簡介：中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我校或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名奎丕杰至壘日期冱2旦S，2≥中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名三中文結(jié)構(gòu)式摘要老年急性腦梗死患者血管性認(rèn)知功能障礙相關(guān)因素探討目的探討老年急性腦梗死患者血管性認(rèn)知功能障礙有關(guān)血管性危險因素及其影像學(xué)改變特點。方法采用病例對照研究。收集本院2009年3月至2009年8月間54例有血管性認(rèn)知功能障礙的老年急性腦梗死患者VCI組及同時期66例無血管性認(rèn)知功能障礙的老年急性腦梗死患者對照組的臨床資料，采用MMSE量表行認(rèn)知功能評估并經(jīng)CT或MRI行病灶部位和范圍檢測，分析血管性認(rèn)知功能障礙與各影響因素之間的關(guān)系。結(jié)果VCI組中吸煙、高血壓、糖尿病、高血脂、高纖維蛋白原水平、頸動脈斑塊發(fā)生率與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義P005，VCI組中左半球梗死、額葉梗死及顳葉梗死發(fā)生率與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義Q005。結(jié)論老年急性腦梗死患者吸煙、高血壓、糖尿病、高血脂、高纖維蛋白原水平、頸動脈斑塊形成及左半球梗死、額葉梗死、顳葉梗死可作為血管性認(rèn)知功能障礙的預(yù)測因素。關(guān)鍵詞血管性認(rèn)知功能障礙血管性危險因素腦梗死

簡介：背景與目的慢性丙型肝炎是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病。目前國內(nèi)外推薦的標(biāo)準(zhǔn)治療方案為長效干擾素加利巴韋林的聯(lián)合抗病毒治療然而仍有近一半的患者未能獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答SVR且不同種族患者對聯(lián)合治療的應(yīng)答存在較大的差異。本課題同時從宿主及病毒二個方面研究與抗病毒治療應(yīng)答相關(guān)的因素為慢性丙型肝炎患者的個體化治療提供科學(xué)依據(jù)及臨床預(yù)測指標(biāo)。研究對象與方法對259例慢性丙型肝炎患者IL28B基因型、病毒基因型、治療前載量、治療過程中的應(yīng)答等進(jìn)行研究通過多元素分析和單因素分析方法對影響治療結(jié)束時應(yīng)答ETR及持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答SVR的相關(guān)因素進(jìn)行分析。此外收集了5例慢性丙型肝炎治療應(yīng)答者治療前P0組及治療12周P1組的血漿1例無應(yīng)答患者治療前P3組血漿及5例健康對照者N組血漿對不同組別樣本進(jìn)行血漿RNA抽提并進(jìn)行血漿MIRNA芯片篩查。結(jié)果第一部分1在259例慢性丙型肝炎患者中CC型是主要的基因型8764％227259。2單因素分析研究發(fā)現(xiàn)IL28B基因CC型的患者與非基因CC型相比能獲得更高的ETR率P00044與SVR率P00046通過多變量分析也證實同樣結(jié)果ETR率比值比898395％置信區(qū)間CI217337145P00024SVR率2429895％CI22725990P00083。3在HCV基因1B型患者中IL28B基因CC型患者可以獲得比非CC型更高的ETR率P00014和SVR率P00007但在HCV基因非1B型患者中二者無顯著差異在IL28B基因非CC型患者中HCV基因N1B可以獲得比1B型更高的ETR率P00350和SVR率P00222但在IL28B基因CC型患者中二者無顯著差異。4獲得快速病毒學(xué)應(yīng)答RVR的患者可取得比未獲得者更高的ETR率P＜00001和SVR率P＜00001即使在IL28B基因NCC型患者中RVR患者也能獲得比NRVR患者更好的抗病毒療效。第二部分通過血漿MIRNA表達(dá)譜芯片分析篩選出了6個可能與慢性HCV感染相關(guān)的血漿MIRNA分子及10個可能與抗病毒療效相關(guān)的血漿MIRNA分子。結(jié)論我國漢族人群IL28B基因型主要為CC型可能是能夠獲得較高SVR率的重要原因之一綜合分析宿主IL28B基因型、病毒基因型、快速病毒學(xué)應(yīng)答等可以更加科學(xué)、準(zhǔn)確的預(yù)測抗病毒療效。血漿中存在可能與HCV感染慢性化及抗病毒療效密切相關(guān)的MIRNA分子有待進(jìn)一步研究。

簡介：目的為研究促血管生長因子基因?qū)π募〖?xì)胞轉(zhuǎn)染的靶向性該課題構(gòu)建以MLC2V為啟動子、目的基因為HVEGF的重組腺病毒ADMLCHVEGF并同步構(gòu)建以MLC2V為啟動子、報告基因為GFP的重組腺病毒ADMLCGFP以ADMLCGFP體、內(nèi)外轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞定性檢測在心肌靶向性啟動子MLC2V作用下目的基因轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞的靶向性以ADMLCHVEGF體外轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞檢測VEGF蛋白質(zhì)的表達(dá)及其對血管內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究以MLC2V為啟動子的重組腺病毒轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞后對目的基因表達(dá)的影響為基因靶向性治療心肌缺血等心臟疾病提供依據(jù)方法1靶向性重組腺病毒載體ADMLCHVEGF的構(gòu)建2ADMLCGFP體外靶向性轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞的實驗研究3ADMLCGFP體內(nèi)靶向性轉(zhuǎn)染心肌的實驗研究4ADMLCHVEGF體外轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞的實驗研究

簡介：點擊查看更多誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在病毒性心肌炎發(fā)病機制中作用的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多鼠白細(xì)胞介素-10腺病毒載體重組質(zhì)粒的構(gòu)建.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：1中圖分類號中圖分類號R89；R36；R39碩士學(xué)位論文院（系）、所院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名研究生姓名曲萌學(xué)科、專學(xué)科、專業(yè)神經(jīng)內(nèi)科學(xué)導(dǎo)師姓導(dǎo)師姓名肖軍教授二Ο一二年四月年四月鹽酸多奈哌齊治療輕度認(rèn)知功能障礙的臨床研究鹽酸多奈哌齊治療輕度認(rèn)知功能障礙的臨床研究3鹽酸多奈哌齊治療輕度認(rèn)知功能障礙的臨床研究鹽酸多奈哌齊治療輕度認(rèn)知功能障礙的臨床研究摘要目的目的阿爾茨海默?。ˋLZHEIMER’SDISEASE，AD是老年人的以認(rèn)知功能障礙和行為損害進(jìn)行性加重為主要表現(xiàn)的發(fā)生在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的退行性病理改變，是老年癡呆中最常見的類型。AΒ蛋白的產(chǎn)生、聚集和沉積啟動后續(xù)一系列細(xì)胞、分子事件（如AΒ沉積、TAU蛋白過度磷酸化、氧化應(yīng)激損傷興奮性氨基酸毒性等），最終導(dǎo)致神經(jīng)元死亡。這是AD發(fā)病的重要機制。柳葉刀神經(jīng)病學(xué)雜志于2010年10月11日在線發(fā)表了一份關(guān)于AD定義修訂的專家團(tuán)意見書，文中指出AD應(yīng)是一個連續(xù)的臨床變化過程，并不局限于是一種癡呆綜合征，而是包括了MCI在內(nèi)的該疾病的不同階段。對MCI進(jìn)行早期干預(yù)和治療是防止或延遲認(rèn)知損害進(jìn)一步加重的有效措施，能有效減少AD所帶來的危害，從而減輕對社會和家庭所造成的各種負(fù)擔(dān)。但現(xiàn)在的情況是被臨床診斷的患者大多都已經(jīng)是AD的中期或晚期，目前可以采用的治療辦法只是能夠使對患者的癥狀適當(dāng)減輕，并不能制止或逆轉(zhuǎn)疾病的惡化。關(guān)于如何對MCI進(jìn)行治療以及對MCI向癡呆的發(fā)展進(jìn)行干預(yù)的研究，目前還處在探索階段。AD患者認(rèn)知逐漸惡化與大腦中膽堿能神經(jīng)元的漸進(jìn)損失和乙酰膽堿ACH水平降低相關(guān)，特別是顳葉、頂葉皮層和海馬中乙酰膽堿水平的下降。ACHE是正常腦組織中降解乙酰膽堿最主要的酶，膽堿酯酶抑制劑（INHIBITOFACETYLCHOLINESTERASE，ACHEI）可有效增加突

簡介：本研究首先應(yīng)用T7噬菌體展示庫技術(shù)，以HCV3NCR為誘餌篩檢T7噬菌體人肝細(xì)胞文庫，尋找與HCV3NCR相互作用并參與HCV基因復(fù)制的細(xì)胞蛋白。首先體外轉(zhuǎn)錄了來自HCV基因組全長的3NCR，使之與生物素標(biāo)記的寡聚DNA退火結(jié)合，經(jīng)過三輪的重復(fù)篩選，最終獲得5個細(xì)胞蛋白，分別為剪接因子U2B、線粒體上的NADH脫氫酶亞單位3、細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅱ、細(xì)胞色素P450超家族成員及一種功能未知的蛋白?；赗NA剪接因子可能與HCV3NCR相互作用、調(diào)節(jié)HCV復(fù)制的推測，本研究進(jìn)一步探討了剪接因子U2B蛋白在HCV基因復(fù)制中的作用。通過構(gòu)建了針對U2B蛋白的RNA干擾重組質(zhì)粒，發(fā)現(xiàn)可特異、有效地抑制HCV亞基因組復(fù)制子細(xì)胞中內(nèi)源性U2B蛋白的表達(dá)。進(jìn)一步通過定量RTPCR和WESTERNBLOT分別檢測U2B表達(dá)抑制后復(fù)制子細(xì)胞中HCV復(fù)制、翻譯的改變，發(fā)現(xiàn)HCV亞基因組復(fù)制子細(xì)胞中內(nèi)源性U2B蛋白的表達(dá)被抑制后，該細(xì)胞中HCV亞基因組的病毒RNA和蛋白質(zhì)水平反而比對照組有顯著增加，提示U2B參與調(diào)節(jié)HCV的復(fù)制且對HCV的復(fù)制、翻譯有負(fù)調(diào)控作用。為了驗證核蛋白U2B在HCV復(fù)制子細(xì)胞中能定位于HCV復(fù)制發(fā)生的胞漿，進(jìn)一步分離了復(fù)制子細(xì)胞的各亞細(xì)胞組分包括HCV復(fù)制復(fù)合體所在的脂筏結(jié)構(gòu)，通過WESTERNBLOT發(fā)現(xiàn)在HCV復(fù)制子細(xì)胞的胞漿及脂筏結(jié)構(gòu)中均有U2B的分布，說明U2B蛋白可以參與到HCV的復(fù)制過程，推測其可能是HCV復(fù)制復(fù)合體的組分之一。綜上所述，本研究應(yīng)用T7噬菌體展示庫技術(shù)對T7噬菌體人肝細(xì)胞文庫進(jìn)行了篩選，獲得5種可能與HCV3NCR相互作用的細(xì)胞蛋白，包括U2B等。通過RNA干擾技術(shù)發(fā)現(xiàn)U2B蛋白對HCV的復(fù)制、翻譯有負(fù)調(diào)控作用；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)核蛋白U2B可以分布于含有HCV復(fù)制復(fù)合體成分的的胞漿及脂筏結(jié)構(gòu)中。

簡介：目的1建立可長期培養(yǎng)的抗原特異性的TH1TH2克隆及細(xì)胞系。2克隆小鼠ROG基因，構(gòu)建表達(dá)ROG的重組腺相關(guān)病毒載體PAAVROG，制備表達(dá)ROG的重組腺相關(guān)病毒RAAVROG，研究RAAVROG對哮喘的保護(hù)作用。方法用卵蛋白OVA免疫BALBC小鼠，1014D后取淋巴結(jié)細(xì)胞在體外用同系脾細(xì)胞和OVA反復(fù)刺激，然后分別用IL2、IFNΓ及IL2、IL4共同培養(yǎng)，并同時加入同系脾細(xì)胞和OVA，進(jìn)行TH1和TH2克隆的誘導(dǎo)，并通過有限稀釋法進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。對克隆化的細(xì)胞用ELISPOT技術(shù)檢測其分泌細(xì)胞因子的特性。設(shè)計、合成引物，通過RTPCR法從CTLL2細(xì)胞總RNA中擴(kuò)增ROG基因，測序成功后，最終連接于PAAVMCS，雙酶切、PCR鑒定陽性重組質(zhì)粒，并在HELA細(xì)胞中表達(dá)，測序鑒定其正確性；大量制備PAAVROG、PAAVRC、PHELPER、PAAVLACZ質(zhì)粒，并調(diào)整質(zhì)粒濃度到1ΜGΜL。應(yīng)用DMEM高糖培養(yǎng)基，AAV293細(xì)胞超過50％傳代；培養(yǎng)AAV293細(xì)胞使之達(dá)到7080％融合用于轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染方法采用磷酸鈣法，分六組，A組不加DNA；B組PAAVROG、PAAVRC、PHELPER各10ΜG共轉(zhuǎn)染AAV293細(xì)胞。C組和D組分別取PAAVRHGFP和PAAVLACZ取代PAAVROG，與PAAVRC、PHELPER為對照。E組和F組分別為不加PAAVRC、PHELPER，其它操作均同B。鏡下觀察病毒顆粒的產(chǎn)生及培養(yǎng)基的變化。轉(zhuǎn)染后6小時換新鮮培養(yǎng)基，72H收集細(xì)胞及培養(yǎng)基置于離心管中，將離心管交替置于干冰及37℃水浴中各10分鐘，交替4次后室溫離心，取上清80℃凍存。進(jìn)一步濃縮采用無水乙醇法。用HELA細(xì)胞通過測定對照RAAVLACZ的病毒滴度間接確定RAAVROG、RAAVRHGFP的滴度。制備小鼠支氣管哮喘模型應(yīng)用卵蛋白，動物用BALBC鼠，雌性，體重2530MG，隨機分為3組，A組以PBS代替OVA激發(fā)與致敏；B組和C組均用OVA致敏和激發(fā)，但B組用重組腺相關(guān)病毒處理；C組以PBS處理。按初免劑量10ΜG次鼠時間1D、8D、15D，激發(fā)劑量10ΜG次鼠時間26D、27D、28D的方案制備小鼠支氣管哮喘模型。B組在初免的第2周經(jīng)鼻滴入50ΜL重組腺相關(guān)病毒溶液，C組予以相同體積的PBS溶液；于29D分批對小鼠進(jìn)行肺泡灌洗，研究肺泡灌洗液中細(xì)胞數(shù)的變化；同時肺組織行HE染色和免疫組化檢查。各組數(shù)值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用完全隨機設(shè)計資料均數(shù)的T檢驗。以P＜005為差異顯著。結(jié)果共獲得了5個TH1TH2細(xì)胞克隆，它們分泌不同的細(xì)胞因子；H2D限制性分析表明這些T細(xì)胞僅在以BALBC小鼠的脾細(xì)胞作為抗原遞呈細(xì)胞時才對OVA產(chǎn)生應(yīng)答；不同抗原刺激表明，所獲得的T細(xì)胞僅對OVA產(chǎn)生特異性應(yīng)答，而其它抗原刺激后增殖反應(yīng)不明顯；ELISPOT分析表明，加入不同誘導(dǎo)因素的克隆分別表達(dá)較高水平的IFNΓ和IL4。成功擴(kuò)增了小鼠ROG基因，經(jīng)測序證明其與GENEBANK上的序列一致；構(gòu)建可表達(dá)ROG基因的重組腺相關(guān)病毒載體PAAVROG。轉(zhuǎn)染AAV293細(xì)胞3天后，100普通光學(xué)顯微鏡下可見A組細(xì)胞貼壁完整，培養(yǎng)液呈紅色；B組細(xì)胞變圓，并懸浮，培養(yǎng)液的顏色呈橘黃色；C、D組細(xì)胞同B組；C組在熒光顯微鏡下可見到綠色熒光表達(dá)；E、F組細(xì)胞表現(xiàn)與A組相似。獲得純化病毒的滴度為21011ML。用卵蛋白復(fù)制小鼠支氣管哮喘模型；應(yīng)用重組腺相關(guān)病毒的小鼠激發(fā)后動物并無哮喘的相應(yīng)癥狀。各組小鼠經(jīng)肺泡灌洗后對肺泡灌洗液進(jìn)行瑞氏染色表明應(yīng)用重組腺相關(guān)病毒后灌洗液中的細(xì)胞成份明顯變化。免疫組小鼠與正常對照和哮喘激發(fā)加重組腺相關(guān)病毒組比具有明顯統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論1建立了可長期培養(yǎng)的卵蛋白特異性TH1TH2細(xì)胞克隆。2獲得的表達(dá)小鼠ROG的重組腺相關(guān)病毒RAAVROG，對抗原誘發(fā)的小鼠支氣管哮喘具有保護(hù)作用。

簡介：分類號單位代碼學(xué)號馨了了博士學(xué)位論文論文題目與氛、交哪粉和‘枷以‘只癡么秘后‘”尸”冷韌礴咋裘、侈閑楊，行憑作者姓名專業(yè)指導(dǎo)教師姓名專業(yè)技術(shù)職務(wù)秘與寫林粉、了司哪盜報腳歹年上月乃日山東大學(xué)博一論文鳥氨酸脫梭酶和一腺昔甲硫氨酸脫梭酶雙反義腺病毒載體介導(dǎo)的多胺枯竭對大腸癌抑制作用的研究專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)博士生張冰導(dǎo)師劉賢錫教授中文摘要腐胺、精瞇和精胺是廣泛存在于生物體內(nèi)的陽離子脂肪族化合物。在正常條件下多胺在每個原子上都帶有一個正電荷，因此易與多聚陰離子化合物如和發(fā)生反應(yīng)〔，，，從而在正常細(xì)胞生長和分化過程中發(fā)揮著重要的作用。在哺乳動物細(xì)胞中多胺的內(nèi)源性合成主要受鳥氨酸脫梭酶和一腺昔甲硫氨酸脫梭酶一調(diào)控。是多胺合成的第一個酶，它的作用是催化鳥氨酸脫梭形成腐胺。作為多胺合成途徑中的第二個限速酶的作用則有所不同，它主要是催化一腺昔甲硫氨酸脫梭形成丙氨基，丙氨基再在精瞇合成酶和精胺合成酶的作用下使腐胺逐級形成精胖和精胺。另外研究表明上皮細(xì)胞也可以通過一種機制不清的轉(zhuǎn)運方式吸收外源性的多胺。多胺合成不僅對維持正常細(xì)胞功能發(fā)揮著重要的作用，并且與惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。現(xiàn)己發(fā)現(xiàn)在多種人類癌細(xì)胞和癌組織中多胺的水平和和活性明顯升高〔一習(xí)。多種化學(xué)致癌劑和腫瘤促進(jìn)因子如一，可以活化正常組織中的和【一，。而且過表達(dá)和還可以促進(jìn)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化〔，”。因此多胺合成途徑成為癌癥防治和治療的重要靶標(biāo)。大腸癌是最常見的腫瘤之一，在所有癌癥致死率中居第二位‘。美國和歐洲每年大約有和個新發(fā)病例‘’。在我國隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的改變，發(fā)病率也在逐年升高。目前一線治療手段主要是手術(shù)和化療，但五年生存率只能達(dá)到「”’。因此尋找一種新型非手術(shù)干預(yù)的治療方法對于大腸癌的預(yù)防和治療具有非常重要意義。以往研究已經(jīng)證實大腸癌與多胺合成途徑關(guān)系密切。在

簡介：點擊查看更多腺病毒介導(dǎo)的huVEGF-,121-基因轉(zhuǎn)染促進(jìn)液氮冷凍兔壞死股骨頭再血管化的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類編號密級單位代碼10065學(xué)號天滓?guī)熫么髮W(xué)研究生學(xué)位論文論文題目認(rèn)知事件相關(guān)電位P300與兒童工作記憶的發(fā)展研究學(xué)生姓名王雪絲申請學(xué)位級別亟申請專業(yè)名稱筮匱復(fù)數(shù)直墜理堂研究方向達(dá)翅發(fā)屋指導(dǎo)教師姓名梁福盛專業(yè)技術(shù)職稱數(shù)拯提交論文日期2QQ生旦321工作記憶廣度的測量13322實驗儀器13323事件相關(guān)電位刺激和作業(yè)15324數(shù)據(jù)處理154結(jié)果1641兒童的工作記憶水平與P300的關(guān)系1641I兒童的工作記憶水平與P300各成分的相關(guān)分析1641。2兒童的工作記憶水平與P300各成分的差異性分析1742兒童工作記憶發(fā)展的P300年齡特征K’18421不同年齡組兒童P300各成分的差異性分析18422不同年齡組兒童在P3潛伏期與振幅上的比較2243不同性別兒童的P300各成分的差異性分析235討論一2451兒童工作記憶水平與神經(jīng)電生理學(xué)關(guān)系2452不同年齡組兒童P300各成分的差異性分析2553不同性YJIJL童P300各成分的差異性分析276結(jié)論287參考文獻(xiàn)298附錄33后記35

簡介：維、漢民族首發(fā)抑郁癥患者血清同型半胱氨酸水平與認(rèn)知功能及P300的關(guān)系研究生劉明超指導(dǎo)教師庫木斯巴雅合買提副教授研究方向抑郁癥認(rèn)知功能障礙2015年3月論文獨創(chuàng)性說明本人申明所呈交的學(xué)位論文是在我個人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名塑巡導(dǎo)師簽名阜埠呼緇妊簽字日期至絲￡三簽字日期蘭型笸蘭關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解學(xué)校關(guān)于保留、使用學(xué)位論文的各項規(guī)定，選擇“同意／不同意”以下事項1學(xué)校有權(quán)保留本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文；2學(xué)校有權(quán)將本人的學(xué)位論文提交至清華大學(xué)“中國學(xué)術(shù)期TTJ光盤版、電子雜志社“用于出版和編入CNFD中國知識資源總庫或其他同類數(shù)據(jù)庫，傳播本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。學(xué)位論文作者簽名函臼J望巴簽字日期五塑￡蘭導(dǎo)師簽名毒睦皇。巴霉坯通址簽字日期業(yè)

簡介：為解決脂質(zhì)體攜帶目的基因轉(zhuǎn)載效率低下及瞬時表達(dá)的問題我們擬采用腺病毒作為載體來實施瘢痕疙瘩的基因治療結(jié)論1該文介紹的兩種方法可以成功地構(gòu)建出攜帶FAS基因的重組腺病毒即細(xì)菌內(nèi)重組腺病毒ADFASB及常規(guī)重組腺病毒ADFAST并且構(gòu)建出不攜帶目的基因的空腺病毒ADC用作對照2重組腺病毒ADFASB及ADFAST的瘢痕疙瘩基因治療的體外實驗顯示FAS蛋白可高效且穩(wěn)定地在轉(zhuǎn)染后的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞中表達(dá)且經(jīng)過轉(zhuǎn)染導(dǎo)入FAS基因后瘢痕疙瘩細(xì)胞的FAS通道能得以穩(wěn)定重建再次印證了FAS基因突變與瘢痕疙瘩之間的聯(lián)系3重組腺病毒ADFASB及ADFAST的瘢痕疙瘩基因治療的動物實驗顯示了令人滿意的結(jié)果為瘢痕疙瘩的治療展示了一條全新的途徑

簡介：目的觀察中、重型外傷性顱腦損傷TBI患者經(jīng)針刺療法結(jié)合康復(fù)訓(xùn)練后對患者運動功能、平衡功能、認(rèn)知功能及ADI的影響，觀察治療前后血液流變學(xué)指標(biāo)及超氧化物歧化酶SOD水平的變化。方法將59例入選病例隨機分為針康組和常規(guī)組，所有患者均接受常規(guī)藥物治療，胃腸營養(yǎng)，防治并發(fā)癥，高壓氧及電、光、聲等物理因子療法針康組在此基礎(chǔ)上進(jìn)行針刺結(jié)合康復(fù)訓(xùn)練，為期6周。采用FUGLMEYER量表分別對兩組患者下肢運動功能、平衡功能進(jìn)行評定，用BARTHEL指數(shù)評定患者日常生活能力ADL；認(rèn)知功能評定采用簡明精神狀態(tài)檢查MMSE；在25℃恒溫下應(yīng)用血液流變儀測定高低切變力下全血比粘度、血漿比粘度、血沉、紅細(xì)胞壓積；采用嘌呤氧化酶法測定血清SOD活力。結(jié)果治療后兩組問患者下肢運動功能、平衡功能及ADL，積分、MMSE總分以及血液流變學(xué)指標(biāo)、血清SOD活力等指標(biāo)均有改善；與治療前比較，差異均有顯著性P005，而針康組療效更優(yōu)于常規(guī)組P005。結(jié)論康復(fù)訓(xùn)練加針刺療法可明顯提高巾、重型TBI患者下肢運動功能、平衡功能、認(rèn)知功能及ADL。積分值，改善血液流變學(xué)指標(biāo)及超氧化物歧化酶SOD水平，對功能恢復(fù)有積極的作用。

簡介：獲得性免疫缺陷綜合征ACQUIREDIMUNODEFICIENCYSYNDROME，AIDS即艾滋病，是由人免疫缺陷病毒HUMANIMMINUNODEFICIENCYVIRUS，HIV感染引起的一種惡性傳染病。自從1981年在美國首次發(fā)現(xiàn)該病以來，全球已有6500多萬感染病例，艾滋病還在以驚人的速度蔓延著，嚴(yán)重威脅人類的健康。HIV基因高度變異，逃避免疫監(jiān)視，使得傳統(tǒng)疫苗較難產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)。核酸疫苗是從基因治療領(lǐng)域發(fā)展起來的一種全新的免疫防治劑，可同時誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答，安全性好，構(gòu)建靈活，成為一種非常有希望的艾滋病候選疫苗。PSFV1載體為衍生于塞姆利基森林病毒SEMLIKIFESTVIRUS，SFVRNA復(fù)制子的真核表達(dá)載體，但此載體系統(tǒng)應(yīng)用時需在體外將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)錄成RNA，操作很不方便，限制了其廣泛應(yīng)用。為此，本研究通過分子克隆技術(shù)，將SFV的復(fù)制子插入到真核表達(dá)載體PIRESNEO的CMVIE立即早期啟動子和腺苷酸轉(zhuǎn)錄終止信號POLYA之間，構(gòu)建了含塞姆利基森林病毒復(fù)制子的DNA表達(dá)載體PCS，改造后的載體可按常規(guī)DNA疫苗的方式進(jìn)行制備、免疫，克服了原載體PSFV1體外轉(zhuǎn)錄制備RNA的弊端。將增強型綠色熒光蛋白EGFP基因片段插入到PCS載體多克隆位點中，得到PCSEGFP，用其轉(zhuǎn)染BHK21細(xì)胞，熒光顯微鏡下能觀察到EGFP的表達(dá)產(chǎn)物增強型綠色熒光蛋白，表明該新型表達(dá)載體可以用于表達(dá)外源基因。為了探討此新型載體PCS用于研制抗病毒疫苗的可能性，本研究選擇HIV優(yōu)勢抗原表位，以HIV1表位基因為基礎(chǔ)，對抗原基因進(jìn)行人工分子設(shè)計，將HIV多表位基因MULTIPLEEPITOPEGENE，MEG與HIV1巨分子顆粒P24進(jìn)行嵌合。從已構(gòu)建保存的PVAX1MEGP24酶切下HIV嵌合多表位MEGP24基因，克隆到PCS表達(dá)載體中，成功構(gòu)建了含塞姆利基森林病毒復(fù)制子的HIV多表位核酸疫苗PCSMEGP24。間接免疫熒光試驗IFA檢測表明MEGP24基因在轉(zhuǎn)染BHK21細(xì)胞中得到有效表達(dá)，RTPCR可檢測到MEGP24基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物MRNA。綜上所述，本試驗成功構(gòu)建PCSMEGP24核酸疫苗，證實了其可在真核細(xì)胞中表達(dá)目的基因，為其進(jìn)一步深入研究和應(yīng)用打下了基礎(chǔ)。