簡介：流行性乙型腦炎是一種由日本腦炎病毒JAPANESEENCEPHALITISVIRUS，JEV通過蚊蟲等途徑傳播而感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病。蝙蝠作為JEV的宿主之一對該病毒的貯存和傳播起到重要作用。本研究目的在于，通過RTPCR的方法對信宜地區(qū)的蝙蝠是否攜帶乙腦病毒進行檢測，了解乙腦病毒在當?shù)仳鸱N群中的分布狀況，為以后的乙腦防治工作提供一定依據(jù)。2007年5月，在廣東信宜采集了包括棕果蝠ROUSETTUSLESCHENAULTI和犬蝠CYNOPTERUSBRACHYOTI2個物種在內(nèi)的73份蝙蝠腦組織樣本，其中果蝠63只；犬蝠10只。利用乙腦病毒特異性引物，用RTPCR的方法對蝙蝠樣本進行乙腦病毒檢測。實驗結果顯示，從信宜地區(qū)采集到的所有樣本均未檢測到乙腦病毒。

簡介：該研究以HRV的VP7基因為靶基因進行轉基因馬鈴薯疫苗研究建立了適于馬鈴薯品種臺灣紅轉化的植物轉基因體系獲得表達VP7基因的轉基因馬鈴薯在一系列分子生物學鑒定的基礎上進行了動物試驗證明了VP7在馬鈴薯中的表達具有免疫原性在動物血清中檢測到滴度為600的IGG表明誘導了體液免疫應答而糞便中檢測到高達1000滴度的IGA表明誘導了粘膜免疫應答進一步的體外病毒中和試驗表明IGA抗體具有中和效力驗證了以往試驗關于IGA是RV的主要保護作用的事實并表明轉基因植物疫苗是誘發(fā)IGA的有效形式結果表明VP7轉基因植物疫苗可以在體誘導系統(tǒng)免疫應答和局部免疫應答局部免疫應答所產(chǎn)生的特異性抗體主要為分泌型IGA在中和病毒方面IGA發(fā)揮了關鍵性作用這與以往的研究一致因此VP7轉基因植物疫苗是HRV感染的預防性疫苗的候選形式

簡介：新媒體時代的來臨，各方面的信息以數(shù)字化、多媒體化、智能化等方式進入了人們的視野。無論是信息意識還是信息獲取的方式渠道等方面都在發(fā)生著巨大的改變。大學生在這種信息環(huán)境之下如何提高信息獲取行為的效率是當今研究的熱點。因此本文決定用認知心理學理論對大學生信息獲取行為進行系統(tǒng)地理解與分析。第一章首先從認知心理學與信息獲取行為的研究背景出發(fā)，綜述了國內(nèi)外的研究現(xiàn)狀以及相關的理論與實踐意義，提出了本篇論文的主要內(nèi)容、研究方法與新意。第二章簡介了認知心理學與信息獲取行為的相關理論，并總結出兩種概念之間的聯(lián)系。第三章基于認知心理學理論，從認知因素、情感因素以及意動因素三個方面的認知心理因素，確定了信息用戶信息獲取行為的一些具體影響因素。第四章采用問卷調(diào)查和部分問題深入訪談的方法，并依據(jù)信息獲取過程的各個階段逐步設計了調(diào)查問卷，了解了行為特征，并證實了三方面的具體影響因素。第五章結合調(diào)查數(shù)據(jù)結論，提出基于大學生信息用戶主體與信息服務行業(yè)兩個視角的建議，以提升大學生信息獲取行為效率。第六章對全文進行總結梳理，歸納出研究重點與論文需改進不足之處。

簡介：目的本實驗通過對8名被試驚恐障礙癥狀的治療，進一步用元認知干預技術的觀點探討驚恐障礙形成的心理機制，驗證元認知干預技術治療驚恐障礙的有效性，以及情感組織者的運用對療效、療程及復發(fā)率的影響。方法將8名被試隨機分為實驗組和對照組，每組4人，實驗組的臨床放松訓練加入情感組織者，對照組在保證治療程序、治療時間等因素與實驗組相同基礎上，臨床放松訓練不加入情感組織者，實驗采用多基線實驗設計，通過對漢密爾頓焦慮量表HAMA、焦慮自評量表SAS和自編驚恐發(fā)作次數(shù)、情緒體驗得分問卷的數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析，對實驗假設進行驗證。結果8名被試接受元認知心理干預治療后，HAMA和SAS量表分數(shù)均發(fā)生質(zhì)變，降于焦慮臨界值之下，驚恐發(fā)作次數(shù)和情緒體驗得分降低至最佳水平，無驚恐發(fā)作癥狀出現(xiàn)，情緒體驗達到很好水平，回訪調(diào)查基本無復發(fā)狀況，愈后情緒狀態(tài)保持良好，其中，首次治療階段實驗組被試的各項指標均好于對照組。結論8名被試接受元認知心理干預治療后，HAMA量表分數(shù)和SAS量表分數(shù)均降于臨界值之下，驚恐發(fā)作次數(shù)和情緒體驗得分均達到最佳水平，說明元認知干預技術治療驚恐障礙有效；治療過程中是否加入情感組織者對兩組被試的首次治療階段而言，實驗組被試各項指標變化均好于對照組，第2次治療結束后，對照組各項指標變化繼續(xù)下降至最佳水平，說明情感組織者的運用對療效、療程和愈后防復發(fā)等對驚恐障礙的治療方面產(chǎn)生了積極的影響。

簡介：背景缺血性疾病通常由動脈狹窄或閉塞引起包括外周梗死性血管病、冠狀動脈梗死等。臨床上主要采用內(nèi)科藥物、血管成形術或外科搭橋術治療但仍然存在諸多問題例如介入后的再狹窄、旁路移植術后的血管再閉塞以及嚴重廣泛的彌漫性病變難于用上述傳統(tǒng)的三種方法治療等。因此必須尋求其它更有效的治療方法。“治療性血管新生THERAPEUTICANGIOGENESIS”治療缺血性疾病是近年來國內(nèi)外研究的一個熱點。治療性血管新生就是通過應用血管生長因子或其基因促進缺血組織的血管新生和側支血管形成使缺血得到改善的新的治療方法。近十余年來研究者們一直在尋找一種有效的刺激新生血管形成的基因。研究最多的是血管內(nèi)皮生長因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACTVEGF和成纖維細胞生長因子FIBROBLASTGROWTHFACTFGF。但研究資料卻顯示VEGF可導致新生血管不成熟、組織水腫、血管滲漏、炎癥反應重甚至可能促進動脈硬化進展及血管瘤形成等；FGF治療則與蛋白尿等有關。因此人們期望尋找一種能誘導生理功能完整的血管新生且安全的基因。人低氧誘導因子1ΑHYOOXIAINDUCIBLEFACT1ΑHIF1Α作為低氧或缺氧應答反應中“總開關”基因而日益受到重視。它可調(diào)控下游60多種與血管生長、血管張力、糖代謝、紅細胞生成及干細胞誘導分化等相關的基因包括血管內(nèi)皮生長因子VEGF及其受體FLT1血管生成素ANG124血小板衍生生長因子PDGF等。HIF1Α通過促進VEGF、ANG2、ANG4、PDGF等基因轉錄促進血管新生這些因子相互協(xié)同、相互影響有望生成生理功能完整的血管。但是在常氧狀態(tài)下HIF1Α容易降解主要與常氧狀態(tài)下HIF1Α氧依賴降解結構區(qū)域OXYGENDEPENDENTDEGRADATIONDOMAINODDDPRO564和PRO402發(fā)生羥基化導致其水解有關經(jīng)實驗研究突變其中任一位點的單突變型HIF1Α在常氧下都可以得到表達不過雙突變型HIF1Α則是近乎一種組成型表達；而ASN804突變則可以促進靶基因的轉錄。目前國內(nèi)外實驗證實將野生型或突變型HIF1Α基因通過腺病毒、質(zhì)?；蛘甙捳畈《镜容d體轉染可以促進鼠、兔等動物缺血肢體或心臟血管新生但涉及HIF1Α在活體表達的安全性評價則鮮見報道而重組腺病毒三突變型低氧誘導因子1Α在體實驗更是未見相關報道。因此本課題組前期已將HIF1Α的564、402、803三個位點聯(lián)合定點突變成功構建了腺病毒介導的三突變型HIF1ΑTRIPADHIF1ΑALA402ALA564ALA803使其在常氧下能夠穩(wěn)定高效表達；體外研究顯示ADHIF1ΑTRIP對HMVECS增殖效應較ADHIF1ΑNATURE強且HIF1Α蛋白表達水平高。本課題組在上述實驗的基礎上為進一步明確ADHIF1ΑTRIP應用于動物體內(nèi)表達是否安全將ADHIF1ΑTRIP轉染于兔急性后肢缺血模型中觀察其在動物體內(nèi)表達可能出現(xiàn)的毒副作用對其安全性進行初步評價為進一步進行與人類相似的靈長目動物實驗及臨床試驗提供依據(jù)。目的基因藥物治療時安全性和有效性同等重要為了深入研究ADHIF1ΑTRIP基因在動物體內(nèi)表達是否安全本課題將ADHIF1ΑTRIP轉染于兔急性后肢缺血模型中觀察其在動物體內(nèi)表達時可能出現(xiàn)的毒副作用對其安全性進行初步評價。方法第一部分將本課題組先前構建的重組腺病毒載體ADHIF1ΑTRIP、空腺病毒載體ADBLANK在HEK293A細胞內(nèi)大量擴增經(jīng)氯化銫密度梯度離心法純化終點稀釋法測定病毒滴度；提取純化后病毒DNA采用PCR法及基因測序?qū)θ蛔冃虷IF1Α基因信息進行鑒定。第二部分1、構建急性兔后肢缺血模型造模成功后即將模型兔隨機分3組每組6只分別為ADHIF1ΑTRIP組、ADBLANK組和生理鹽水NS組。分別以ADHIF1ΑTRIP201010PFU、ADBLANK201010PFU、和生理鹽水NS05ML肌注術側后肢骨骼肌。2、本實驗周期為28天。每天觀測各組實驗兔一般藥物反應；術前及術后7D、28D行血常規(guī)和肝腎功能檢測及心電圖檢查；動物觀察28D后全部處死均做大體解剖檢查肌肉、心、肝、肺、腎、睪丸等組織臟器是否有大體病變上述所有臟器均取材制作常規(guī)組織病理切片鏡檢。結果第一部分在HEK293A細胞內(nèi)擴增后獲得重組腺病毒ADHIF1ΑTRIP、空腺病毒載體ADBLANK純化后終點稀釋法測得的滴度分別為251012PFUML401012PFUML。重組腺病毒轉染HEK293A細胞后24H即可出現(xiàn)病變效應CPE。提取ADHIF1ΑTRIPDNAPCR檢測HIF1Α基因得到預期的380BP、460BP、214BP的目的片段且DNA測序結果正確符合動物實驗要求。第二部分在觀察期間各組動物精神、食欲良好大便成形尿液無渾濁體溫約在38℃。術后28D三組兔體重均有所增加無一動物死亡；心電圖檢查顯示三組兔均無心律失常發(fā)生P波、QRS波、T波、ST段無異常；血常規(guī)、肝腎功能檢測重復測量數(shù)據(jù)方差分析結果顯示血常規(guī)WBC計數(shù)在DAY0、DAY7和DAY28之間有顯著差異P11257P0000三個處理組間無顯著性差異F0500P0617且兩者不存在交互作用F0333P0969WBC計數(shù)在DAY7最高但在正常值范圍內(nèi)DAY28則下降至接近DAY0水平；ONEWAYANOVA結果顯示DAY0、DAY7、DAY28各組間WBC計數(shù)無顯著差異F0138P0872；F0273P0765；F0648P0537。肝功能AST、ALT值在DAY0、DAY7和DAY28之間有顯著差異F8525P0001；F25547P0000三個處理組間無顯著性差異F2752P0096；F0056P0946且ALT、AST值均不存在組別與時間點的交互作用F1238P0316；F2311P0081AST、ALT值均在DAY7最高但在正常值范圍內(nèi)DAY28則下降至接近DAY0水平；ONEWAYUNOVA結果顯示DAY0、DAY7、DAY28各組間AST值均無顯著差異F1484P0258；F1733P0210F1898P0184；DAY0、DAY7、DAY28各組間ALT值亦均無顯著差異F0612P0555；F2620P0127；F2297P0135。其余指標未見明顯異常各時間點間對比、各組間對比均無顯著差異P005同一時間點各組間對比亦無顯著差異P005。病理組織學檢查三組兔心、肝、肺、腎、睪丸、ADHIF1Α轉染部位肌肉色澤、體積正常；組織切片光鏡下觀察結構正常無明顯水腫無明顯炎性細胞侵潤未見癌細胞。結論第一部分本課題組先前構建的重組腺病毒載體ADHIF1ΑTRIP、空腺病毒載體ADBLANK擴增后獲得較高的滴度PCR法及基因測序鑒定符合預期目標為下一步進行動物實驗提供了保證。第二部分兔急性缺血模型局部一次性肌肉注射劑量為201010PFU的ADHIF1ΑTRIP無明顯毒副作用；ADHIF1ΑTRIP201010PFU應用于兔活體是相對安全的。

簡介：雞傳染性支氣管炎（INFECTIOUSBRONCHITISIB）是由傳染性支氣管炎病毒（INFECTIOUSBRONCHITISVIRUSIBV）引起的一種急性高度接觸性傳染病在世界范圍內(nèi)廣泛流行造成重大的經(jīng)濟損失IBV變異速度快血清型眾多各血清型間缺乏交叉保護能力防治困難1997年周繼勇等從以腺胃腫大為特征的病雞腺胃中分離到一株嗜腺胃IBV命名為IBVZJ971研究表明IBVZJ971S1基因與IBVH120同源性很高但組織嗜性迥然不同為了在分子水平上探討IBVZJ971組織嗜性改變的機理并為新型疫苗的研制起鋪墊工作我們克隆測序了IBVZJ971S基因并在大腸桿菌中表達了S基因同時還克隆測序了標準株H52S基因首次將IBVS基因插入原核表達質(zhì)粒并轉化大腸桿菌使IBV的S蛋白得到了完整的表達說明分子量較大的S基因可在原核細胞中表達這為進一步開展IBV結構蛋白及新型疫苗研究奠定了基礎

簡介：分類號R弓7；弓寸I密級單位代碼10114學號20050024腦電圖與病毒性腦炎預后的關系研究生程霞指導教師處苤趁塾握申請學位門類級別醫(yī)堂亟專業(yè)名稱袖經(jīng)痘堂研究方向痘痘所在學院箍二逝壓醫(yī)堂院2012年5月20日山西醫(yī)科大學碩士學位論文一目錄中文摘要I英文摘要Ⅲ中英文縮寫對照表一V言行三1日LJ舌1資料與方法2結果5討論。7結論9參考文獻一LO附錄13綜述17個人簡歷一24致謝25

簡介：目的比較慢性乙型病毒性肝炎（CHB）肝纖維化患者聲輻射力脈沖成像技術（ARFI）、瞬時超聲彈性成像（FIBROSCAN）及血清學診斷模型（FNS指數(shù)、FIB4、APRI）與肝臟肝纖維化病理分級的關系，初步探討無創(chuàng)診斷模型對CHB肝纖維化的診斷價值。方法161例確診為CHB患者，根據(jù)肝活檢病理分期結果分組無明顯肝纖維化組（S0、S1），明顯肝纖維化組（≥S2）、進展期肝纖維化組（≥S3），早期肝硬化組（S4）。每例患者在肝活檢的同期進行肝臟瞬時超聲彈性成像（FIBROSCAN）、脈沖聲輻射力成像（ARFI）檢查并且常規(guī)測量脾臟的厚度及門靜脈主干的內(nèi)徑大小，留取血液標本采用全自動生化分析儀進行血清總膽紅素（TB）、直接膽紅素（DB）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉肽酶（GGT）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、總膽固醇（CHOL）檢測，采用化學發(fā)光法進行肝纖四項（透明質(zhì)酸、III型前膠原、IV前膠原、層粘蛋白）測定，并根據(jù)血清學結果計算FNS指數(shù)、FIB4、APRI。比較無創(chuàng)診斷方法（ARFI、FIBROSCAN、FNS指數(shù)、FIB4、APRI）與肝臟病理的相關性，并根據(jù)受試者工作特征曲線分析無創(chuàng)診斷模型對肝纖維化的診斷價值。結果1、肝活檢標本平均長度為160MM，肝纖維化病理分期S0，N1610％；S1，N36（224）；S2，N23（142）；S3，N36（224）；S4，N50（31）。2、門靜脈主干（PV）內(nèi)徑，在明顯肝纖維化組、進展期肝纖維化組、早期肝硬化組明顯大于無明顯肝纖維化組（P3、ARFI、FIBROSCAN、FNS指數(shù)、FIB4、APRI與肝活檢病理分期均顯示了良好的相關性（P4、顯著性肝纖維化組中，F(xiàn)IBROSCANAUC0922與ARFIAUC0916、FNS指數(shù)AUC0868，三者的診斷性能最好，兩兩之間無顯著差別P005，其次依次為FIB4（AUC0814）、APRI（AUC0757）。5、進展期肝纖維化組中，F(xiàn)IBROSCANAUC0980與ARFIAUC0942的診斷性能最好，二者無顯著差別（P005），其次為FNS指數(shù)AUC0856與FIB4AUC0828，再次為APRIAUC0772。6、早期肝硬化組中，F(xiàn)IBROSCANAUC0947與ARFIAUC0974的診斷性能最好，二者差別不大（P005），均優(yōu)于FNS指數(shù)AUC0828、FIB4AUC0813、APRIAUC0802；FNS指數(shù)與FIB4、APRI的診斷性能差別不明顯（P005）。結論1、無創(chuàng)診斷影像學方法ARFI及FIBROSCAN對CHB各期肝纖維化分級具有較高的診斷價值，優(yōu)于血清學無創(chuàng)診斷模型。2、FNS指數(shù)、FIB4、APRI三種評估CHB肝纖維化的血清學無創(chuàng)診斷模型中，F(xiàn)NS指數(shù)的整體診斷價值最高。

簡介：目的觀察棉酚對2型糖尿病大鼠血糖、血脂、血皮質(zhì)酮水平的影響，探討11ΒHSD1、GR、BAX、BCL2、CASPASE3、AIF在2型糖尿病認知功能障礙中的機制及棉酚降血糖、降血脂、改善認知功能的作用及機制。方法雄性SD大鼠30只分成三組正常對照組10只、2型糖尿病對照組10只、棉酚干預組10只。后二組喂以高脂飼料飼料組成100％豬油，200％蔗糖，25％膽固醇，10％膽酸鹽，665％常規(guī)飼料一個月，誘發(fā)胰島素抵抗。糖尿病組、棉酚干預組大鼠在禁食12H后按30MGKG腹腔注射鏈脲佐菌素溶于01MMOLL枸椽酸緩沖液內(nèi)，PH40，注射后1周測空腹血糖，≥8MMOLL為模型成功。正常對照組腹腔注射等容積枸椽酸緩沖液。此后，棉酚干預組按15MGKG1D1劑量棉酚灌胃4周，從第5周起，按15MGKG劑量棉酚每周給予一次以維持劑量至第12周末。正常對照組與糖尿病對照組給予等容積的2％羧甲基纖維素灌胃，灌胃次數(shù)及時間同棉酚干預組。治療結束后，處死大鼠前，用MRIS水迷宮方法對大鼠行為學進行測試。禁食12小時后處死大鼠，觀測以下指標1生化檢測血糖、TC、TG、LDLC、HDLC水平。2ELISA法檢測血皮質(zhì)酮水平。3制作大腦皮層及海馬組織勻漿，提取總RNA，用半定量RTPCR方法觀察大鼠大腦皮層及海馬11ΒHSD1、GR基因的表達。4WESTERNBLOTTING免疫印跡方法檢測大鼠皮層及海馬組織11ΒHSD1、GR、BAX、BCL2、CASPASE3、AIF蛋白表達水平。5免疫組化方法測定11ΒHSD1、GR、BAX、BCL2、CASPASE3、AIF的蛋白表達水平。6電鏡、光鏡下觀察大鼠皮層及海馬組織結構的形態(tài)學改變。結果1血糖、血脂、血皮質(zhì)酮水平糖尿病組血糖、血皮質(zhì)酮、TC、TG明顯升高P＜001，LDLC明顯升高P＜005，HDLC明顯下降P＜005。經(jīng)棉酚干預后，血糖、血皮質(zhì)酮水平較糖尿病組明顯降低P＜001，TC、TG、LDLC水平較糖尿病組明顯降低P＜005，HDLC水平較糖尿病組有升高趨勢，但無顯著性差異。2大腦皮層及海馬組織的11ΒHSD1、GR基因MRNA表達水平糖尿病組GRMRNA表達明顯降低P＜005，11ΒHSD1基因MRNA呈升高趨勢。經(jīng)棉酚干預后，GRMRNA表達明顯升高P＜005，11ΒHSD1MRNA表達明顯降低P＜005。3大腦皮層及海馬組織的11ΒHSD1、GR、BAX、BCL2、CASPASE3、AIF的蛋白表達海馬中，與正常組比較，糖尿病大鼠GR蛋白表達明顯降低P＜005，CASPASE3、AIF蛋白表達明顯升高P＜005，BAX蛋白表達升高顯著P＜001，11ΒHSD1蛋白表達呈升高趨勢，BCL2蛋白表達無明顯變化；經(jīng)棉酚治療后，GR蛋白表達明顯升高P＜005，BAX蛋白表達顯著降低P＜001，11ΒHSD1、CASPASE3、AIF蛋白表達明顯降低P＜005。皮層中，與正常組比較，糖尿病組大鼠GR蛋白表達顯著降低P＜001，BAX、AIF蛋白表達明顯升高P＜005，11ΒHSD1蛋白表達呈升高趨勢，BCL2、CASPASE3蛋白表達無明顯變化；經(jīng)棉酚治療后，GR蛋白表達顯著升高P＜001，11ΒHSD1、BAX、AIF蛋白表達明顯降低P＜005。4大鼠行為學方面的測試結果糖尿病組潛伏期延長顯著P＜001，搜索策略明顯變差P＜001；經(jīng)棉酚干預后，潛伏期明顯縮短P＜001，搜索策略明顯好轉P＜001。5光鏡觀察顯示糖尿病組大腦皮層及海馬神經(jīng)元細胞可見較明顯的核固縮、核濃染，神經(jīng)元細胞體積縮小經(jīng)棉酚干預后，神經(jīng)元細胞病變減輕。6電鏡結果顯示糖尿病組大腦皮層及海馬神經(jīng)元細胞核染色較深、固縮，核膜呈波浪狀、皺縮，局灶模糊；胞質(zhì)內(nèi)高爾基體擴張，線粒體水腫，局灶空泡化。經(jīng)棉酚干預后，上述超微結構變化改善。結論1棉酚可降低2型糖尿病大鼠的血糖和血皮質(zhì)酮水平，增加胰島素敏感性，并能改善2型糖尿病大鼠的脂代謝異常。這可能是其降低血糖、血脂，進而改善認知功能的機制之一。22型糖尿病大鼠大腦皮層及海馬內(nèi)BAX、CASPASE3、AIF表達升高，GR表達下降，這可能是2型糖尿病神經(jīng)元凋亡及由此導致的認知功能障礙的發(fā)病機制之一。3棉酚可降低2型糖尿病大鼠大腦皮層及海馬11ΒHSD1MRNA表達水平，升高GRMRNA表達水平；降低大腦皮層及海馬11HSD1、BAX、CASPASE3、AIF蛋白表達水平，升高GR蛋白表達水平。這可能是其降低局部皮質(zhì)酮水平，減少神經(jīng)元細胞凋亡，進而改善認知功能的機制之一。42型糖尿病大鼠在行為學上，潛伏期明顯延長，搜索策略明顯變差；而棉酚可使2型糖尿病大鼠的潛伏期縮短，搜索策略變佳，進而改善空間記憶能力。52型糖尿病大鼠在大腦皮層及海馬的組織結構形態(tài)學方面有較大的改變，這可能是糖尿病時認知功能障礙的器質(zhì)性原因，而棉酚則明顯改善形態(tài)學改變，這可能也是棉酚對糖尿病認知功能保護的原因之一。

簡介：西尼羅病毒是一種蚊子或蜱螨類傳播的蟲媒病毒，分類學上屬于黃病毒屬的黃病毒科，為RNA病毒。西尼羅病毒具有致病性高和傳染性強的特點，可以導致西尼羅熱或西尼羅病毒腦炎，其宿主動物和傳播媒介在自然界廣泛存在。該病毒具有跨地區(qū)進行世界性廣泛傳播的能力，擴大流行的潛在危險性很大，已經(jīng)引起世界各國的高度重視。西尼羅病毒的RNA基因組全長約10962BP，包含一個編碼十個病毒蛋白的開放閱讀框。編碼三種結構蛋白C，E，M，7種非結構蛋白NS1，NS2A，NS2B，NS3，NS4A，NS4B，NS5。根據(jù)E蛋白基因序列差異，西尼羅病毒分為兩個病毒株系株系1病毒能使人致病，分布在北美、歐洲、非洲、亞洲和澳大利亞等地區(qū)；株系2病毒只在非洲部分地區(qū)的動物中流行。本課題首先采用長片段RTPCR技術構建了西尼羅株系1病毒GENBANK登錄號AF196835的CDNA亞克隆，可用于進一步構建西尼羅病毒全長感染性CDNA克隆，以便用于研究西尼羅病毒復制和病理過程的分子機制；其次，制備了西尼羅病毒寡核苷酸基因芯片，為進一步研究多病毒聯(lián)合檢測芯片打下基礎。另外設計了寡核苷酸基因芯片的判別程序并將該程序應用于西尼羅病毒寡核苷酸基因芯片檢測結果的判別分析。在西尼羅株系1病毒的CDNA亞克隆構建過程中，使用長片段RTPCR技術對病毒RNA進行反轉錄是一個關鍵步驟。實驗中對長片段RTPCR條件進行了優(yōu)化第一，使用兩步法的反轉錄操作流程；第二，使用AMV和PRIMERTASE混合酶進行反轉錄反應。AMV和PRIMERTASE在55℃時仍然具有較高的活性，在優(yōu)化的操作流程中應用50℃進行反轉錄反應；第三，根據(jù)引物TM對退火溫度和延伸溫度進行了優(yōu)化，把PCR引物的退火溫度提高到6567℃。在第二輪的PCR反應中又把延伸溫度提高到72℃，大約高于TM5℃。實驗中共設計了4對引物，克隆的基因序列包括了西尼羅株系1病毒序列13631和886511030。設計的引物上引入相應的限制性酶切位點，通過這些限制性酶切位點可以將克隆片段連接起來，這樣為制備西尼羅病毒全長感染性CDNA克隆做好了準備。在5’端的引物引入一個T7啟動子位點，可以使用T7RNA聚合酶進行體外轉錄。所構建的CDNA亞克隆包括了病毒的核衣殼蛋白、M蛋白序列、E蛋白序列、非結構蛋白1NS1、非結構蛋白2ANS2A和非結構蛋白5NS5的部分序列，可用于研究西尼羅病毒的感染、復制和病理機制，也可為基因工程疫苗的研制提供材料。目前，西尼羅病毒檢測的傳統(tǒng)方法主要有間接免疫熒光、補體結合試驗、噬菌斑減少中和試驗、血細胞凝集抑制反應和病毒分離技術。這些傳統(tǒng)的檢測方法一次只能確定或排除一種病毒，不能實現(xiàn)大規(guī)模高通量的檢測，并且人體對外來病毒產(chǎn)生免疫有一定的時滯，因此這些檢測方法在病毒感染的早期診斷中敏感性很低?；蛐酒夹g為西尼羅病毒的檢測提供了一種新的途徑?；蛐酒瑱z測的對象是DNA或RNA，只要人體內(nèi)有病毒顆粒就能檢測，并能同時對多種病毒進行檢測，具有獨特的優(yōu)點?；蛐酒珿ENECHIP又稱DNA芯片，是專門用于核酸檢測的生物芯片，可分為CDNA芯片和寡核昔酸芯片兩種。本課題制備了用于西尼羅病毒檢測的寡核苷酸基因芯片。實驗中以西尼羅病毒株NY99為材料，將抽提的RNA逆轉錄后使用限制性顯示技術對樣品進行熒光標記。針對西尼羅病毒基因設計12條長度為60MER的寡核苷酸探針，然后將探針固定在氨基化的芯片片基上，通過樣品與探針的雜交實驗篩選高特異性和高靈敏度的寡核苷酸探針。同時我們將黃熱病毒、乙腦病毒和登革病毒的樣品進行逆轉錄后使用限制性顯示技術對樣品進行熒光標記，然后與西尼羅病毒寡核苷酸基因芯片雜交，用來檢驗探針的特異性。我們使用篩選的探針建立西尼羅病毒寡核苷酸基因芯片系統(tǒng)，為進一步研究多病毒聯(lián)合檢測芯片打下了基礎。實驗中還對芯片檢測靈敏度與RTPCR檢測靈敏度進行了對比研究。將西尼羅病毒的CDNA進行101、102、和103倍稀釋，分別進行芯片實驗，結果顯示病毒的CDNA原液、101和102倍稀釋液都能夠檢測出西尼羅病毒樣品，而103倍稀釋液的芯片實驗不能檢測出西尼羅病毒樣品。病毒的CDNA原液、101、102、和103倍稀釋液的RTPCR實驗結果顯示病毒的CDNA原液、101、和102倍稀釋液能夠檢測出西尼羅病毒樣品，而103倍稀釋液的RTPCR實驗不能檢測出西尼羅病毒樣品。對芯片陽性對照探針的數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計學分析，差異無顯著性意義，說明質(zhì)控系統(tǒng)穩(wěn)定。芯片實驗與RTPCR實驗結果對比說明病毒檢測芯片的靈敏度與普通RTPCR方法相當。檢測芯片制備的過程中，存在多種因素影響檢測結果的判別。如芯片類型、樣品的標記方法以及掃描設備和軟件等。芯片的檢測數(shù)據(jù)經(jīng)過掃描提取出來以后，需根據(jù)數(shù)據(jù)對實驗結果進行快速準確的判別，而檢測芯片的規(guī)格和待測的樣品各不相同，實驗結果的判別標準也不是一成不變的。通常，檢測芯片的結果主要由專業(yè)人員使用統(tǒng)計軟件或者手工計算進行人工判別，人工判別效率低并可能存在錯誤判別。因此，自動化、高效率的判別程序的開發(fā)將加快檢測芯片的推廣應用。本實驗使用VISUALBASIC60初步設計了檢測芯片的判別程序，設計的判別程序可以識別芯片掃描儀輸出的數(shù)據(jù)文件，并可根據(jù)數(shù)據(jù)文件內(nèi)的字段對數(shù)據(jù)進行自動選定。然后按照不同實驗的需要針對相應的字段設置篩選標準和閾值，根據(jù)這些篩選標準和閾值實現(xiàn)對檢測芯片的判別。判別程序可以查詢并注釋數(shù)據(jù)，包括生物芯片的相關信息及探針的生物學信息。判別程序完成分析后，會列出一個詳細的判別結果，包括檢測芯片中的各個樣品的檢測結果、參考值的范圍等。因此，通過判別程序?qū)π酒瑨呙钄?shù)據(jù)的分析、抽提和判別，初步實現(xiàn)了檢測芯片結果的判別分析自動化。為開發(fā)高效、自動化的判別軟件打下了基礎。綜上所述，本研究采用長片段RTPCR技術構建了西尼羅株系1病毒的CDNA亞克??；使用寡核苷酸探針制備了西尼羅病毒基因芯片，并進行了檢測芯片靈敏度的實驗室驗證；設計了檢測芯片的判別程序，為實現(xiàn)檢測芯片結果的自動化判別打下了基礎。結果證實，研制的西尼羅病毒基因芯片可成功用于西尼羅病毒的實驗室檢測。針對檢測芯片設計的判別程序可實現(xiàn)芯片數(shù)據(jù)的自動化判別分析，進而將芯片掃描、數(shù)據(jù)提取和結果判別整個過程有機結合，提高了檢測芯片應用的效率。

簡介：同等學力人員申請碩士學位論文單位代碼10472學號；500120150中圖分類號R6密級公JT斃仰搿學忿碩士學位論文腦積水患者腦脊液中P38表達及其認知功能在手術前后變化的研究STUDYONEXPRESSIONOFP38INCEREBROSPINALFLUIDOFHYDROCEPHALUSPATIENTSANDCOGNITIVEFUNCTIONCHANGESBEFOREANDAFTEROPERATION學位申請者姓名衄目指導教師韭塹蟲數(shù)援學科、專業(yè)外科學申請答辯年度二。一四年論文提交日期二。一四年三月目錄摘要1ABSTRACT36JF言‘44日U吾L材料和方法6結果20討論29結論35參考文獻36綜述44參考文獻49縮略詞表55個人簡歷56致謝57

簡介：中南大學碩士學位論文乙肝病毒感染孕婦生活質(zhì)量及其相關因素研究姓名楊曉敏申請學位級別碩士專業(yè)護理學指導教師羅陽20090501碩士學位論文中文摘要居住地、乙肝類型、乙肝病程、早孕反應、醫(yī)藥費用支付方式、夫妻感情、焦慮、抑郁、主觀支持、客觀支持等。結論1乙肝病毒感染孕婦生活質(zhì)量較差，廣泛存在焦慮、抑郁情緒。2影響其生活質(zhì)量的因素為年齡、文化程度、居住地、乙肝類型、乙肝病程、早孕反應、醫(yī)藥費用支付方式、夫妻感情、焦慮、抑郁、主觀支持、客觀支持等。關鍵詞孕婦，HBV感染，生活質(zhì)量，焦慮，抑郁

簡介：目的慢性阻塞性肺?。–OPD）是一種重要的慢性呼吸系統(tǒng)疾病為進一步探討病毒感染對COPD急性發(fā)作期患者免疫功能的影響我們同步檢測COPD急性發(fā)作期患者自然殺傷細胞活性（NKA）、T淋巴細胞亞群、體液免疫球蛋白和呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯薩奇病毒和巨細胞病毒特異抗體IGG、IGM分析它們之間的相互關系進而探討病毒感染與COPD免疫功能的關系結論1、病毒感染是COPD反復急性發(fā)作的主要因素之一2、COPD急性發(fā)作期NKA和T淋巴細胞亞群顯著降低而對體液免疫無明顯影響3、病毒感染對COPD患者的細胞免疫功能有明顯抑制作用病毒抗體陽性組細胞免疫功能明顯低于抗體陰性組頻繁發(fā)作組細胞免疫功能低于偶發(fā)組

簡介：目的1了解圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后女性的圍絕經(jīng)期癥狀、血清性激素水平及認知功能變化；2評估激素補充治療HRT對絕經(jīng)早期婦女血清雌激素水平與認知功能的影響。方法1對2010年11月～2010年12月在東南大學附屬中大醫(yī)院體檢中心行健康體檢的215例不同年齡階段的女性，進行一般情況、絕經(jīng)期生存質(zhì)量量表、KMI等調(diào)查，并進行統(tǒng)計分析。2從中篩選研究對象共90例，按STRAW分期、絕經(jīng)年限長短及是否使用激素治療分為①育齡對照組20例；②圍絕經(jīng)期組17例；③絕經(jīng)早期組21例；④絕經(jīng)晚期組22例；⑤HRT組10例。分別測定血清雌二醇E2、卵泡刺激素FSH、雄激素T、總膽固醇TC及甘油三酯TG的水平，并進行簡易智能狀態(tài)檢查MMSE、聽覺詞語學習測試AVLT、數(shù)字廣度測試DST、言語流暢性測驗VFT、復雜圖形測試CFT。比較各組E2、FSH、T、TC及TG測定值，及認知功能測試得分，并分析其相關性。3按一般情況、絕經(jīng)年限等調(diào)查結果，組間匹配①HRT組10例；②非HRT組20例。分別比較血清E2、FSH及T水平，及認知功能測試得分的組間差異。結果1與健康育齡組比較，圍絕經(jīng)期組、絕經(jīng)早期組、絕經(jīng)晚期組E2、T水平明顯下降，F(xiàn)SH水平明顯升高P005。HRT組AVLT、VFT得分明顯高于非HRT組，CFT耗時明顯低于非HRT組P005。結論1女性圍絕經(jīng)及絕經(jīng)后血清E2、T水平呈下降趨勢，F(xiàn)SH水平漸升高，KMI逐漸增加。KMI與血清E2、T水平負相關，與血清FSH水平正相關；2婦女絕經(jīng)后BMI明顯增加，血清TG、TC水平顯著升高，BMI與TG水平正相關；KMI與血清TG、TC水平正相關；3與健康育齡對照組比較，女性絕經(jīng)后認知功能明顯衰退，E2、T水平下降及FSH水平上升，可能與認知功能減退相關；4HRT可能有益于絕經(jīng)早期婦女的語言表達能力及短時記憶能力。

簡介：分類號分類號R614R614學校代碼學校代碼1039210392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100217100217學號21210032422121003242碩士學位學位論文論文七氟烷預處理對窒息新生鼠七氟烷預處理對窒息新生鼠海馬海馬CA1CA1區(qū)神經(jīng)元自噬及遠期認知功能的影響區(qū)神經(jīng)元自噬及遠期認知功能的影響EFFECTOFSEVOFLURANEPRECONDITIONINGONHIPPOCAMPALCA1REGIONNEURONSAUTOPHAGYANDLONGTERMCOGNITIVEFUNCTIONINNEWBORNRATWITHASPHYXIA學位類型型醫(yī)學碩士醫(yī)學碩士所在學院院協(xié)和臨床醫(yī)學院協(xié)和臨床醫(yī)學院申請人姓名申請人姓名李吹雨李吹雨學科學科、專業(yè)專業(yè)麻醉學麻醉學導師師張良成張良成教授教授研究起止日期研究起止日期20132013年1212月至月至20152015年1月答辯委員會主席答辯委員會主席林財珠林財珠教授教授答辯日期期20152015年6月1日二○一五○一五年福建醫(yī)科大學碩士學位論文目錄目錄中文摘要中文摘要1英文摘要英文摘要3前言前言7第一部分第一部分新生鼠窒息模型的建立新生鼠窒息模型的建立1010材料材料1010方法方法1212結果結果1515討論討論2020第二部分第二部分七氟烷預處理對窒息新生鼠海馬七氟烷預處理對窒息新生鼠海馬CA1CA1區(qū)神經(jīng)元自噬及遠期區(qū)神經(jīng)元自噬及遠期認知功能的影響認知功能的影響2121材料材料2121方法方法2424結果結果3030討論討論4444結論結論4848