HIF-1α在缺糖缺氧誘導的原代皮質神經元Necroptosis中的表達及其意義.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩58頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的：研究低氧誘導因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)是否參與缺糖缺氧誘導的原代皮質神經元Necroptosis， necrostatin-1(Nec-1)對其表達是否有影響。
　　 方法：原代皮質神經元培養(yǎng)14天，予Casepase抑制劑z-VAD-FMK20μmol/L預保護，缺糖缺氧(OGD)2h、再灌注0、2、6、12、24、48h，進行LDH測定RT-PCR測HIF-1α

2、RNA表達；免疫組化定性檢測HIF-1α表達情況；Western blot檢測總HIF-1α蛋白表達情況；分別提取細胞質、細胞核蛋白，Western blot分別檢測胞質、胞核內HIF-1α蛋白表達情況。予不同濃度Nec-1(0.1、1、5、10、25、50μmol/L)，原代皮質神經元OGD后檢測LDH, RT-PCR和Western blot測HIF-1αRNA和蛋亡1表達。予YC-1(4μ mol/L)預作用30min, OGD2

3、h再灌注12h檢測HIF-1α蛋白表達水平及LDH水平。
　　 結果：Casepase抑制劑z-VAD-FMK(20μmol/L)預作用30min，缺糖缺氧2h后培養(yǎng)基中LDH增加（P＜0.05），再灌注12h達高峰；缺糖缺氧后HIF-1αRNA表達無變化（P＞0.05）；免疫組化檢測顯示細胞核和細胞質內均有蛋白表達；HIF-1α總蛋白表達增加(P＜0.05)，再灌注12h達高峰；神經元OGD2h、再灌注6h時細胞質HIF-1α

4、蛋白表達達高峰(P＜0.05)，隨后降低；再灌注12h時，細胞核HIF-1α蛋白表達達高峰(P＜0.05)，隨后降低。Nec-15μmol/L時LDH明顯降低（P＜0.05），25umol/L時與正常組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。予Nec-125μmol/L時HIF-1α蛋白明顯減少（P＜0.05），RNA無明顯變化。予YC-1(4μ mol/L)作用后HIF-1α蛋白表達明顯降低(P＜0.05), LDH水平明顯降低(P＜0

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論