有3億慢性HBV攜帶者，我國的HBV感染者約為12億。慢性HBV感染可引起包括無癥狀攜帶、慢性乙型肝炎CHRONICHEPATITISB，CHB、肝硬化和肝癌，或進展為肝衰竭LIVERFAILURE，LF的一系列肝臟疾病譜。慢加急性肝衰竭ACUTEONCHRONICLIVERFAILURE，ACLF是在慢性乙肝病毒感染基礎(chǔ)上，由于病毒復制、感染、內(nèi)毒素血癥及勞累飲酒等誘因，引起的肝臟急性炎癥加重，肝臟發(fā)生大塊或亞大塊壞死，導致病情急劇加重，引起肝衰竭。中國80％的ACLF患者與HBV感染相關(guān)。ACLF的死亡率很高，在未進行肝移植的患者中高達6080％。在CHB基礎(chǔ)上進展為肝衰竭的機制復雜，HBV病毒和機體免疫的因素都起著重要的作用。既往文獻報道HBV病毒變異，特別是前C區(qū)終止密碼了G1896A，PC和基本核心啟動子BASIECEPROMOTER，A1762TG1764A，BCP的變異率在急性肝衰竭的患者中明顯升高；PC和BCP變異下調(diào)了作為免疫耐受原的HBEAG，血清中HBEAG下降或缺如，導致HBCAG表達增加，使TH1輔助細胞發(fā)動細胞毒性T細胞CYTOXICTLYMPHOCYTE，CTL攻擊感染的肝細胞，從而導致肝細胞壞死。HBCAG作為CTL靶抗原，包含有多個能被CTL識別的表位EPITOPE。表位是特異性細胞免疫應答得以激發(fā)的主要原動力，處于免疫識別和免疫激活的核心位置。核苷酸的轉(zhuǎn)換、插入和缺失可導致氨基酸的有義突變，當這種突變影響到病毒的特異性T淋巴細胞和B淋巴細胞表位的序列和序列構(gòu)象時，進一步會影響與HLA分子的結(jié)合力或與B、T淋巴細胞受體的結(jié)合力，從而影響宿主針對病毒的免疫應答能力。在一些腫瘤和其他病毒細胞免疫應答方面，研究已證實基因變異會導致T細胞表位漂移EPITOPEDRIFT，從而改變了表位的免疫原性，進而影響疾病的發(fā)展與預后。目的以中國廣東地區(qū)ACLF患者為主要對象，從HBV變異影響基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控和影響宿主免疫應答兩個方面，探討病毒變異與ACLF患者發(fā)病的關(guān)系。方法39例ACLF患者和38例嚴重肝炎活動患者SEVEREHEPATITISB，SHB作為主要研究對象。其中ACLF診斷標準在慢性肝病的基礎(chǔ)上急性起病，15天至26周出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)者①極度乏力，有明顯的消化道癥狀；②黃疸迅速加深，血清總膽紅素TB≥正常值上限10倍，或每日上升≥171ΜMOLL；③凝血酶原時間明顯延長，凝血酶原活動度PTA≤40％。SHB定義參照文獻的報道丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT≥600UL、TB≥513ΜMOLL和PTA≤50％。作為對照組的44例CHB患者定義為HBV表面抗原HBSAG陽性半年以上，出現(xiàn)的輕度或中度肝炎活動，即ALT波動于80400UL和TB≤171ΜMOL。以上患者臨床和實驗室檢查均無明顯肝硬化征象。ACLF和SHB的患者平均隨訪106月最長17個月，最短3個月。采集患者的臨床資料和血清標本。抽提DNA，通過聚合酶鏈反應POLYMERASECHAINREACTION，PCR擴增和測序HBV前CC區(qū)，通過克隆測序的方法對HBV混合株感染加以驗證。通過生物預測網(wǎng)站SYFPEITHI和BIMAS分析線性TH細胞表位和CTL表位發(fā)生變異后與HLA分子的結(jié)合能力，用HBCAGX線衍射3D結(jié)構(gòu)分析B細胞表位變異后構(gòu)型的改變。用五聚體染色PENTAMERSTAINING技術(shù)探討表位免疫原性的改變。結(jié)論1根據(jù)LOGISTIC回歸篩選與從SHB進展為ACLF相關(guān)的因素包括TB升高和PTA降低。在ACLF中，PTA下降與不良結(jié)局相關(guān)。2基因B型在ACLF和SHB兩組比率均高于CHB組，且SHB組與CHB組比較有統(tǒng)計學意義。這表明在中國南方地區(qū)基因B型與嚴重的肝臟炎癥活動發(fā)病相關(guān)。3BCPA1762TG1764A和PCG1896A變異率在ACLF組明顯高于CHB組。ACLF組HBV發(fā)生BCPPC和BCPPC的比例明顯高于CHB組，而BCPPC比例明顯低于CHB組。這個結(jié)果證實了A1762TG1764A和G1896A高變異與ACLF發(fā)病的相關(guān)性。4在BCPPC、BCPPC、BCPPC和BCPPC模式中HBEAG的陰性率逐步升高；而且BCPPC和BCPPC模式下調(diào)HBEAG的作用與其他兩種模式相比明顯增強；在單變異模式中PC變異下調(diào)HBEAG作用強于BCP變異；且在ACLF組BCPPC和PC單變異的比例明顯高于CHB組。這表明PC和BCPPC模式導致的HBEAG陰性與ACLF發(fā)病相關(guān)。5C基因編碼區(qū)發(fā)生變異的頻率在ACLF組明顯高于CHB組。ACLF中氨基酸變異率明顯升高的位點絕大部分位于表位區(qū)域。統(tǒng)計各個表位區(qū)變異的頻率，在ACLF組均高于CHB組。這說明表位變異可能在ACLF發(fā)病中起著重要的作用。6AA5和AA60變異存在明顯的協(xié)同關(guān)系。兩位點盡管在線性位置相隔遠，但在HBCAG空間構(gòu)型上位置相鄰，分享HBCAG四聚體中同一個螺旋束。通過預測分析肽段發(fā)生AA5PT的變異后與HLAA0201結(jié)合力增強；提示AA5變異后可能提高表位的免疫原性、誘導更強的免疫反應；而AA5PT的變異在ACLF中明顯升高5263％；表明AA5T與ACLF的發(fā)病相關(guān)。AA60由于與AA5空間位置相鄰，可能在極性、PH值、親水性等多個因素的影響下，出現(xiàn)協(xié)同變異。7HLAA2限制性CTL表位HBCAG1827Ⅴ27在ACLF組的比率明顯升高，且隨訪后ACLF患者中，HLAA2陽性的患者均變異127；且HBCAG1827Ⅴ27特異性CD8細胞的頻數(shù)高于HBCAG1827Ⅰ27特異性CD8細胞的頻數(shù)。這表明HBCAG182727Ⅴ在HLAA2陽性患者中引起較強的免疫應答，在清除了AA27Ⅴ病毒的同時，導致了肝臟炎癥的發(fā)生，與ACLF的發(fā)病相關(guān)。

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簡介：目的運用蛋白質(zhì)組學方法尋找慢性乙肝中醫(yī)肝腎陰虛證、脾腎陽虛證患者外周血漿中差異表達的蛋白質(zhì)分析其與慢性乙肝中醫(yī)虛證證侯的對應關(guān)系初步探索出慢性乙肝中醫(yī)虛證的蛋白質(zhì)組學規(guī)律為中醫(yī)臨床辨識慢性乙肝虛證提供可供參考的客觀化指標最終為進一步探討慢性乙肝中醫(yī)虛證的分子基礎(chǔ)提供線索。方法通過雙向凝膠電泳獲得正常對照組、肝腎陰虛證組、脾腎陽虛證組的血漿蛋白質(zhì)TWODIMENSIONALELECTROPHESIS2DE圖譜經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定出差異表達的蛋白質(zhì)。具體方法依據(jù)病毒性肝炎中醫(yī)辨證標準在瀘州醫(yī)學院附屬中醫(yī)醫(yī)院2008年5月～2009年8月期間的住院和門診慢性乙肝患者中收集典型的肝腎陰虛證、脾腎陽虛證及健康正常人各三例作為研究對象對其血漿蛋白進行雙向凝膠電泳。第一向采用PH47的固相PH梯度膠條IMMOBILIZEDPHGRADIENTSIPG等電聚焦ISOELECTROFOCUSINGIEF第二向采用濃度為12％的十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳SODIUMDODECYLSULPHATEPOLYACRYLAEGELELECTROPHESISSDSPAGE。硝酸銀染色后并經(jīng)凝膠圖像采集系統(tǒng)獲得血漿蛋白質(zhì)2DE圖譜采用IMAGEMASTER2DPLATINUMV50軟件對組內(nèi)及組間的圖譜對比分析依據(jù)IPG膠條的固相PH梯度中等電點PI線性梯度和標準分子量MARKER確定各蛋白點的相對分子量DA、相對等電點PI將實驗組與對照組的雙向電泳結(jié)果出現(xiàn)標準化總灰度值％VOL相差達2倍以上的蛋白點視為差異表達蛋白質(zhì)切取相應的差異表達蛋白點作質(zhì)譜分析搜索SWISSPROT數(shù)據(jù)庫鑒定出各差異表達的蛋白質(zhì)初步建立起差異表達的蛋白質(zhì)與慢性乙肝虛證的對應關(guān)系。結(jié)果1各組血漿蛋白2DE圖譜中大多數(shù)蛋白點分布在P14565分子量2590KD的范圍內(nèi)。經(jīng)IMAGEMASTER2DPLATINUMV50軟件分析各組均可獲得重復性穩(wěn)定的蛋白點約450±100個。2慢性乙肝中肝腎陰虛證組的2DE圖譜與正常組對比表現(xiàn)為蛋白點4、7表達量明顯升高蛋白點3、8、9表達量明顯下降。經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定并結(jié)合SWISSPROT蛋白數(shù)據(jù)庫得出蛋白點4為C反應蛋白CREACTIVEPROTEINCRP、蛋白點7為甲狀腺素結(jié)合蛋白THYROXINEBINDINGPROTEINTTR、蛋白點3為載脂蛋白A2APOA2、蛋白點8、9為同一蛋白結(jié)合珠蛋白HAPTOGLOBINHP。3慢性乙肝中脾腎陽虛證組的2DE圖譜與正常組對比表現(xiàn)為蛋白點1、2、3、7、8、9表達量明顯下降蛋白點5、6表達量明顯升高。經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定并結(jié)合SWISSPROT蛋白數(shù)據(jù)庫得出蛋白點1為載脂蛋白C2APOC2、蛋白點2為血清淀粉蛋白PSERUMAMYLOIDSAP、蛋白點3為APOA2、蛋白點7為甲狀腺素結(jié)合蛋白TTR、蛋白點8、9為同一蛋白結(jié)合珠蛋白HP、蛋白點5、6為同一蛋白血漿視黃醇結(jié)合蛋白PLASMARETINOLBINDINGPROTEINRBP。4歸納總結(jié)慢性乙肝中醫(yī)二虛證與正常對照組2DE圖譜發(fā)現(xiàn)慢性乙肝中醫(yī)二虛證與正常人相比存在明顯的規(guī)律性差異表現(xiàn)為蛋白點3、8、9分別為APOA2、HP表達量均明顯下降。結(jié)論1成功建立起慢性乙肝肝腎陰虛證組、脾腎陽虛證及正常對照組血漿蛋白質(zhì)組2DE圖譜。2慢性乙肝中肝腎陰虛證組除了APOA2、HP明顯下降外還表現(xiàn)CRP、TTR表達量明顯升高而在正常人和脾腎陽虛證組中均未體現(xiàn)推測CRP、TTR表達量的升高參與了慢性乙肝中肝腎陰虛證侯的形成機制。進一步深入研究可望為臨床該證型的診斷提供客觀化分子指標。3慢性乙肝中脾腎陽虛證組除了APOA2、HP表達量明顯下降外還表現(xiàn)為APOC2、SAP、TTR表達量明顯下降RBP表達量明顯升高推測這些蛋白質(zhì)表達量的變化可能與慢性乙肝中脾腎陽虛證的病理機制相關(guān)。臨床通過對慢性乙肝患者血漿蛋白質(zhì)組的篩查可能為臨床該證型的診斷找到客觀化分子診斷指標。4歸納總結(jié)慢性乙肝中醫(yī)二虛證與正常對照組之間2DE圖譜相比存在明顯的規(guī)律性差異表現(xiàn)為APOA2、HP表達量均明顯下降提示慢性乙肝中醫(yī)二虛證具有相同的蛋白質(zhì)變化規(guī)律推測這些相同的蛋白質(zhì)變化可能與慢性乙肝各中醫(yī)虛型證型的形成機制有關(guān)。通過進一步深入研究可望為臨床慢性乙肝虛證的診斷提供客觀的分子指標。

簡介：貴陽醫(yī)學院2013屆碩士論文中國圖書資料分類法分類號R7431單位代碼10660學號S100285貴陽醫(yī)學院貴陽醫(yī)學院20132013屆臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位論文血壓晝夜節(jié)律與腦白質(zhì)疏松及認知功能的相關(guān)性研究臨床論文部分臨床論文部分研究生胡媛導師劉芳教授年級2010級專業(yè)神經(jīng)病學2013年5月10日貴陽醫(yī)學院2013屆碩士論文2血壓晝夜節(jié)律與腦白質(zhì)疏松及認知功能的相關(guān)性研究專業(yè)神經(jīng)病學研究生胡媛導師劉芳教授摘要摘要目的探討血壓晝夜節(jié)律變化特點與腦白質(zhì)疏松發(fā)生及認知功能障礙的相關(guān)性，為尋找腦白質(zhì)疏松、認知功能損害因素提供臨床基礎(chǔ)依據(jù)。方法對以頭昏、眩暈就診的患者行動態(tài)血壓監(jiān)測，根據(jù)血壓晝夜節(jié)律的特點分為為杓型、非杓型、反杓型、深杓型四組，結(jié)合影像學腦白質(zhì)疏松有無及輕、中、重度的評定，及MOCA、MMSE及ADL等神經(jīng)心理學量表的檢測，同時記錄相關(guān)危險因素資料，對資料用相應的統(tǒng)計學方法進行分析。結(jié)果1在腦白質(zhì)疏松危險因素的回歸分析顯示，異常晝夜血壓節(jié)律、高血壓史、糖尿病史、高膽固醇血癥、頸部血管斑塊等因素與之有關(guān)P005。2異常晝夜血壓節(jié)律各組非杓型、反杓型、深杓型）的白質(zhì)疏松發(fā)生率較杓型血壓節(jié)律組高（P001）。白質(zhì)疏松分度后發(fā)現(xiàn)，中度白質(zhì)疏松發(fā)生百分率在異常晝夜血壓節(jié)律組出現(xiàn)率最高，重度白質(zhì)疏松發(fā)生百分率深杓型組明顯高于其它三組，差異有顯著性P005。3在MMSE、MOCA、ADL評分的比較中異常血壓節(jié)律各組的MMSE、MOCA評分較杓型組低P005，尤以反杓型、深杓型組明顯；在ADL評分中，深杓型組受損最為明顯，與杓型組比差異有顯著性P005。4白質(zhì)疏松患者中異常晝夜血壓節(jié)律各組出現(xiàn)MOCA≦25分的百分率均較正常杓型血壓節(jié)律組高P001。5腦白質(zhì)疏松患者MOCA量表各分項目比較，在視空間執(zhí)行功能、注意力、及延遲回憶中，異常血壓節(jié)律各組減退較杓型組明顯P005，其中反杓型、深杓型最甚。結(jié)論1異常晝夜血壓節(jié)律是腦白質(zhì)疏松危險因素。2血壓節(jié)律異?；颊叩陌踪|(zhì)疏松發(fā)生率較高。3異常晝夜血壓節(jié)律的認知功能評分較正常杓型組低，其中反杓型、深杓型明顯。白質(zhì)疏松患者中異常血壓節(jié)律組出現(xiàn)輕度認知功能障礙例數(shù)較正常杓型組多。4白質(zhì)疏松患者MOCA量表項目分值的比較中，異常血壓節(jié)律在視空間執(zhí)行功能、注意力、及延遲回憶方面較杓型組減退，反杓型、深杓型明顯。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞血壓晝夜節(jié)律腦白質(zhì)疏松認知功能障礙

簡介：腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子BRAINDERIVEDNEUROTROPHICFACT，BDNF是腦內(nèi)廣泛存在的一種蛋白質(zhì)，由腦組織合成，主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，尤以上丘腦、海馬、大腦皮層和紋狀體部位含量最高。BDNF在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中起重要作用，能夠維持多種神經(jīng)元的存活、分化及生長發(fā)育，并促進受損神經(jīng)元的恢復與再生，對突觸間經(jīng)典遞質(zhì)的釋放有增強作用，影響神經(jīng)元的可塑性。研究發(fā)現(xiàn)，BDNF含量和分布的變化與很多神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機制有很大關(guān)系，且向腦內(nèi)補充外源性BDNF對神經(jīng)退行性疾病有治療作用。血腦屏障BLOODBRAINBARRIER，BBB主要由腦毛細血管內(nèi)皮細胞BRAINMICROVULARENDOTHILIALCELLS，BMECS及其之間的緊密連接組成，若外源性物質(zhì)要通過BBB必須滿足兩個條件1）分子量必須小于500DA2）脂溶性高。由于BDNF屬于大分子陽離子蛋白質(zhì)，外源性BDNF很難通過血腦屏障而發(fā)揮作用，因此，如何將外源性BDNF蛋白轉(zhuǎn)運入腦仍是一項挑戰(zhàn)。迄今為止，克服BBB的中樞系統(tǒng)給藥方法包括兩類其一是侵入性給藥方法包括腦內(nèi)定位注射、腦室內(nèi)或海馬穿刺給藥、腦部移植工程化細胞等，然而該類方法因其缺點藥物很快被組織清除、不易擴散、濃度梯度大、技術(shù)要求高、風險大等而不能應用于臨床。其二是非侵入性給藥方法該類方法通過載體的介導將生物大分子轉(zhuǎn)運入腦，其具有高效、低毒、安全、方便等優(yōu)點。將蛋白質(zhì)或多肽載體與外源性大分子物質(zhì)通過基因工程的方法連接，在工程菌中表達融合蛋白，可以實現(xiàn)載體協(xié)助大分子物質(zhì)進行入腦轉(zhuǎn)運?？袢《咎堑鞍識ABIESVIRUSGLYCOPROTEIN，RVG具有嗜神經(jīng)性，能夠攜帶其他物質(zhì)向中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運。序列分析顯示，RVG上的189214和330357氨基酸序列是病毒與神經(jīng)元連接的關(guān)鍵部位，我們將330357這段序列與含九個精氨酸的膜轉(zhuǎn)導肽CELLPERATINGPEPTIDES，CPPS通過3個甘氨酸連接后形成RVG衍生肽RVGDERIVEDPEPTIDERDPKSVRTWNEIIPSKGCLRVGGRCHPHVNGGGRRRRRRRRR。RDP能夠攜帶多種大分子蛋白質(zhì)穿過血腦屏障并發(fā)揮生物學作用。本文試圖通過基因工程的方法將RDP基因與BDNF基因融合并在大腸桿菌中誘導表達，將融合蛋白經(jīng)尾靜脈注射入小鼠體內(nèi)，通過ELISA法檢測RDP介導的BDNF蛋白在小鼠體內(nèi)的分布，采用MRIS水迷宮的方法探究RDPBDNF對東莨菪堿所致認知障礙模型小鼠的作用，并研究其作用機理。實驗結(jié)果表明，重組的RDPBDNF能夠跨血腦屏障并發(fā)揮其神經(jīng)營養(yǎng)活性，能改善東莨菪堿誘導的認知功能障礙小鼠的學習記憶能力，其作用機制可能與提高認知障礙模型小鼠腦內(nèi)BDNF水平，從而增強膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)的功能及維持氧化應激狀態(tài)平衡有關(guān)。