簡介：西尼羅病毒W(wǎng)ESTNILEVIRUS，WNV屬于黃病毒科FLAVIVIRIDAE黃病毒屬GENUSFLAVIVIRUS，可導致人類西尼羅熱或西尼羅腦炎，該病是由WNV引起，經(jīng)蚊蟲傳播，以鳥類為主要宿主動物的自然疫源性疾病。西尼羅病毒在自然界中的傳播循環(huán)為鳥一蚊一鳥，人和馬可作為該病毒的偶然宿主。自1937年首次從烏干達西尼羅地區(qū)分離到WNV以來，西尼羅熱在非洲、中東和歐亞大陸呈散發(fā)流行。然而，上世紀90年代以來，該病的流行趨勢發(fā)生了重大變化，出現(xiàn)暴發(fā)流行的地區(qū)增多，尤其1999年在美國紐約首次暴發(fā)西尼羅病毒感染，在隨后幾年內(nèi)迅速擴散到幾乎美國本土所有的州，并到達加拿大、墨西哥、加勒比海地區(qū)，表明它不再局限于東半球，而是迅速向西半球蔓延。發(fā)病率大幅度增加，且伴隨著非常高的鳥類病死率，WNV已成為嚴重危害公共衛(wèi)生健康的新發(fā)傳染病之一。目前，已從至少332種鳥體內(nèi)檢測到WNV感染，包括雀形目PASSERIFMES、雁形目ANSERIFMES、隼形目FALCONIFMES、雞形目GALLIFMES、鶚形目CAPRIMULGIFMES、鸚形目PSITTACIFMES等的種類。其中雀形目有129種鳥感染病毒，鴉科、雀科、森鶯科感染病毒鳥種數(shù)目較多；另一方面，目前報道有約80余種蚊蟲感染西尼羅病毒，其中大部分為庫蚊屬。我國地域遼闊，有大量的鳥類棲息地和候鳥越冬地，生態(tài)環(huán)境豐富，具備病毒自然循環(huán)所需的宿主、媒介和適宜的生境。由于WNV的媒介種類和動物宿主繁多，而作為擴散宿主的候鳥，具有長途遷徙的習性，存在WNV隨候鳥進入我國的途徑；此外，染毒家禽、鳥的合法和或非法貿(mào)易增加了WNV輸入的可能性；并且，國外研究證實能夠感染和傳播WNV的蚊蟲種類在我國也有廣泛的分布，其中國內(nèi)尖音庫蚊復合組主要成員、三帶喙庫蚊CLUEXTRITAENIHYNCHUS、白紋伊蚊AEDESALBOPICTUS和埃及伊蚊AEAEGYPTI作為WNV潛在媒介已得到證實，一定程度上增加了中國出現(xiàn)WNV暴發(fā)的風險。以往的血清學調(diào)查結果表明我國人群和鳥體內(nèi)有WNV抗體存在，由于同屬的JEV在我國長期存在，而JEV和WNV之間存在一定的抗原交叉反應，鳥體內(nèi)的JEV抗體對WNV感染有無一定的保護作用，值得探討。本研究通過現(xiàn)場實驗研究蚊蟲對WNV潛在宿主的嗜血習性、自然界中潛在宿主和媒介攜帶病毒的檢測，并以WNV對經(jīng)乙腦疫苗免疫的來亨雞進行攻毒，模擬自然界中存在JEV抗體的鳥對WNV攻毒的敏感性，以此進行WNV潛在媒介、宿主和病毒相互作用的研究并分析其在病毒傳播循環(huán)中的作用，為制定針對WNV潛在媒介和宿主的有效防控策略提供依據(jù)。取得的主要結果如下1野外現(xiàn)場動物誘餌對蚊蟲的誘集研究在傍山鄉(xiāng)鎮(zhèn)現(xiàn)場，各種動物組與對照相比較，誘集到的淡色庫蚊CXPIPIENSPALLENS數(shù)量具有顯著性差異；家雞對淡色庫蚊的誘集效果較大白鼠、麻雀明顯要高SE均為5439，T值分別為0002和0006，而家鴿與家雞對淡色庫蚊的誘集效果無統(tǒng)計學意義SE為5439，T值為0057。多水系農(nóng)村現(xiàn)場動物誘餌組與對照相比較，誘集到的淡色庫蚊數(shù)量具有顯著性差異，家雞的誘集效果較大白鼠、家鴿、兔明顯要高F值為997661，P值為0000。同種蚊蟲在不同動物廄舍內(nèi)采集的數(shù)量存在顯著性差異F值為6950，P值為0000淡色庫蚊在綿羊圈中最多，而中華按蚊ANOPHELESSINENSIS、三帶喙庫蚊在奶牛圈中最多；同一動物廄舍采集的不同蚊蟲存在顯著性差異F值為17150，P值為0000奶牛圈中華按蚊、三帶喙庫蚊最多，豬圈中淡色庫蚊、三帶喙庫蚊最多，鴿舍中淡色庫蚊最多，綿羊圈中淡色庫蚊最多，雞圈中淡色庫蚊和和三帶喙庫蚊數(shù)量相當。2野外現(xiàn)場采集的吸血蚊胃血來源分析對現(xiàn)場采集的吸血蚊提取基因組DNA，以PCR擴增分析其胃血來源。淡色庫蚊、三帶喙庫蚊、中華按蚊、兇小庫蚊CXMODESTUS、騷擾阿蚊ARMIGERESSUBALBATUS、白紋伊蚊的胃血均只擴增到哺乳動物細胞色素B基因CYTB片段，未擴增到鳥CYTB片段。提示現(xiàn)場采集的吸血蚊只吸到哺乳動物血液，而未吸到鳥類血液。3野外現(xiàn)場采集蚊蟲、野鳥血和雞血的病毒檢測對采自野外現(xiàn)場的蚊蟲、野鳥血和雞血進行的西尼羅病毒、乙腦病毒、西方馬腦炎病毒的RTPCR檢測表明除有2只普通朱雀檢測到西尼羅病毒陽性片段外，淡色庫蚊、三帶喙庫蚊、中華按蚊、兇小庫蚊、騷擾阿蚊、白紋伊蚊、雞血樣和其余20種野鳥67份血樣均未檢測到西尼羅病毒陽性片段；所有蚊蟲、野鳥血、雞血樣均未檢測到乙腦病毒、西方馬腦炎病毒的陽性片段。RTPCR陽性的2只普通朱雀組織中未能檢測到西尼羅病毒抗原陽性；西尼羅病毒抗體檢測的鳥血樣為陰性。檢測到的WNV陽性片段序列經(jīng)同源性比較，提示為WNV核酸片段。對這3個核酸片段的序列分析表明它們與西尼羅病毒CHIN01株同源性最高973％100％，與EG101株、NY99株、TEXAS株和ENTHAN株同源性較高96％99％；支序圖表明它們與上述WNV株起源可能相同，起源于EG101株。4乙腦疫苗對西尼羅病毒攻毒來亨雞的保護作用用乙腦疫苗免疫后28天的來亨雞均可產(chǎn)生乙腦抗體180，用染毒W(wǎng)NV白紋伊蚊叮咬免疫后來亨雞，32只雞有7只2188％血液中可檢測到WNV陽性片段；經(jīng)皮下直接接種西尼羅病毒攻毒免疫后來亨雞，11只雞中有2只1818％血液可檢測到WNV陽性片段，表明人工免疫產(chǎn)生的乙腦抗體來亨雞可以出現(xiàn)病毒血癥，仍有可能被WNV感染。

簡介：點擊查看更多苦參堿抗巨細胞病毒的活性及機制的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號學號學號D201078210學校代碼學校代碼10487密級密級博士學位論文HBV/HCV相關肝細胞癌根治后抗病毒治療基于隨機對照試驗的系統(tǒng)評價學位申請人學位申請人孫平學科專業(yè)學科專業(yè)普通外科普通外科指導教師指導教師鄭啟昌鄭啟昌教授教授答辯日期答辯日期2013年5月協(xié)和醫(yī)院的圖標協(xié)和醫(yī)院的圖標（該圖片免費領取）

簡介：為了觀察解毒化瘀宣肺湯治療病毒性肝炎高膽紅素血癥的臨床療效對90例病毒性肝炎高膽紅素血癥患者進行臨床觀察結果表明解毒化瘀宣肺湯組總有效率為9333﹪優(yōu)于對照組解毒化瘀湯及茵梔黃總有效率80﹪、6333﹪而且該方能顯著改善病毒性肝炎高膽紅素血癥的臨床癥狀能明顯的降低膽紅素、膽汁酸及升高總蛋白和白蛋白降低血清肝纖維化指標CG、HA、PCⅢ、LN能縮短凝血酶原時間、提高凝血酶原活動度同時能降低內(nèi)毒素及IL1Β、TNFΑ為了進一步證實解毒化瘀宣肺湯退黃的療效通過解毒化瘀宣肺湯對異硫氰酸Α萘酯ANIT致大鼠急性肝損傷模型的作用觀察結果表明解毒化瘀宣肺湯能顯著降低實驗大鼠的血清膽紅素及膽汁酸降低內(nèi)毒素及Α腫瘤壞死因子通過光鏡觀察解毒化瘀宣肺湯還能抑制肝損傷

簡介：目的研究先天性巨細胞病毒（CMV）感染患兒外周血CMV病毒負荷對機體TH細胞功能的影響方法對2001年1月至2001年12月住院足月新生兒用熒光定量PCR（FQPCR）定量測定外周血CMVDNA31例結果陽性定為感染組選取感染組同期非感染新生兒檢測外周血VMCDNA及抗CMVIGM均陰性者29人為對照組對兩組患兒應用ELISA法檢測白細胞介素2（IL2）及Γ干擾素（IFNΓ）水平用單細胞內(nèi)染色法檢測THTH百分率并于四周后復查結果分別進行對照分析結論先天性CMV感染時機體TH細胞數(shù)量及功能低下THTH值下降THTH極化異常導致細胞毒性T細胞（CTL）介導的細胞免疫功能抑制而這種抑制與機體病毒負荷有一定關系

簡介：戊型肝炎HEPATITISEHE是由HE病毒HEPATITISEVIRUSHEV引起的一種經(jīng)糞口途徑傳播的急性傳染病呈全球分布是世界各地尤其發(fā)展中國家主要的健康問題之一成為了繼甲型肝炎外另一種經(jīng)腸道傳播的嚴重危害人類健康的病毒性肝炎給社會帶來了很大的危害。根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生部27種法定報告?zhèn)魅静∫咔閳蟾娼y(tǒng)計HE發(fā)病率高死亡率高呈逐年上升趨勢。近年來發(fā)現(xiàn)在豬等動物中也有廣泛的HEV感染使該病成為一種人畜共患病。目前HE已被世界重視世界衛(wèi)生組織將其認定是發(fā)展中國家的一個重要公共衛(wèi)生問題。目前HE的檢測方法主要有免疫電鏡技術IEM、聚合酶鏈反應PCR、酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA和原位雜交。但HEV感染窗口期、患者自身免疫系統(tǒng)以及檢測方法等多方面因為給戊肝的診斷帶來了難度。因而有必要尋找一種高效、高通量和快速的HEV檢測方法?；蛐酒夹g是上世紀90年代興起源于計算機集成化芯片理念的一門新技術。實質(zhì)就是利用SOUTHERNBLOT原理在固相支持物的表面原位合成寡核苷酸探針或者直接將大量DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面這些被固定在基質(zhì)的探針上就形成了高密度DNA微陣列。樣品DNA或RNA經(jīng)過熒光標記與陣列上的探針進行雜交反應按照堿基互補配對原則探針特異性地結合相應被熒光標記的分子。通過對雜交信號的檢測分析得出樣品的基因序列及其表達的信息從而對基因序列及功能進行大規(guī)模、高通量、平行的研究。近幾年基因芯片技術越來越多的被應用于病原體的診斷如用基因芯片檢測痘苗病毒、皰疹病毒以及乙型肝炎病毒但是關于基因芯片在戊型肝炎病毒方面的檢測還未見諸文獻。因此本文立足于制備戊型肝炎病毒的檢測芯片初步探討該方法的可行性為進一步將基因芯片技術應用于各型肝炎病毒的檢測建立一個技術平臺。本課題分為兩個部分具體研究結果如下一探針的設計與芯片的雜交首先對戊型肝炎寡核苷酸芯片進行了探針設計以及芯片的雜交。根據(jù)GENEBANK數(shù)據(jù)庫中的全基因組序列信息利用美國國家生物技術信息中心NCBI提供的BLAST分析軟件找出HEV的保守序列采用生物學軟件OLIGO60設計60MER寡核苷酸探針并對其進行BLAST比對采用了嚴格的遴選標準為了保證設計的探針具有高度的特異性和靈敏度設計時遵循以下原則使探針TM值在85±5℃之間GC含量介于40％60％重復的單一堿基連續(xù)不超過5個探針分子最穩(wěn)定二級結構配對堿基長度少于6BP且探針內(nèi)部發(fā)夾結構不超過5個。在BLAST比對中與其它基因的同源性小于70％連續(xù)相同堿基的數(shù)量不超過18個從中篩選出特異性高的24條作為檢測用探針。寡核苷酸探針合成和純化后用芯片打印儀固定在玻片上。運用限制性顯示RD技術用CY3標記的通用引物標記質(zhì)粒樣品首先以SAU3AI對DNA或CDNA樣品進行限制性酶切得到許多大小適合的限制性酶切片段繼而在片段兩端加上合適的接頭再利用帶有熒光標記的通用引物CY3U1進行樣品標記然后與芯片進行雜交。雜交后清洗玻片并干燥以GENEPIX4110B對芯片進行掃描分析各探針的雜交信號強弱并結合GENEPIXPRO60軟件來對結果進行分析。二芯片的優(yōu)化與臨床樣品的檢測其次進行了芯片的優(yōu)化以及臨床樣品的檢測。為了提高芯片的特異性和靈敏度我們對探針濃度、片基的放置時間、樣品濃度等雜交條件進行了初步研究。結果表明探針濃度在05123ΜGΜL四種濃度下和熒光標記的樣品進行雜交在同等的雜交環(huán)境和芯片掃描參數(shù)條件下四組探針信號強度之間存在顯著的統(tǒng)計學差異表現(xiàn)為05與1ΜGΜL濃度之間的差異具有顯著性而探針濃度1與2ΜGΜL1與3ΜGΜL2與3ΜGΜL之間則無明顯的統(tǒng)計學差異。同時片基的放置時間對芯片的雜交結果也有一定影響制備芯片上的探針熒光信號在30天和60天放置后沒有明顯的熒光信號衰減差異但是放置90天后芯片上的探針顯示出了一些局部信號的減弱。其次從樣品濃度的分析結果來看在1061011COPYML之間的樣品濃度線性程度較好R09913。因此通過實驗我們認為樣品濃度在105COPYML為稀釋的最低濃度水平在實驗取樣時的樣品濃度不應低于此水平。在通過芯片的初步篩選后確定了11條探針并將制備的戊型肝炎寡核苷酸基因芯片初步應用于小規(guī)模的臨床樣品檢測。由廣州市傳染病醫(yī)院提供9例臨床樣品5例臨床初篩陽性患者血清樣品3例臨床排除及1例正常人血清樣品采用戊型肝炎寡核苷酸基因芯片對樣品分別予以實驗檢測同時運用逆轉(zhuǎn)錄PCRRTPCR對芯片的實驗結果進行平行檢測。其方法是從臨床樣品的血清中抽提出病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄后用RD標記使樣品標上熒光物質(zhì)然后與篩選出來的11條高靈敏度高特異性的HEV寡核苷酸探針、1條陽性對照探針、1條陰性探針以及1條空白探針進行雜交芯片洗脫掃描后采用GENEPIXPRO60軟件進行結果分析。同時實驗中運用RTPCR的方法分別針對不同基因型的戊型肝炎病毒進行鑒定并與芯片檢測的結果相對照。雜交結果表明芯片的特異性和靈敏度較高陰性對照和陽性對照在芯片上均發(fā)揮著較為可靠的檢測功能。同時基因芯片的結果避免了假陽性和假陰性和窗口期結果無法檢測等因素的影響為戊型肝炎的早期診斷提供了一種較為有效的檢測手段。綜上所述本研究自行設計制備了戊型肝炎寡核苷酸芯片并用于實驗條件的優(yōu)化和臨床樣品的檢驗。結果表明HEV寡核苷酸芯片的特異性和靈敏度均較好為臨床HEV寡核苷酸檢測芯片的研制提供了理論基礎和實驗驗證可望對早期戊肝流行的快速診斷和預防做出貢獻。

簡介：蘇州大學碩士學位論文人博卡病毒在蘇州地區(qū)兒童急性呼吸道感染中的地位姓名王美娟申請學位級別碩士專業(yè)小兒呼吸科指導教師季偉20100401中文摘要人博卡病毒在蘇卅I地區(qū)兒童急性呼吸道感染中的地位因序列同源性均為98％左右。結論1蘇州地區(qū)部分兒童的呼吸道感染與HBOV有關。2全年均存在HBOV感染，在夏季陽性率逐漸增多，于秋冬季達到高峰。3HBOV引起的感染主要表現(xiàn)為下呼吸道感染。4單純HBOV與HBOV合并感染臨床表現(xiàn)無明顯差異。5HBOV的流行與肺炎支原體一致，與流感嗜血桿菌相反，與其它病毒的流行無相關性。6HBOV感染的臨床特征同RSV、HMPV相似，無特異性。關鍵詞博卡病毒；呼吸道感染兒童；偏肺病毒；呼吸道合胞病毒。H作者王美娟指導教師季偉

簡介：新疆醫(yī)科大學碩士學位論文認知行為療法治療顳下頜關節(jié)紊亂病的系統(tǒng)評價姓名梁秋娟申請學位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師劉海霞201104新疆醫(yī)科大學碩士學位論文新疆醫(yī)科大學碩士學位論文2EFFECTOFCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPYONTEMPOROMANDIBULARDISORDERSASYSTEMATICREVIEWPOSTGRADUATELIANGQIUJUANSUPERVISORASSOCIATEPROFLIUHAIXIAABSTRACTOBJECTIVETOEVALUATETHEEFFICACYOFCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPYCBTFORTEMPOROMANDIBULARDISORDERSTMDMETHODSPUBMED1990～2009,6,OVID1960～2009,6,EMBASE1974～2009,6,ANDCOCHRANECENTRALREGISTEROFCONTROLLEDTRIAL2009,CBM1978～2009,6,CNKI1994～2009,10WERESEARCHEDTOCOLLECTRANDOMIZEDANDQUASIRANDOMIZEDCONTROLLEDTRIALSQUALITYASSESSMENTANDDATAEXTRACTIONWEREPERFORMEDBYTWOREVIEWERSINDEPENDENTLYMETAANALYSISWILLBEPERFORMEDFORTHERESULTSOFHOMOGENEOUSSTUDIESBYTHECOCHRANECOLLABORATIONSSOFTWAREREVMAN50ANDTHEHETEROGENEOUSDATACONDUCTEDFORADESCRIPTIVEQUALITATIVEANALYSISRESULTSTHESEARCHSTRATEGYRESULTEDIN323STUDIES,OFWHICH5METTHEINCLUSIONCRITERIA,WITH3RANDOMIZEDCONTROLLEDTRIALSRCTSAND2QUASIRANDOMIZEDCONTROLLEDTRIALSQRCTTHEMETHODOLOGICALQUALITYVARIEDAMONGTHESTUDIES,2STUDIESASB,3STUDIESASCTHEQUALITYOFINCLUDEDSTUDIESWASNOTHIGHMETAANALYSISWASNOTPERFORMEDDUETOTHEAPPARENTHETEROGENEITY,SUCHASDIFFERENTTIMEOFTHERAPY,FOLLOWTIMEANDCONTROLGROUPSADESCRIPTIVEQUALITATIVEANALYSISWASPERFORMEDTHEEFFICACYOFCBTFORTMDWASNOTSUPERIORTOCONTROLGROUPTHEEFFICACYOFFOLLOWUPWASNOTUNCERTAINDUETODIFFERENTOUTCOMEINTHEINCLUDEDSTUDIESCONCLUSIONSONBASISOFCURRENTEVIDENCETHEEFFICACYOFCBTFORTMDWASNOTUNCERTAINTHUS,FURTHERDESIGNSTRICTANDHIGHQUALITYCLINICALTRIALAREREQUIREDTOPROVIDEMORERELIABLEEVIDENCEKEYWORDSTEMPOROMANDIBULARDISORDERSCOGNITIVEBEHAVIORALTHERAPYSYSTEMATICREVIEWRANDOMIZEDCONTROLLEDTRIALQUASIRANDOMIZEDCONTROLLEDTRIAL

簡介：汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文粵東地區(qū)喘息性疾病患兒中人類偏肺病毒的檢出及其N蛋白編碼基因的序列分析ISOLATIONTHESEQUENCEANALYSISOFTHENGENESISOLATIONTHESEQUENCEANALYSISOFTHENGENESOFHUMANMETAPNEUMOVIRUSINCHILDRENWITHWHEEZINGINEASTGUANGDONGOFHUMANMETAPNEUMOVIRUSINCHILDRENWITHWHEEZINGINEASTGUANGDONG專業(yè)專業(yè)名稱兒科學名稱兒科學學位申請人林創(chuàng)興學位申請人林創(chuàng)興導師林廣裕師林廣裕主任主任汕頭大學醫(yī)學院2008年5月中國汕頭1汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文I摘要摘要目的目的了解粵東地區(qū)喘息性疾病患兒的病原體中是否存在人類偏肺病毒HUMANMETAPNEUMOVIRUS，HMPV并分析其N蛋白編碼基因的特征，同時探討其感染的臨床特征，為臨床防治小兒喘息性疾病提供病原學基礎實驗依據(jù)。材料與方法材料與方法材料材料選取2006年6月1日至2007年6月1日期間因喘息性疾病收住院治療的2歲以下患兒（240例），采集其鼻咽吸取物或咽試子以供病毒學檢測之用，并收集其年齡、性別、癥狀、體征等臨床資料以供分析研究；同時采集同時期健康體檢兒童（100例）的咽試子作為對照研究。方法方法1應用多重PCR篩查呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒ADV，流感病毒A型，B型（IVA，B），副流感病毒1型，3型PIV1，3，鼻病毒（RV），博卡病毒（HBOV）。2應用針對HMPV的N蛋白基因的RTPCR引物進行HMPV基因片段檢測，隨機選取6份RTPCR擴增陽性產(chǎn)物進行核苷酸序列測定。將所測序列與GENBANK中公布的基因序列進行比較分析，通過生物信息學方法對測定的人偏肺病毒基因片段進行進化分析分析與其它地方病毒株的同源性。同時對HMPVN蛋白基因陽性病例的臨床資料進行分析。結果結果11240份小兒喘息性疾病呼吸道標本中，病毒陽性101份（42％），單一病毒感染86份（85％），混合感染15例占15；檢出病毒中以RSV占首位，41例占41，其次遞減為PIV318例占18，RV17例占17IVA16例占16，PIV113例占13，HMPV12例占12，ADV5例占5HBOV4例占4，未檢測到IVB。22240份標本中HMPV陽性率為5％（12240），在其他病毒陰性標本中陽性率為79（其中2例與其他病毒混合感染，分別與ADV和RV），其中3、4月份為發(fā)病高峰。陽性患兒均為年齡較小的患兒。6份HMPV陽性標本目標基因部分核苷酸序列與GENBANK中公布的多株HMPVN基因同源性為808％～984％。核苷酸序列基因進化樹分析顯示存在2種

簡介：荔枝核作為常用的中草藥之一，主要用于治療與肝臟相關的疾患。其化學成分包括皂苷、蒜質(zhì)和脂肪酸等多種物質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn)，荔枝核黃酮類提取物對HEPG2215細胞培養(yǎng)上清液中的乙型肝炎表面抗原HBSAG，乙型肝炎E抗原HBEAG以及細胞外HBVDNA有明顯的抑制作用；那么作為荔枝核主要化學成分之一的皂苷，是否同樣具有抗HBV的作用，目前尚未見文獻報道。轉(zhuǎn)基因HEPG2215細胞株載有HBV全基因組，能夠進行病毒復制并穩(wěn)定分泌感染性病毒顆粒及HBSAG和HBEAG，因此被廣泛用于抗病毒藥物的篩選和療效評價。我們以HEPG2215細胞作為靶細胞，采用MTT比色法觀察不同濃度荔枝核總皂苷對細胞的毒性作用；并分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA和熒光定量聚合酶鏈式反應PCR的方法測定細胞培養(yǎng)上清中HBSAG，HBEAG及細胞外HBVDNA的含量，以此評價荔枝核總皂苷體外抗HBV的作用?，F(xiàn)報告如下實驗一HEPG2215細胞株培養(yǎng)體系的建立目的使HEPG2215細胞正常生長，為其后荔枝核總皂苷的藥物干預實驗做準備。方法分為細胞復蘇、細胞培養(yǎng)、細胞傳代、細胞凍存四個步驟。結果細胞復蘇后三周內(nèi)生長速度較緩慢，但傳代后生長狀態(tài)良好，可用于藥物干預實驗。實驗二細胞培養(yǎng)上清液中HBSAG和HBEAG分泌曲線的繪制目的觀察HEPG2215細胞培養(yǎng)上清液中HBSAG和HBEAG的分泌情況。方法HEPG2215細胞經(jīng)傳代培養(yǎng)，在其貼壁后1～6D分別收集細胞培養(yǎng)上清液，－20℃保存，統(tǒng)一檢測。使用ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液中的HBSAG和HBEAG，顯色反應后，酶標儀讀取A450NM值，繪制分泌曲線。結果HEPG2215細胞在貼壁后1～6D，其培養(yǎng)上清液中的HBSAG和HBEAG通過酶標儀所測的A450NM值逐漸增大，分泌曲線呈現(xiàn)逐漸上升趨勢。實驗三藥物對細胞的毒性實驗目的觀察不同濃度荔枝核總皂苷對HEPG2215細胞的毒性作用。方法荔枝核總皂苷配制成08，04，02，01，005，0025，00125，000625GL共8個濃度梯度，拉米夫定配制成025GL；HEPG2215細胞以1107個L接種于96孔培養(yǎng)板，細胞貼壁后各藥物濃度組換入相應濃度含藥培養(yǎng)液，陰性對照組換入正常培養(yǎng)液。于加藥D6吸去上清液，每孔加5GLMTT20ΜL，37℃孵育4H，棄上清液后每孔加入DMSO150ΜL，震蕩10MIN，測A490NM值；通過公式計算細胞抑制率和半數(shù)中毒濃度TC50。結果荔枝核總皂苷的08，04，02，01，005，0025，00125，000625GL組對細胞的抑制率分別為537％，393％，261％，127％，111％，82％，61％，42％，荔枝核總皂苷的TC50為067GL；025GL拉米夫定組對細胞的抑制率為434％。在此實驗中，0025GL荔枝核總皂苷組對細胞的抑制與陰性對照組差異無統(tǒng)計學意義P005；04GL荔枝核總皂苷組和025GL拉米夫定組在細胞毒性上差異無統(tǒng)計學意義P005。實驗四細胞培養(yǎng)上清液中HBSAG和HBEAG的測定目的觀察不同濃度荔枝核總皂苷對HEPG2215細胞培養(yǎng)上清液中HBSAG和HBEAG的影響。方法使用ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液中的HBSAG和HBEAG，顯色反應后，酶標儀讀取A450NM值；通過公式計算抗原抑制率和50％藥物抑制濃度IC50。結果荔枝核總皂苷各濃度實驗組相對于陰性對照組，其所測A450NM值均降低，且隨著藥物濃度的增加，培養(yǎng)時間的延長，降低愈明顯。0025GL荔枝核總皂苷組在D6細胞培養(yǎng)上清液中的HBSAG和HBEAG與陰性對照組差異有顯著統(tǒng)計學意義P實驗五細胞培養(yǎng)上清液中HBVDNA的測定目的觀察不同濃度荔枝核總皂苷對HEPG2215細胞培養(yǎng)上清液中HBVDNA的影響。方法按照TAQMANHBV核酸擴增熒光檢測試劑盒說明書操作。引物序列為P15’ATCCTGCTGCTATGCCTCATCTT3’；P25’ACAGTGGGGGAAAGCCCTACGAA3’；熒光探針序列為5’GGCTAGTTTACTAGTGCCATTTG3’。反應結束后由計算機自動分析出HBVDNA定量結果，計算HBVDNA抑制率和50％藥物抑制濃度IC50。結果荔枝核總皂苷各濃度實驗組相對于陰性對照組，所測拷貝量均降低，且隨著藥物濃度的增加，培養(yǎng)時間的延長，降低愈明顯。0025GL荔枝核總皂苷組在D6細胞培養(yǎng)上清液中的HBVDNA含量與陰性對照組差異有顯著統(tǒng)計學意義P結論1、HEPG2215細胞能向培養(yǎng)上清液中穩(wěn)定地分泌HBSAG和HBEAG，其分泌量隨著細胞培養(yǎng)時間的延長而逐漸增加。2、荔枝核總皂苷對HEPG2215細胞的毒性較小，TC50為067GL，但隨著藥物濃度的提高，其毒性作用逐漸增加。3、荔枝核總皂苷的不同濃度對HEPG2215細胞培養(yǎng)上清液中HBSAG和HBEAG的分泌均有一定的抑制作用，且隨藥物濃度的增加、作用時間的延長，抑制也隨之增強。4、荔枝核總皂苷的不同濃度均能有效降低HEPG2215細胞培養(yǎng)上清液中的HBVDNA含量，且隨藥物濃度的增加、作用時間的延長，其作用效果越明顯。5、荔枝核總皂苷在體外具有抗HBV的作用；而且從治療指數(shù)來看，屬于有效低毒藥物。

簡介：自明晰化概念提出以來，翻譯中的明晰化現(xiàn)象一直備受翻譯研究者關注。學者們對明晰化概念的定義和分類等問題，從各自的研究角度出發(fā)，推動了明晰化現(xiàn)象的深入發(fā)展。但是，以往的明晰化研究存在一定弊端，即過分關注具體的翻譯策略和實現(xiàn)明晰化的語言手段，從而與明晰化的本質(zhì)認識相混淆。明晰化涉及的一個關鍵問題是，原文中隱含的信息是如何具備被譯文顯化表達的這樣一種潛在可能。認知語言學為這一問題的深入研究提供了深刻見解和新的視角。本文基于LANGACKER的識解運作模型，為探究明晰化構建了理論框架，并運用此框架對文心雕龍及其英文譯本中的明晰化現(xiàn)象進行了比較研究。本研究框架選取了識解運作中的三個維度詳略度（SPECIFICITY）、調(diào)焦FOCUSING、突顯PROMINENCE。譯者在翻譯過程中，針對原文某個表達方式所涉及的某個（或多個）識解維度做出改變，如果這一改變使得該表達方式在重構之后的譯文中顯化程度提高，則視為明晰化現(xiàn)象發(fā)生。對應識解的三個維度有三種方式能夠提高顯化程度識別細節(jié)（提升詳度），辨認背景（改變調(diào)焦），給予特寫（調(diào)整突顯）。本文旨在探究明晰化現(xiàn)象在文心雕龍英譯本中的存在和分布情況，找出由改變識解維度而引起的不同類型的明晰化轉(zhuǎn)換，以及譯者選擇這種轉(zhuǎn)換的動機。通過定量與定性分析，作者識別出三種類型的明晰化現(xiàn)象并計算出它們各自所占的比例。改變調(diào)焦的明晰化現(xiàn)象FOCUSINGALTERINGEXPLICITATION通過把原文中背景化的轄域前景化來實現(xiàn)調(diào)整突顯的明晰化現(xiàn)象PROMINENCEADJUSTINGEXPLICITATION通過對前景化轄域中的某一特定成分進行側(cè)顯來實現(xiàn)提升詳度的明晰化現(xiàn)象SPECIFICITYENHANCINGEXPLICITATION通過添加具體細節(jié)來實現(xiàn)，在這里，增加的信息特指新信息，即原文中沒有涉及、但客觀存在的背景信息或百科知識。譯文中三大類型的明晰化轉(zhuǎn)換又可根據(jù)其具體的譯者動機得到進一步的定義和分類，大致如下1通過改變調(diào)焦的明晰化現(xiàn)象，譯者主要希望提供獲取隱喻意義、象征意義和隱含概念內(nèi)容的直接渠道2通過調(diào)整突顯的明晰化現(xiàn)象，譯者根據(jù)個人傾向來突出某個特定成分，或強調(diào)某兩事物之間的潛在關系，或顯示某個動作的路徑3通過提升詳度的明晰化現(xiàn)象，譯者則有意輔助讀者理解原文中出現(xiàn)的某些文化負載表達方式，比如歷史事件、文學作品、典故或成語等。通過這些不同種類明晰化現(xiàn)象分布的比例，我們大致可以看出，譯者傾向于在概念層面做出轉(zhuǎn)換，而對于增補新信息則有所節(jié)制。本文從認知語言學的角度對文心雕龍及其英譯文進行了比較研究，希望能夠在更為抽象的層次上證明識解運作對于明晰化研究的應用性和有效作用。

簡介：目的丙型肝炎病毒HEPATITISCVIRUS，HCV感染可引起肝臟急慢性炎癥，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球約有18億人感染HCV，其中約有4250萬感染者在中國。約有20％30％的HCV感染者在急性期可以自發(fā)清除病毒，而大部分HCV感染者轉(zhuǎn)化為慢性丙型肝炎（CHRONICHEPATITISC，CHC），其中30％CHC患者可進展為肝硬化，而且CHC患者發(fā)生肝細胞癌的機會為正常人的2030倍。因此CHC已成為值得關注的全球性公眾健康問題，迫切需要有效的抗病毒治療方案。干擾素INTERFERON，IFN是機體細胞在受到某些病毒感染后所分泌的一類特異性細胞因子，具有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及抗細胞增殖等多種生物學活性，根據(jù)IFN的氨基酸序列和生物學活性可分為三類Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。Ⅰ型INF包括IFNΑ、IFNΒ、IFNΕ、IFNΚ、IFNΔ和IFNΖ等，其中IFNΑ為臨床上應用比較廣泛的抗病毒藥物之一Ⅱ型INF僅有1種為IFNΓⅢ型INF即IFNΛ，包括IFNΛ1IL29、IFNΛ2IL28A和IFNΛ3IL28B。目前標準的抗HCV治療方案為聚乙二醇化干擾素ΑPEGYLATEDINTERFERONΑ，PEGIFNΑ聯(lián)合利巴韋林RIBAVIRIN，RBV，治療4周時HCVRNA轉(zhuǎn)陰HCVRNA＜1000IUML為快速病毒學應答RAPIDVIROLOGICRESPONSE，RVR，若治療治療4周時HCVRNA仍為陽性至治療12周時HCVRNA轉(zhuǎn)陰HCVRNA＜1000IUML為早期病毒學應答ERALYVIROLOGICRESPONSE，EVR。已有研究證實RVR和EVR能很好的預測持續(xù)病毒學應答SUSTAINEDVIROLOGICALRESPONSE，SVR即治療結束24周HCVRNA小于1000IUML，其中獲得RVR的患者約88％100％可獲得SVR，一旦達到SVR，99％以上可以維持病毒學應答5年甚至更久。但并不是所有丙型肝炎患者都可以獲得滿意的抗病毒療效，影響抗病毒療效的因素有病毒因素（如HCV基因型、基線病毒載量等）、藥物因素（如IFNΑ種類、IFNΑ和RBV有明顯的血液學和神經(jīng)系統(tǒng)抑制等不良反應、IFNΑ藥代動力學特點等）、宿主因素如對IFNΑ耐受性不佳、免疫應答狀態(tài)、IL28B單核苷酸基因多態(tài)性SINGLENUCLEOTIDEPOLYPHISM，SNP等。近幾年一系列全基因組關聯(lián)分析研究報道了丙型肝炎患者的IL28BSNP不同位點的基因型RS12979860、RS8099917、RS12980275與抗病毒治療應答密切相關，攜帶保護性基因型的丙型肝炎患者自發(fā)清除病毒、獲得SVR的機率比攜帶非保護基因型的患者高，同時發(fā)現(xiàn)攜帶保護性基因型的丙型肝炎患者血清中的IL29、IL28A、IL28B水平和外周血單核細胞PERIPHERALBLOODMONONUCLEARCELLSPBMCS中的IL29MRNA、IL28AMRNA、IL28BMRNA水平均高于攜帶非保護性基因型的患者，丙型肝炎患者血清中IL29水平低于正常人、而IL28A水平高于正常人，丙型肝炎患者肝組織中IL28AMRNA和IL29MRNA的表達高于正常人。已有研究證實，IFNΛ與IFNΑ的結合受體及分布不同，但它們可以通過相同的信號傳導通路，傳導活化信號、誘導一系列干擾素激活基因的表達，IFNΛ與IFNΑ可協(xié)同發(fā)揮抗病毒作用。上述研究表明，丙型肝炎患者IL28BSNP與抗病毒治療療效密切相關，丙型肝炎患者體內(nèi)IFNΛ水平與抗病毒治療療效可能有相關性。已有研究證實，RV和EVR可以很好的預測SVR，其中RVR能更好的預測SVR，本研究根據(jù)患者應用IFNΑ治療4周時HCVRNA是否轉(zhuǎn)陰分為快速病毒學應答RVR組和非快速病毒學應答NRVR組，旨在探討丙型肝炎患者體內(nèi)IL28BRS12979860基因型、IFNΛ水平與其應用IFNΑ抗病毒治療獲得RVR是否有相關性及其臨床意義。方法選取丙型病毒性肝炎患者45例，根據(jù)患者應用IFNΑ治療4周時HCVRNA是否轉(zhuǎn)陰HCVRNA＜1000IUML分為快速病毒學應答RVR組21例和非快速病毒學應答組NRVR組24例，另外設健康對照組NMAL組15例。1病毒學指標檢測應用微粒子酶聯(lián)免疫法檢測抗HCV，采用熒光定量聚合酶鏈反應法檢測HCVRNA水平。2收集血清，應用ELISA法檢測血清中IL29、IL28A、IL28B的水平。3收集新鮮外周抗凝血，用密度梯度離心法分離收集PBMCSTRIZOL法抽提提取PBMCS中的總RNA，應用RTPCR法檢測PBMCS中IL29、IL28A、IL28B的MRNA相對表達水平提取PBMC中總蛋白，應用WESTERNBLOT法檢測外周血PBMC中IL29、IL28A和IL28B蛋白表達水平。4留取丙型肝炎患者外周含EDTA抗凝全血，提取DNA，應用TAPMANMGB蛋白探針法檢測IL28BRS12979860基因型。結果1血清中IL29、IL28A和IL28B的表達水平11健康對照組血清中IL29、IL28A、IL28B的水平分別為1178±078、26813±982、26726±826。12丙型肝炎患者在干擾素Α治療前（0周）血清中IL29、IL28A、IL28B的水平RV組分別為1332±134、27311±878、29367±738NRVR組分別為1058±144、24305±948、25485±867。13丙型肝炎患者在干擾素Α治療4周時血清中IL29、IL28A、IL28B的水平RVR組分別為1290±104、28849±1350、30853±948NRVR組分別為1014±046、25353±437、24734±639。采用SPSS130軟件統(tǒng)計學處理以上結果得出RVR組血清中IL29、IL28A、IL28B的水平在治療前、治療4周時均明顯高于NRVR組，P＜001差異有統(tǒng)計學意義TABLE1而健康對照組處于RVR組和NRVR組之間，其中IL28B的水平明顯低于RVR組、高于NRVR組，P＜001，差異有統(tǒng)計學意義TABLE1丙型肝炎患者在干擾素Α治療前與治療4周血清中IL29、IL28A、IL28B的水平變化不大。2將PBMCS中GAPDH的表達量設定為100，與GAPDH表達量相比，得出IL29、IL28A、IL28B的MRNA相對表達水平21健康對照組PBMCS中IL29、IL28A、IL28B的MRNA表達水平分別為076±002、068±002、070±002。22丙型肝炎患者在干擾素Α治療前0周PBMCS中IL29、IL28A、IL28B的MRNA表達水平RVR組分別為080±002、079±002、072±002NRVR組分別為071±002、065±002、068±001。23丙型肝炎患者在干擾素Α治療4周時PBMCS中IL29、IL28A、IL28B的MRNA表達水平RVR組分別為080±002、079±001、074±002NRVR組分別為070±001、064±001、066±001。采用SPSS130軟件統(tǒng)計學處理以上結果得出RVR組PBMCS中IL29、IL28A、IL28B的MRNA表達水平在治療前、治療4周時均明顯高于NRVR組，P＜001，差異有統(tǒng)計學意義TABLE2而健康對照組處于RV組和NRVR組之間，其中IL28A的MRNA表達水平低于RVR組，P＜001，差異有統(tǒng)計學意義TABLE2丙型肝炎患者在干擾素Α治療前與治療4周PBMCS中IL29、IL28A、IL28B的MRNA表達水平變化不大。3將PBMC中內(nèi)參ΒACTIN相對表達量設定為100，與ΒACTIN表達量相比較，得出IL29、IL28A、IL28B蛋白的表達水平31健康對照組PBMC中IL29、IL28A、IL28B蛋白的表達水平分別為067±012、058±013、070±011。32丙型肝炎患者在干擾素Α治療前（0周）PBMC中IL29、IL28A、IL28B蛋白的表達水平RVR組分別為073±001、069±003、（073±003）NRVR組分別為052±002、048±003、053±003。33丙型肝炎患者在干擾素Α治療4周時PBMC中IL29、IL28A、IL28B蛋白的表達水平RVR組分別為073±009、070±011、（077±009）NRVR組分別為055±009、050±010、057±009。采用SPSS130軟件統(tǒng)計學處理以上結果得出RVR組PBMCS中IL29、IL28A、IL28B蛋白表達水平在治療前、治療4周時均明顯高于NRVR組，P＜005，差異有統(tǒng)計學意義（見TABLE3）丙型肝炎患者在干擾素Α治療前與治療4周PBMC中IL29、IL28A、IL28B蛋白的表達水平變化不大。4IL28BRS12979860CC型丙型肝炎患者血清和PBMC中IL29、IL28A、IL28B水平明顯高于CT和TT型患者，P＜005差異具有統(tǒng)計學意義CT型患者血清和PBMC中IL29、IL28A、IL28B水平介于CC和TT型患者之間，其中血清中IL28B水平明顯高于TT型患者，PBMC中IL28AMRNA水平明顯高于TT型患者，P＜005差異具有統(tǒng)計學意義（見TABLE456）。5PEARSON卡方相關分析法分析三種IL28BRS12979860基因型與RVR率的關系，結果IL28BRS12979860CC基因型攜帶者獲得RVR率明顯高于CT、TT基因型攜帶者（見TABLE7）。6將丙型肝炎患者HCVRNA基線水平、HCV分型、IL28BRS12979860基因型、PBMC和血清中IL29、IL28A、IL28B水平等多種因素與IFNΑ抗病毒應答療效進行LOGISTIC回歸分析TABLE861通過向后逐步排除法，進入回歸方程的自變量為X3、X6、X12卡方檢驗，X232183，P＜001，回歸方程有統(tǒng)計學意義?；貧w方程LOGITP276294X3330X6658X12。62X3、X6、X12的LOGISTIC回歸系數(shù)反應對RVRNRVR的影響IL28BCC基因型對獲得RVR的優(yōu)勢比為506PBMC中IL28BMRNA水平每增加一個等級對獲得RVR的優(yōu)勢比為628PBMC中IL28B蛋白水平每增加一個等級對獲得RVR的優(yōu)勢比為1387。結論1丙型肝炎患者血清和PBMC中IL29、IL28A、IL28B的水平與RVR密切相關。2IL28BRS12979860CC基因型與RVR密切相關。3IL28BRS12979860CC基因型、PBMC中在基因和蛋白水平高表達的IL28B可能是RVR的預測因素。

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